ING5基因表达对胃癌细胞生长抑制作用的研究

目的探讨ING5基因表达对胃癌生长抑制作用。方法构建p EGFP-N1-ING5重组质粒,获得ING5高表达SGC-7901细胞株,分别通过CCK-8、流式细胞术、划痕、transwell、real-time PCR、Western blot、裸鼠成瘤实验、免疫组化检测并比较SGC-7901细胞与克隆细胞增殖率、周期与凋亡、迁移与侵袭、m RNA、裸鼠成瘤大小以及相关蛋白表达。结果与SGC-7901组及Mock组比较,转染p EGFP-N1-ING5后,胃癌SGC-7901细胞增殖显著抑制(P<0.05),凋亡减少(P<0.05),G1期比例增加,G2期比例下降(P<0.05),迁移与侵袭能力减弱(P<0.05),NF-κB、PI3K、p-Akt1/2/3、Bcl-2、XIAP、β-catenin、c-myc m RNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);Akt1/2/3、MMP9 m RNA及蛋白表达降低(P<0.05)。结论 ING5基因表达降低胃癌SGC-7901细胞株增殖、减少凋亡、发生G1期阻滞、抑制其迁移与侵袭、有效调控增殖、周期、黏附相关基因与蛋白的表达,从而抑制胃癌的演进与发展。

ING5基因对乳腺癌细胞Bcap-37恶性表型的影响

目的研究生长抑制因子5(ING5)基因对人乳腺癌细胞Bcap-37增殖、凋亡、迁移和细胞周期的影响。方法稳定转染p EGFP-N1-ING5真核表达载体和p EGFP-N1空载体至Bcap-37细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR方法筛选ING5高表达细胞株。将Bcap-37-ING5细胞作为实验组,Bcap-37-GFP细胞为空载体组,Bcap-37为空白对照组。采用MTT法检测ING5对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移情况。结果稳定转染后获得稳定表达GFP标记的ING5蛋白的Bcap-37细胞株。ING5过表达可以抑制乳腺癌Bcap-37细胞增殖并导致G2期阻滞,诱导细胞凋亡,抑制细胞迁移(P<0.05)。结论 ING5过表达可逆转乳腺癌Bcap-37细胞的恶性表型,可作为乳腺癌预后判断和基因治疗的分子靶标。