镇江市医疗机构卫生监督执法现状及对策研究

目的:全面加强镇江市医疗机构行业综合监管,进一步整顿规范医疗秩序与医疗服务行为,切实保障人民群众身体健康与生命安全。方法:对全市不同等级、类别、规模、性质的医疗机构进行现况调查,了解并掌握医疗机构行业综合监督管理中存在的突出问题,提出改进措施与建议。结果:医疗机构等级越低、规模越小、经营状况越差,其存在的问题越多。结论:通过对医疗机构实施"分级分类",开展针对性的综合监管,是加强医疗机构卫生监督执法的有效举措。

镇江市公共场所卫生监督HACCP管理对策研究

本研究以公共场所有关卫生法律法规、标准规范,为依据,引入“危害分析关键控制点（HACCP）”管理原理,对不同行业类别、不同经营规模、不同地段区域的公共场所以及其经营过程中的重点关键环节,实施“标准化建设、规范化管理”,探索形成了行之有效的长效监管机制与措施[1].

生物化学检验在糖尿病患者中的诊断价值

目的探讨血糖、血清三酰甘油以及糖耐受能力生物化学检验在糖尿病患者中的诊断价值。方法选取2015年7月—2016年7月我院内科收治120例糖尿病患者作为糖尿病组,并选同期我院体检中心120例健康体检者作为健康对照组,检测两组受试者空腹血糖、2 h糖耐受能力检测值、血清三酰甘油水平并比较。结果糖尿病组空腹血糖水平为(8.68±5.36)mmol/L,2 h糖耐受能力检测值为(12.42±3.56)mmol/L,血清三酰甘油水平为(2.18±1.24)mmol/L,均高于健康对照组的(5.74±0.57)mmol/L、(5.48±1.11)mmol/L、(1.39±0.23)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血糖、血清三酰甘油以及糖耐受能力生物化学检验可用于糖尿病的初步诊断。

生化检验项目在诊断肝硬化疾病中的临床效果

目的:分析肝硬化疾病诊断中生化检验项目的应用效果。方法:2014年3月~2017年10月,于我院诊治的肝硬化疾病患者中选取50例为研究对象,归为观察组,再选取同时期50例正常人为研究对象,归为对照组,两组研究对象均行生化检验,对各项生化检验项目结果进行对比分析。结果:与对照组对比,观察组CHE、A/G、ALB、TP水平更低,γ-GT、ALP、AST、TBA、DBL、TBL水平更高,组间差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:生化检验项目在肝硬化疾病诊断中具有良好的应用价值,能将患者的肝功能状态清晰的反映出来,并科学指导肝硬化疾病的治疗与预防。

全自动血细胞分析仪在血常规检验中的应用效果

目的:分析全自动血细胞分析仪在血常规检验中的应用效果。方法:选取2020年1月-2022年1月镇江市第一人民医院进行血常规检验的患者80例为观察对象。所有患者均先行全自动血细胞分析仪检测,再行血涂片镜检检测,将血涂片镜检检测结果作为金标准。观察不同检测方法的血常规检验结果,分析全自动血细胞分析仪对检验结果的敏感度、特异度等。结果:全自动血细胞分析仪与血涂片镜检的WBC、RBC、PLT、Hb阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);全自动血细胞分析仪的B、E、M、N、L阳性检出率分别为6.25%、12.50%、47.50%、33.75%、55.00%,除B诊断敏感度偏低,对其他细胞诊断敏感度、特异度、准确度、阳性与阴性预测值均较高;全自动血细胞分析仪同血涂片镜检的各细胞检测结果比较,二者一致性较好(Kappa值≥0.75,P<0.05)。结论:全自动血细胞分析仪应用于血常规检验中具有较高的临床价值,适用于大批量血液样本的检测,但仍有一定的误差存在,必要情况下可与血涂片镜检联合检测,以促进血常规检验准确度的提高。

Ⅱ型糖尿病患者APOA5-1131T/C基因多态性与血脂代谢和胰岛素抵抗的关系研究

为了探讨载脂蛋白A5基因（APOA5）-1131T/C多态性在中国镇江地区的频率分布及其与血浆脂质代谢和Ⅱ型糖尿病患者胰岛素抵抗的关系,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）结合琼脂糖凝胶电泳技术检测152例健康人及71例Ⅱ型糖尿病患者APOA5-1131T/C基因型及等位基因频率分布,同时采用生化方法测定所有研究对象的血脂、血糖和胰岛素水平。结果显示：糖尿病组APOA5-1131C等位基因频率显著高于对照组（0.430vs0.296,P=0.006）。CC纯合子患糖尿病的风险是TT纯合子的3.75倍（OR=3.75,95%CI：1.57-8.92）,且经Logistic回归分析,校正年龄、BMI和血浆HDL-c、LDL-c及ApoB水平等其他混杂因素影响后,这种差异仍具有显著性意义（OR=2.70,95%CI：1.24-5.86）。糖尿病组C等位基因携带者TG水平显著高于非C等位基因携带者（P〈0.01）,TC水平和LDL-c水平亦明显升高（P〈0.05）。但是在两组中,不同基因型患者胰岛素抵抗相关指标均无显示差异。提示APOA5-1131T/C单核苷酸多态性对人群血浆TG水平有影响,-1131C等位基因与血浆TG、TC和LDL-c水平增高有关,但是与糖尿病患者胰岛素相关指标无关;APOA5-1131C等位基因可能与人群糖尿病的发生相关联。

类风湿性关节炎患者血清CD_(40)L及IL-6 hs-CRP表达及临床意义

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者血清白细胞介素-6(IL-6)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和T细胞CD40配体(CD40L)水平变化及其临床意义。方法 90例RA患者为观察组(又分RA活动组、RA稳定组),90例健康志愿者为对照组。采用增强免疫比浊测量法检测患者血清中hs-CRP水平,以酶联免疫吸附法检测CD40L、IL-6水平。结果 RA组患者外周血清血小板计数(BPC)、类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)、hs-CRP、IL-6及CD40L均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);除RF外,RA活动组患者外周血清中BPC、ESR、hs-CRP、IL-6及CD40L均明显高于RA稳定组患者,差异均具有统计学意义(P<0.05)。血小板升高组RA患者外周血清中RF、ESR、hs-CRP、IL-6及CD40L均明显高于血小板正常组的RA患者,差异均具有统计学意义(t=6.070、3.858、3.272、3.217、2.253,P<0.05)。结论血清hs-CRP、IL-6及CD40L与RA炎症反应关系密切,联合检测可临床观察RA患者的病情变化和治疗效果,具有一定临床应用价值。

检测EV71和EV-U的TaqMan-LNA探针多重荧光RT-PCR的建立

目的建立一种针对手足口病病原体的快速准确检测方法。方法利用TaqMan-LNA探针建立多重荧光定量RT-PCR方法,同时检测肠道病毒71型(EV71)和肠道病毒通用型(EV-U),用含有目的序列RNA的标准品制备标准曲线,对病毒进行准确定量,同时对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评估。结果用TaqMan-LNA探针多重荧光RT-PCR法检测CoxA16、CoxB2、EV71病毒和其他人类病毒RNA,证实其特异性为100%;对EV71和EV-U的检测灵敏度均达到102拷贝/μl;将EV71和EV-U的RNA标准品进行重复性实验,其批内、批间变异系数分别为0.97%～2.02%和0.89%～2.13%。结论本方法灵敏度较高,特异性强,重复性好,适用于手足口病的临床检测。

硒对幽门螺杆菌空泡毒素及其重组影响

目的研究硒(Se)对幽门螺杆菌(Hp)空泡毒素(VacA)及重组VacA的影响。方法采用盐析、透析、柱层析、浓缩、抽滤等方法提纯幽门螺杆菌分泌的空泡毒素。通过琼脂糖凝胶电泳、基因序列分析鉴定重组载体,重组VacA产物经Ni-TEDTM蛋白纯化系统纯化,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、及免疫印迹(Western blot)鉴定,间接酶联免疫吸附(ELISA)法检测其抗原特异性。进行细胞培养、细胞爬片;采用分光光度计、倒置显微镜、透射电镜及流式细胞仪等方法检测硒对幽门螺杆菌分泌的VacA及重组毒素蛋白功能的影响。结果12 mmol/L硒即可使幽门螺杆菌形态发生球形变,鞭毛及菌毛出现脱落,溶血作用减弱,硒对VacA空泡毒作用无直接影响(P>0.05);硒通过抑制Hp生长减少VacA产生量从而使空泡毒作用减弱;通过抑制表达VacA的大肠埃希菌生长,减少重组VacA表达量;能增强重组VacA对人胃上皮癌细胞株(SGC-7901)生长抑制作用,使细胞分裂指数、集落形成率、S期细胞数量降低,G1期细胞总数增加;使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素,并随硒浓度增加颜色加深。结论硒能抑制Hp生长,改变Hp的形态及结构;可使重组VacA表达量减少;能增强重组VacA对SGC-7901细胞的生长抑制及诱导细胞凋亡作用;可使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素;不能直接抑制VacA的空泡毒作用。

胡桃楸提取物抗白念珠菌作用的机制研究

目的:探讨胡桃楸提取物的抗白念珠菌作用机制。方法:应用同位素参入技术测定不同浓度的胡桃楸提取物对[3H]-TdR、[3H]-UdR、[3H]-Leu3种同位素前体参入白念珠菌的抑制率。结果:10、20和40μg/ml胡桃楸提取物对[3H]-TdR、[3H]-UdR、[3H]-Leu参入白念珠菌均具有显著的抑制作用,且呈剂量依赖性。各剂量的胡桃楸提取物作用后[3H]-UdR的参入抑制率均显著高于[3H]-TdR的参入抑制率、[3H]-Leu的参入抑制率;而[3H]-TdR的参入抑制率与[3H]-Leu的参入抑制率无显著性差异。结论:胡桃楸提取物抗白念珠菌的作用机制可能是通过抑制白念珠菌的DNA、RNA、蛋白质的生物合成导致菌细胞死亡而起到杀菌作用。

β-葡聚糖对巨噬细胞的增殖及ERK5通路的影响

目的:探讨β-葡聚糖对于小鼠巨噬细胞RAW 264.7的生长增殖和诱导细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,以及细胞外信号调节激酶5(ERK5)信号通路在这一过程中的表达。方法:以不同浓度(12.5,25,50,100,200和400μg/m l)的β-葡聚糖刺激体外培养小鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞后,用四唑盐比色实验(MTT)检测细胞的生长增殖;瑞氏染色法检测RAW 264.7细胞的吞噬活性;用ELISA方法测定培养上清液中TNF-α的表达量;蛋白质印迹法检测ERK5及磷酸化ERK5(p-ERK5)表达情况。结果:MTT实验结果显示不同浓度的β-葡聚糖对细胞的增殖有不同程度的促进作用,其中以100μg/m l浓度时促进作用最大,大剂量时则对细胞增殖产生抑制作用。在浓度为100μg/m l时,TNF-α的表达量达到峰值,ERK5和p-ERK5被活化。结论:一定浓度的葡聚糖对小鼠巨噬细胞的增殖和吞噬有明显的促进作用,细胞外信号调节激酶5信号通路参与了这一过程。

粉防己碱对β-葡聚糖诱导的RAW264.7细胞增殖的作用

目的观察粉防己碱对β-葡聚糖诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)增殖的作用。方法建立细胞模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度粉防己碱对RAW264.7细胞增殖的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清液中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、IL-10的水平。结果 MTT法检测结果提示粉防己碱对RAW264.7细胞增殖表现为双相性作用;ELISA结果提示适当浓度的粉防己碱可抑制IL-6、TNF-α、PGE2的表达,同时促进IL-10的表达。结论粉防己碱影响β-葡聚糖诱导的RAW264.7细胞增殖的作用,可能与抑制IL-6、TNF-α、PGE2的表达,同时促进IL-10的表达有关。

急性颅脑损伤后血清TNF-α和IL-18的含量变化及临床意义

目的探讨急性颅脑损伤后血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素18(IL-18)的含量变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定60例急性颅脑损伤患者伤后第1、3、7、10天血清TNF-α和IL-18的含量,观察TNF-α和IL-18血清含量的变化规律,分析颅脑损伤程度与TNF-α和IL-18含量之间的关系。结果TNF-α在伤后早期即明显升高,于伤后第3天达到高峰,至第10天下降明显,但仍高于对照组(P<0.05);IL-18含量在伤后呈逐渐升高趋势,并在第10天达到高峰。重型颅脑损伤组在伤后各个时间点的血清TNF-α和IL-18含量较轻、中型组明显升高(P<0.05)。结论急性颅脑损伤后血清TNF-α和IL-18含量明显升高,与颅脑损伤程度呈正相关;TNF-α和IL-18参与了急性颅脑损伤后的炎性反应过程,在继发性脑损害中起重要作用。

人间充质干细胞来源外体诱导胃癌细胞恶性转化

目的探讨人间充质干细胞(MSCs)能否通过外体(exosome)促进胃癌细胞迁移、侵袭和化疗抵抗,诱导胃癌的恶性转化。方法提取不同细胞来源的exosome(HFL-ex和MSC-ex),并用可视型纳米颗粒分析仪及western blot进行鉴定;Transwell实验检测不同处理因素下对照组、HFL-ex组和MSC-ex组细胞的迁移、侵袭能力;构建免疫缺陷小鼠模型,处理7 d后分别检测对照组、5-FU组、HFL-ex组和MSC-ex组小鼠的肿瘤体积。结果可视型纳米颗粒分析仪结果表明,HFL-ex和MSC-ex的直径约为(110±49)nm,western blot证实其表面均表达CD63蛋白;Transwell实验结果表明,与HFL-ex比较,MSC-ex可促进SGC-7901细胞的迁移与侵袭(P均<0.05);荷瘤实验结果显示,MSC-ex组小鼠肿瘤体积大于5-FU组和HFL-ex组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MSCs可通过旁分泌exosome的方式促进胃癌细胞迁移、侵袭和化疗抵抗,诱导胃癌的恶性转化。

实时定量PCR检测胃癌组织miR-20a及初步应用

目的建立检测人胃癌组织中miR-20a的实时荧光定量PCR方法。方法建立miR-20a标准曲线,评价该法检测的线性范围及灵敏度;对标准质粒扩增产物进行熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳检测以分析该法的特异性。取高、中、低3份不同浓度的标准质粒进行批内和日间变异系数(CV)的检测,分析该法的重复性。收集70例胃癌患者手术切除的癌组织和对应的癌旁组织,定量检测组织中miR-20a的表达水平。结果构建的实时荧光定量PCR法的灵敏度为101copies/μL,扩增的线性范围为101～109copies/μL;扩增产物的熔解曲线峰和电泳片段特异;3份不同浓度标准质粒定量检测的批内CV分别为6.33%、4.74%、5.89%,日间CV分别为9.45%、6.29%、7.48%。定量结果显示75.7%(53/70)胃癌组织中miR-20a的表达高于癌旁组织,差异有显著性(Z=-4.427,P<0.01)。结论建立的实时荧光定量PCR检测miR-20a的方法准确、快速、灵敏、特异,可用于胃癌组织中miR-20a的检测。

血清妊娠相关蛋白-A检测在急性冠状动脉综合征诊断中的意义

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清妊娠相关蛋白-A(PAPP-A)、髓过氧化物酶(MPO)和C-反应蛋白(CRP)的变化及相互关系。方法以ELISA法检测51例ACS患者、28例稳定型心绞痛(SAP)患者和23例健康人(对照组)血清PAPP-A、MPO和CRP含量。结果ACS患者血清中PAPP-A、MPO和CRP含量均显著高于对照组和SAP组(P<0.01);SAP患者血清PAPP-A、MPO和CRP含量稍高于对照组(P<0.05);急性心肌梗死(AM I)和不稳定型心绞痛(UAP)患者血清PAPP-A、MPO与CRP呈线性相关(PAPP-A与CRP,r=0.71,P<0.01;MPO与CRP,r=0.74,P<0.01)。结论PAPP-A、MPO和CRP在ACS患者血浆中均显著增高,可作为ACS患者的诊断敏感性指标之一,且三者间存在显著相关性。

载脂蛋白A5553G／T单核苷酸多态性对血浆脂质代谢的影响

目的探讨载脂蛋白A5基因（apoa5）553G／T变异在中国镇江地区的频率分布及其对血浆脂质代谢的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）结合琼脂糖凝胶电泳技术检测152例健康人ApoA5 553G／T基因型及等位基因频率分布，同时采用生化方法测定所有研究对象的血浆脂质水平。结果ApoA5 553T等位基因频率为0．049。GG、GT、TT3种基因型中，GT杂合子个体和刀纯合子个体甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）水平明显高于GG纯合子个体。T等位基因携带者（GT＋TT）的TG水平较非T等位基因携带者（GG）增高了54．6％（2．47±2．01mmol／L：1．20±1．13mmol／L，P〈0．05），LDL-c水平增高28．3％（3．33±1．03mmol／L：2．78±0．82mmol／L，P〈0．05）。非T等位基因携带者年龄与TG、胆固醇（TC）水平呈正相关，T等位基因携带者年龄与血脂各项指标不相关。男性T等位基因携带者较非T等位基因携带者TG水平增高77．1％（P〈0．01），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）水平和载脂蛋白Al（ApoAl）水平分别降低6．7％（P〈0．05）和5．2％（P〈0．05），而女性T等位基因携带者较非T等位基因携带者TG水平增高23．1%（P〈0．05），HDL-c水平和ApoAl水平略降低，但无统计学意义（P〉0．05）。结论ApoA5 553G／T单核苷酸多态性对健康人群血浆TG有影响，553T等位基因与血浆TG和LDL-c水平增高有关，与HDL-c和ApoAl水平降低有关，这种作用在男性人群较女性人群更为明显。

比阿培南对501株临床分离致病菌的体外抗菌活性研究

目的:评价比阿培南对501株临床分离致病菌的体外抗菌活性。方法:采用刃天青微孔板稀释法测定比阿培南和对照品(美罗培南、亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星、苯唑西林、万古霉素)对501株临床分离致病菌的体外抗菌活性。结果:比阿培南对大肠埃希菌、克雷伯菌属、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、志贺菌属、沙门菌属、变形杆菌属、沙雷菌属、柠檬酸菌属、不动杆菌属和铜绿假单胞菌的MIC50分别为0.06,0.13,0.25,0.13,0.03,0.03,1.00,0.50,0.13,0.13,0.50μg/mL;MIC90分别为0.13,0.13,0.50,0.50,0.03,0.06,1.00,0.50,0.25,0.25,4.00μg/mL。结论:比阿培南对临床分离致病菌的最低抑菌浓度MIC50、MIC90低于对照品。

黄芩素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性研究

目的:了解黄芩素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌活性。方法:用美国临床实验室标准化委员会(CLSI/NCCLS)介绍的方法,检测黄芩素和万古霉素对117株临床分离的MRSA的体外抗菌活性。结果:黄芩素对MRSA的MIC_(50)、MIC_(90)和MBC分别为32.0、96.0和168.0μg/mL。结论:黄芩素为一种对MRSA敏感的抗菌药物,可用于临床治疗由MRSA感染引起的多种疾病。

贫血对血浆脑钠肽氨基末端前体浓度的影响

目的:探讨血液血红蛋白浓度与血浆脑钠肽氨基末端前体(NT-pro-BNP)的关系。方法:以ELISA法检测了152例贫血患者与169例正常人血浆NT-pro-BNP含量。结果:贫血组患者的血浆NT-pro-BNP明显高于非贫血组(P<0.05),但性别间无显著性差异。NT-pro-BNP含量的对数值与血红蛋白浓度呈负相关(r=-0.517,log NT-pro-BNP=-0.0144Hb+3.946)。结论:将血浆BNP和NT-pro-BNP作为心力衰竭的诊断和预后指标,应联合检测血红蛋白浓度、心肌损伤标志物等,并加以综合分析。