目的构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体。方法小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mmu-miR-30a、mmu-miR-30e目的基因,目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS,带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy1上,重组质粒转...目的构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体。方法小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mmu-miR-30a、mmu-miR-30e目的基因,目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS,带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy1上,重组质粒转染到Hek-293细胞中包装成腺病毒载体,反复扩增之后获得高滴度的pAd-mmu-miR-30a、pAd-mmu-miR-30e腺病毒。用目的腺病毒分3组(RFP对照组,miR-30a组,miR-30e组)感染小鼠Mefs细胞,用荧光定量PCR方法检测mmu-miR-30a、mmu-miR-30e表达情况。结果分别扩增出带有酶切位点的357 bp mmu-miR-30a,324 bp mmu-miR-30e,并成功连接到pSES-HUS上,进一步与AdEasy1重组,包装得到腺病毒表达载体,通过荧光定量PCR检测,Mefs细胞中mmu-miR-30a升高26.46±7.46倍,mmu-miR-30e升高2.76±0.25倍。结论成功构建了成熟miRNA的腺病毒表达载体。展开更多
目的:系统评价阿托伐他汀对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能、肺动脉压及相关指标的影响,为临床提供循证参考。方法:计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBase、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库,收集阿托伐他汀联合常...目的:系统评价阿托伐他汀对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能、肺动脉压及相关指标的影响,为临床提供循证参考。方法:计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBase、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库,收集阿托伐他汀联合常规基础方案(试验组)对比单纯常规基础方案(对照组)治疗稳定期COPD的随机对照试验(RCT),提取资料并按照Cochrane系统评价员手册5.1.0评价质量后,采用Rev Man 5.3统计软件进行Meta分析。结果:共纳入7项RCT,合计371例患者。Meta分析结果显示,试验组患者第1秒用力呼气容积[MD=0.07,95%CI(0.04,0.09),P<0.001]、第1秒用力呼气容积占预计值百分比[MD=6.18,95%CI(2.23,10.12),P=0.002]、6分钟步行距离[MD=55.31,95%CI(36.44,74.18),P<0.001]均显著高于/长于对照组,肺动脉收缩压[MD=-6.78,95%CI(-11.62,-1.94),P=0.006]、平均肺动脉压[MD=-6.61,95%CI(-7.26,-5.96),P<0.001]、圣乔治呼吸问卷评分[MD=-13.21,95%CI(-23.90,-2.52),P=0.02]均显著低于对照组,差异均有统计学意义;两组患者第1秒用力呼气容积占用力肺活量比值[MD=3.73,95%CI(-2.08,9.55),P=0.21]和高敏C反应蛋白水平[MD=0.29,95%CI(-1.37,1.95),P=0.73]比较,差异均无统计学意义。结论:阿托伐他汀用于稳定期COPD患者可以显著改善患者肺功能和肺动脉压,提高患者生活质量。展开更多
文摘目的构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体。方法小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mmu-miR-30a、mmu-miR-30e目的基因,目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS,带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy1上,重组质粒转染到Hek-293细胞中包装成腺病毒载体,反复扩增之后获得高滴度的pAd-mmu-miR-30a、pAd-mmu-miR-30e腺病毒。用目的腺病毒分3组(RFP对照组,miR-30a组,miR-30e组)感染小鼠Mefs细胞,用荧光定量PCR方法检测mmu-miR-30a、mmu-miR-30e表达情况。结果分别扩增出带有酶切位点的357 bp mmu-miR-30a,324 bp mmu-miR-30e,并成功连接到pSES-HUS上,进一步与AdEasy1重组,包装得到腺病毒表达载体,通过荧光定量PCR检测,Mefs细胞中mmu-miR-30a升高26.46±7.46倍,mmu-miR-30e升高2.76±0.25倍。结论成功构建了成熟miRNA的腺病毒表达载体。
文摘目的:系统评价阿托伐他汀对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能、肺动脉压及相关指标的影响,为临床提供循证参考。方法:计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBase、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库,收集阿托伐他汀联合常规基础方案(试验组)对比单纯常规基础方案(对照组)治疗稳定期COPD的随机对照试验(RCT),提取资料并按照Cochrane系统评价员手册5.1.0评价质量后,采用Rev Man 5.3统计软件进行Meta分析。结果:共纳入7项RCT,合计371例患者。Meta分析结果显示,试验组患者第1秒用力呼气容积[MD=0.07,95%CI(0.04,0.09),P<0.001]、第1秒用力呼气容积占预计值百分比[MD=6.18,95%CI(2.23,10.12),P=0.002]、6分钟步行距离[MD=55.31,95%CI(36.44,74.18),P<0.001]均显著高于/长于对照组,肺动脉收缩压[MD=-6.78,95%CI(-11.62,-1.94),P=0.006]、平均肺动脉压[MD=-6.61,95%CI(-7.26,-5.96),P<0.001]、圣乔治呼吸问卷评分[MD=-13.21,95%CI(-23.90,-2.52),P=0.02]均显著低于对照组,差异均有统计学意义;两组患者第1秒用力呼气容积占用力肺活量比值[MD=3.73,95%CI(-2.08,9.55),P=0.21]和高敏C反应蛋白水平[MD=0.29,95%CI(-1.37,1.95),P=0.73]比较,差异均无统计学意义。结论:阿托伐他汀用于稳定期COPD患者可以显著改善患者肺功能和肺动脉压,提高患者生活质量。