杜仲总黄酮对小儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响

目的研究杜仲总黄酮对小儿血管瘤内皮细胞凋亡的影响。方法体外培养小儿血管瘤内皮细胞,实验分为空白组(正常培养小儿血管瘤内皮细胞);杜仲总黄酮高剂量组(50μg/mL杜仲总黄酮处理小儿血管瘤内皮细胞);杜仲总黄酮中剂量组(5μg/mL杜仲总黄酮处理小儿血管瘤内皮细胞);杜仲总黄酮低剂量组(0.5μg/mL杜仲总黄酮处理小儿血管瘤内皮细胞),继续培养72 h后,MTT法检测细胞活力;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot法检测小儿血管瘤内皮细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase-9表达水平。结果与空白组相比,杜仲总黄酮中、高剂量组能够抑制小儿血管瘤内皮细胞增值,差异有统计学意义(P<0.05);杜仲总黄酮中、高剂量组细胞凋亡升高,差异有统计学意义(P<0.05);杜仲总黄酮高剂量组Bax蛋白表达上升,差异有高度统计学意义(P<0.01);杜仲总黄酮中、高剂量组caspase-9蛋白表达上升,差异有统计学意义(P<0.05);杜仲总黄酮低、中、高剂量组Bcl-2蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论杜仲总黄酮能够通过抑制Bcl-2蛋白表达、促进Bax和caspase-9蛋白表达,从而诱导小儿血管瘤内皮细胞发生凋亡,有望成为是一种有效的小儿血管瘤治疗剂。

小儿肠套叠复位联合术后康复治疗小儿肠套叠的临床疗效分析

目的探讨小儿肠套叠复位联合术后康复治疗小儿肠套叠的临床疗效。方法 300例肠套叠患儿,按照随机数字表法分为对照组和实验组,各150例。两组患儿均行小儿肠套叠复位治疗,在此基础上对照组患儿联合传统围手术期处理,实验组患儿联合术后康复治疗。比较两组患儿围手术期各指标、并发症发生情况、复发情况、再次住院情况及患儿家长满意率。结果两组患儿手术时间比较,差异无统计学意义(P>0.05),实验组患儿术中出血量明显少于对照组,首次进食时间、首次排气时间、住院时间均明显短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组患儿并发症发生率为6.67%、复发率为1.33%、再次住院率为2.00%,均显著低于对照组的30.67%、6.00%、8.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组患儿家长满意率为93.33%,显著高于对照组的86.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论小儿肠套叠复位联合术后康复在治疗肠套叠中较为安全、可行,具有康复快、创伤少等优点,可在临床中广泛应用。

平阳霉素联合普奈洛尔治疗婴幼儿血管瘤的临床研究

目的分析平阳霉素联合普奈洛尔治疗婴幼儿血管瘤的临床疗效。方法 66例婴幼儿血管瘤患儿,依据治疗方法差异性分为对照组和研究组,每组33例。对照组患儿予以平阳霉素单用治疗,研究组患儿予以平阳霉素联合普奈洛尔治疗。比较两组患儿临床治疗效果。结果研究组患儿治疗显效20例(60.6%),有效12例(36.4%),无效1例(3.0%),总有效率为97.0%;对照组患儿治疗显效15例(45.5%),有效10例(30.3%),无效8例(24.2%),总有效率为75.8%。研究组患儿治疗总有效率高于对照组,差异具有统计学意义(χ~2=6.3041,P<0.05)。结论婴幼儿血管瘤予以平阳霉素联合普奈洛尔治疗,效果理想,同时具有较高的安全性,可在临床上优先选择。

腹腔镜与开腹手术治疗先天性肥厚性幽门狭窄的临床效果对比

目的对比分析先天性肥厚性幽门狭窄患儿应用腹腔镜与开腹手术的临床效果。方法随机选择2015年1月~2017年2月期间我院收治的38例先天性肥厚性幽门狭窄患儿予以分组研究,根据病床单双号均分为两组,即甲组与乙组,各19例。甲组患儿予以开腹手术治疗,乙组患儿腹腔镜手术治疗,对两组患儿手术时间、术后进全奶时间、术后住院时间及并发症发生情况予以统计分析。结果在患儿手术时间、术后进全奶时间及并发症发生率方面,两组患儿比较差异无统计学意义;甲组患儿住院时间长于乙组患儿,两组对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论在先天性肥厚性幽门狭窄治疗中,腹腔镜手术治疗更加安全、有效,明显缩短了患者住院时间,是一种值得临床进一步应用与推广的治疗方法。

新生儿先天性皮肤缺损的护理体会

目的总结新生儿先天性皮肤缺损的护理体会。方法对4例先天性皮肤缺损新生儿采用保守治疗和综合护理。结果两例患儿治疗14d痊愈出院,1例患儿治疗13d痊愈出院,1例治疗10d痊愈出院。结论应根据病变部位,病损的程度灵活采用最有效的治疗方法,同时注重基础护理,科学的治疗及合理的护理是提高治愈率的关键。

Cajal间质细胞与先天性巨结肠

Cajal间质细胞(ICCs)是以三维网络分布在胃肠道神经末梢与平滑肌之间的一类特殊细胞,是胃肠道平滑肌运动的起搏点及协调者,ICCs发育异常将导致胃肠功能紊乱。研究发现,在先天性巨结肠的病变段ICCs明显缺少,甚至缺如,ICCs网络是断续及紊乱状态,因此ICCs发育异常可能是先天性巨结肠肠运动障碍的病理生理学基础。

小剂量红霉素在治疗新生儿先天性肠旋转不良术后肠道恢复中的作用观察

目的探讨小剂量红霉素在治疗新生儿先天性肠旋转不良术后肠道恢复中的作用。方法选取我院收治的50例先天性肠旋转不良患儿,以随机数表抽取法将其分为对照组和观察组各25例,对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上给予小剂量红霉素治疗,对两组患儿预后进行观察对比。结果观察组患儿肠鸣音恢复时间、首次肛门排气时间和排便时间均明显短于对照组,P<0.05;观察组患儿经口喂养时间、肠内营养达标时间均明显短于对照组,P<0.05。结论针对先天性肠旋转不良术后新生儿给予小剂量红霉素治疗疗效明显,能够有效改善患儿的肠道功能,临床意义显著。

微创手术治疗先天性巨结肠的体会

目的 总结经肛门I期拖出根治术治疗新生儿及小婴儿先天性巨结肠的手术治疗体会。方法 自2 0 0 1年对 18例经钡灌肠和直肠肛门测压检查诊断为先天性巨结肠的患儿施行Ⅰ期经肛门巨结肠根治术。手术方法为距齿状线上约 0 .5cm游离直肠粘膜 ,向近端游离直肠粘膜管至腹膜返折后横断肌鞘一周 ,劈开肌鞘后壁 ,游离直肠、结肠达到要求后切断 ,断端与肛门齿状线切缘缝合固定。结果 18例均顺利完成手术。手术时间 90～ 14 0分钟 ,术中出血 2 5～ 4 0ml,切除肠管长度 15～ 2 8cm。术后 2周开始扩肛。全部病例随访 2个月～ 2 .5年 ,每日排便2～ 3次 ,无腹胀便秘复发、吻合口狭窄、污便、肠梗阻等并发症。结论 经肛门Ⅰ期拖出术治疗新生儿及小婴儿先天性巨结肠具有疗效好、术后恢复快、并发症少及手术安全的优点 ,符合现代微创的医学理念。此术式适用于短段型及普通型先天性巨结肠。

腹腔镜下回盲部三点固定法预防小儿肠套叠复发

目的复发性肠套叠灌肠复位成功以后,早期应用腹腔镜技术行回盲部固定法,减少远期肠套叠复发及急诊剖腹手术的机会。探讨该技术的可行性及临床效果。方法 2014年2—11月,笔者对反复发作的肠套叠患儿,早期应用腹腔镜技术行回盲部固定法10例,其中男8例,女2例;年龄6~36个月,平均12.5个月。于脐部纵切口开放式置入5mm Trocar置入腹腔镜,然后分别于耻骨联合上方腹横纹处和左下腹置入2个3~5mm Trocar,放置操作器械进行探查,排除肠套叠的起源点,常规切除阑尾后,将升结肠起始部、阑尾根部和回肠末端用不可吸收的缝线分别固定于右侧腹壁。结果手术时间为45~85min,平均(59.4±13.11)min。无中转手术病例,术中出血极少。本组所有患儿术中未发现肠套叠起源点,无腹腔镜手术相关并发症。术后随访3~12个月,平均(7.2±3.12)个月,随访期间无肠套叠复发病例,无肠梗阻。结论对于反复发作的肠套叠患儿在灌肠复位成功后,早期应用腹腔镜进行干预,并行腹腔镜下回盲部固定法预防肠套叠复发,安全有效,可以发现相关畸形,排除肠套叠的起源点,并明确肠套叠是否完全复位,避免肠套叠复发及远期复发的相关并发症和急诊剖腹手术。

双向等位基因特异性PCR快速区分纯合子和杂合子SNP分型的新方法

目的建立一种基于单碱基改变基因分型的快速检测等位基因特异性双向PCR原理的改良SNP分型新方法:双向等位基因特异性PCR(Bi-PASA)在一次PCR反应中区分纯合子和杂合子的方法。方法以SNP位点rs11293201和rs57148397为例,设计两个外部引物(F与R)和两个内部等位基因特异性引物(P与Q)。同时与测序方法对比检测突变。结果两个内部引物(P和Q)包含一个相对短的完全匹配区域和一个富含GC的10核苷酸5′尾。当基因组DNA被先期扩增出的模板DNA取代时内引物完成从低效扩增到高效扩增的转变,其结果与直接测序完全一致。利用Bi-PASA参数的优化在人类SIP1基因常见突变的外显子中详细研究先天性巨结肠病,3种额外的Bi-PASA分析被快速优化。结论Bi-PASA是一种简单快速而有效的SNP分型新方法,是在一个PCR反应中检测已知突变的方法。

Wnt2、Wnt5b和Wnt9a在先天性巨结肠症和肛门直肠畸形中的表达及意义

目的研究Wnt2、Wnt5b和Wnt9a在先天性巨结肠症（Hirschsprungdisease，HD）和肛门直肠畸形中（anorectalmalformations，ARMs）的表达情况，以期探讨其在HD和ARMs发生发展中的作用。方法利用荧光实时定量PCR（quantitative real—timePCR，qRT-PCR）和蛋白质印迹（westernblot）技术检测HD狭窄肠段和正常肠段肠管组织及ARMs直肠末端（高位、中位和低位组）和死于非胃肠道疾病（正常对照组）患儿各30例中Wnt2、Wnt5b和Wnt9a表达，对其表达进行定位和定量，并比较分析。结果Wnt2、Wnt5b和Wnt9a在HD狭窄段肠管中mRNA转录水平的表达分别为（10．19±0．27、10．38±0．19和11．43±0．51），均低于正常段肠管的相应表达水平（18．06±1．07、17．98±1．12、19．99±0．76）（P〈0．05）；Wnt2、Wnt5b和Wnt9a在ARMs高位组中mRNA转录水平的表达分别为（14．27±0．31、13．69±0．45、13．07±0．67），均低于正常对照组（24．98±2．03、26．43±1．77、28．11±1．44）（P〈0．05），中位组和低位组之间mRNA转录水平比较无统计学意义。westernblot结果显示，Wnt2、Wnt5b和Wnt9a在HD狭窄段肠管中蛋白表达水平分别为0．19±0．09、0．26±0．07、0．23±0．06，明显低于正常段肠管0．43±0．13、0．57±0．08、0．62±0．06，P〈0.05；Wnt2，Wnt5b和Wnt9a在ARMs高位组中蛋白表达水平分别为0．15±0．11、0．17±0．04、0．13±0．05明显低于正常对照组0．51±0．03、0．63±0．05、0．59±0．05，P〈0．05，而中位组和低位组之间蛋白表达水平无明显差异且与正常对照组比较无统计学意义（P〉0．05）。结论Wnt2、Wnt5b和Wnt9a在HD狭窄段和ARMs的高位组表达水平减低，可能在先天性消化道畸形的肠道发育中具有重要作用。

SFRP1和APC基因在先天性巨结肠症中的甲基化和异常表达

先天性巨结肠症（HSCR）的病因和发病机制目前尚不明确，普遍认为是多种因素共同作用的结果。近来发现Wnt信号异常激活与HSCR发病有关。Wnt拮抗因子分泌型Frizzled相关蛋白（SFRP）家族第一个成员SFRP1和多发性腺瘤样息肉病蛋白（APC）均为Wnt信号的重要抑制因子。

先天性巨结肠症SIP1基因外显子3和外显子4的突变分析

目的 探讨SIP1基因外显子3和外显子4与散发性先天性巨结肠（Hirschsprung disease,HD）的关联性.方法 检测150例HD患儿SIP1基因突变.采用PCR-变性梯度凝胶电泳（PCR-degenerating gel gradient electrophoresis,PCR-DGGE）与DNA测序法检测患儿SIP1基因exon3 and exon4的突变.另选取150例正常人（排除家族性顽同便秘及其他先天性消化道畸形史健康儿童）外周血DNA作为对照组.结果 在HD组exon3 PCR-DGGE发现83例异常电泳条带,测序证实67/83例SIP1发生在突变集中区域,为错义突变（ACC→ATC,苏氨酸→异亮氨酸）.在HD组exon4发现101例异常电泳条带,测序证实68/101例SIP1发生在突变集中区域,有4种突变（CAC→TAC,组氨酸→酪氨酸;GAG→GAT,谷氨酸→天门冬氨酸;GCC→GTC,丙氨酸→缬氨酸;TGT→TTT,胱氨酸→苯丙氨酸）.DGGE检测正常对照组中未发现异常电泳条带,测序未发现突变.结论 SIP1基因为HD的致病基因,突变类型多样,已发现热点突变;提示SIP1基因与HD发病存在一定程度的关联.

LRP5／6基因多态性与先天性巨结肠症的相关性研究

目的通过对低密度脂蛋白受体相关蛋白5／6（low dens.ity lipoprotein receptor-related protein 5/6, LRP5/6）基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）基因型与先天性巨结肠症（Hirschsprungdisease’s，HD）的相关性研究，探索可能潜在的致病基因。方法采集200例临床确诊的HD患儿（病例组），200名健康儿童（对照组）的外周静脉血，提取白细胞基因组DNA，PCR扩增LRP5／6基因4个位点（rs121908674，rs121908671／rsl21918313，rs117554756），将PCR产物测序进行突变筛选，明确突变位点和类型，并进一步结合病例-对照和生物信息学分析探讨基因变异的意义。结果病例组与对照组LRP5rs121908671、LRP6 rs117554756AA和AG、AA和AC基因型频率无显著性差异（P〉0．05）；而病例组与对照组LRP5rs121908674CC、CG和GG基因型频率及C和G等位基因频率差异显著（P〈0．05），CC和CG基因型及G等位基因的患病风险分别为0．005、0．195和0．001；LRP6rs121918313CC、CT和1vr基因型频率及C和T等位基因频率差异显著（P〈0．05），CC和CT基因型及T等位基因的患病风险分别为0．012、0．504和0．003。LRP6基因rs121918313测序检出有杂合性缺失和单碱基的替换，第131位密码子核苷酸AAA→CAA。结论LRP5／6基因多态性位点可能对HD有影响，并且可能有一定的遗传性。

AXIN2基因三个位点与先天性巨结肠的关联研究

目的探讨AX／N2基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）rs2240308、rs8081536和rs99136213个位点与先天性巨结肠（Hirsehsprtmgdisease，HSCR）的关联性。方法对120例HSCR患者和120名正常人群外周血进行基因组DNA抽提，用PCR技术对AXIN2基因3个位点（rs2240308、rs8081536和rs9913621）进行PCR扩增，PCR产物用内切酶cWI、DdeI和凰洲I消化，将SNPs位点进行分型与分析，应用．X2检验统计分析病例组和对照组等位基因频率、等位基因型频率及其患病风险；同时将PCR产物进行测序，以进一步确定基因突变位点。结果HSCR组与对照组AXIN2 rs8081536CC和CT基因型频率差异无统计学意义（P〉0．05）；而HSCR组与对照组AXIN2rs2240308GG、AG和AA基因型频率及A和G等位基因频率差异有统计学意义（P〈0．05），GG和AA基因型及G等位基因的患病风险分别为2．091、0．846和1．703；HSCR组与对照组AXIN2rs9913621CC、CT和1Tr基因型频率及C和T等位基因频率差异有统计学意义（P〈0．05），CC和TT基因型及T等位基因的患病风险分别为0．535、1．113和1．569。测序rs2240308第301位密码子核苷酸GCA→CCA杂合突变；rs9913621第199位密码子核苷酸CAC→CAG杂合突变。结论AXIN2rs8081536等位基因变异与HSCR的易感性无关；AXIN2rs2240308和rs9913621与HSCR的发生可能有关联，具有GG基因型与cc基因型患HSCR的危险性相对较高。

Wnt1和Wnt8a基因在先天性巨结肠中的表达

目的观察Wnt1和Wnt8A基因在先天性巨结肠症（HD）中的表达，探讨其在HD发生、发展中的作用。方法对60例HD正常肠段（神经节细胞）和狭窄肠段（无神经节细胞）组织肠管中Wnt1和Wnt8a mRNA和蛋白表达进行定量与比较。结果Wnt1和Wnt8a在HD狭窄段肠管中mRNA表达水平分别为17．66±1．28和29．61±3．23，正常段肠管中mRNA表达水平分别为31．77±2．21和15．01±1．29，差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot检测结果显示，Wnt1和WntSa在HD狭窄段肠管中蛋白含量为19．51±1．57和33．17±2．09，正常段肠管中蛋白含量分别为37．05±1．23和17．35±0．87，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学结果显示，Wnt1在正常段肠管中高表达（呈棕黄色），Wnt8a在狭窄段肠管中高表达（呈棕黄色）；Wnt1在狭窄段肠管中低表达（无色或淡黄色），WntSa在正常段肠管低表达（无色或淡黄色）。结论Wnt1和Wnt8amRNA与蛋白在HD的异常表达，提示Wnt1和Wnt8a与HD的发生密切相关，可能在先天性消化道畸形的肠道发育中具有重要作用。

儿童术后早期炎性肠梗阻11例诊治体会

目的 探讨儿童术后早期炎性肠梗阻的特点及治疗原则.方法 回顾性分析11例术后早期炎性肠梗阻患儿的临床资料.结果 儿童术后早期炎性肠梗阻多发生在2～8 d,表现为腹胀、腹痛、腹部轻压痛及肠鸣音减弱.X线腹部平片呈肠淤张表现,无机械性肠梗阻征象.1例患儿经手术治疗,术后出现肠瘘,后经保守治疗治愈;余10例息儿均经保守治疗治愈,平均治愈时间为14 d.结论 术后早期炎性肠梗阻的特点：（1）发生于腹部手术后早期,肠壁有水肿、炎症渗出,肠袢间相互黏着致肠蠕动障碍,肠腔有机械性的不畅;（2）症状以腹胀为主,腹痛相对轻,部分患儿有少量肛门排气排便,胃肠减压可抽出大量黄色或绿色肠液,症状持续约两周左右,最短5 d,可长达3周,体征有腹部膨隆,触之无或轻压痛,但扪之腹部较韧,胀痛不适,体征虽典型,但较少发生绞窄;（3）经禁食、胃肠减压、抗炎、营养支持等保守治疗大都有效.