基质金属蛋白酶-9和细胞外信号调节激酶1/2在哮喘中的表达及其与CCR3/RANTES信号轴的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在哮喘中的表达水平,并进一步探讨两者与CCR3/RANTES信号轴的关系。方法复制小鼠哮喘模型,分为对照组、哮喘组、干预组。3组小鼠处死后进行肺泡灌洗,收集肺泡灌洗液,对各细胞进行计数,取右肺叶进行苏木精-伊红染色法染色,免疫荧光法检测CCR3在支气管上皮细胞的表达。体外实验分别用活化正常T细胞表达分泌的调节蛋白(RANTES)及RANTES+SB328437刺激16HBE细胞,明胶酶谱法检测MMP-9的活性;用RANTES及RANTES+PD98059(ERK1/2阻断剂)刺激16HBE细胞,Western blot检测ERK1/2、p ERK1/2及MMP-9的表达水平。结果体内实验结果证明成功复制哮喘小鼠模型。通过苏木精-伊红染色法及计数肺泡灌洗液中各细胞数量发现,哮喘组小鼠气道周围有明显的炎症细胞聚集,而干预组小鼠气道周围的炎症细胞明显减少。通过免疫荧光实验发现,小鼠支气管上皮细胞大量表达趋化因子CCR3。体外实验结果发现,哮喘组小鼠MMP-9的活性升高,而干预组MMP-9的活性下降。用外源性RANTES刺激16HBE细胞后发现,RANTES可以诱导高水平MMP-9的表达,而加入ERK1/2阻断剂PD98059后30 min,检测MMP-9的表达量明显降低。结论在哮喘疾病中,CCR3/RANTES信号轴通过ERK通路来调节MMP-9的表达。