耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染监测及同源性分析

目的监测院内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylo coccus aureus,MRSA)的感染现状和耐药性,并与同时期院感监测标本中检出的MRSA一起做同源性检测分析。方法对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的临床分布及耐药性进行统计分析,并检测mecA基因的携带情况,比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与甲氧西林敏感葡萄球菌(MSSA)的耐药率,同时采用肠杆菌科基因间重复一致序列(ERIC)-PCR方法对MRSA做同源性分析。结果共检出金黄色葡萄球菌117株,MRSA检出率为63.2%(74/117)。MRSA感染以呼吸科、泌尿外科、普外科的患者居多。MRSA在痰液样本中分离率最高(25.7%),其次是伤口分泌物、脓液(17.6%)和尿液标本(14.9%)。MRSA对常用抗菌药物有较高的耐药率,如氨苄西林(100%)、红霉素(83.8%)、阿奇霉素(82.4%)、诺氟沙星(82.4%)、环丙沙星(68.9%)、克林霉素(68.9%)、丁胺卡那(64.9%)、四环素(60.8%)、氯霉素(55.4%)、氧氟沙星(51.4%)、复方新诺明(39.2%)、米诺环素(25.7%)、利福平(13.5%)、莫匹罗星(2.7%),万古霉素、替考拉宁的敏感性为100.0%。MRSA对抗菌药物的耐药率明显高于MSSA,差异有统计学意义(P<0.05)。通过ERIC-PCR分型,将74株MRSA分成8个型,同型菌株多来源于同一病房。结论 MRSA对常用抗菌药物呈多重耐药性。MRSA对抗菌药物的耐药率明显高于MSSA。医护人员手、床单和医疗器械等导致的交叉感染,是引起MRSA医院内传播的主要原因。应严格执行消毒隔离措施,严格控制广谱抗生素的应用,加强医疗器械的使用和消毒管理,是预防MRSA院内感染的重要措施。

2006～2012年院内感染金黄色葡萄球菌耐药性监测及同源性分析

目的：调查2006～2012年院内感染金黄色葡萄球菌耐药性并作同源性分析，为控制其院内感染提供依据。方法回顾分析2006～2012年院内感染金黄色葡萄球菌的分布及耐药性，并采用随机引物DNA扩增多态性（RA PD ）技术进行同源性分析。结果共检出院内感染金黄色葡萄球菌121株，以呼吸科、泌尿外科和普外科患者居多，在痰液样本中分离率最高。对万古霉素、替考拉宁以外的其他14种抗菌药物表现为不同程度耐药，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率65．29％（79／121）。通过RAPD分型，将21株院内感染金黄色葡萄球菌分成8个型。结论医院应严格控制抗菌药物的应用，执行消毒隔离措施，加强医疗器械的使用和消毒管理，防止院内感染流行。

应用ROC曲线评价耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法

目的:通过对耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的常用检测方法及实验条件进行评价,选择特异性和敏感性较好的方法和理想的实验条件。方法:以PCR法检测葡萄球菌的m ecA基因为“金标准”,比较PBP2 a胶乳凝集试验法、头孢西丁(FOX)琼脂筛选法、苯唑西林(OXA)琼脂稀释法(M IC)、FOX纸片扩散法、OXA琼脂筛选法、OXA纸片扩散法检测MRS的敏感性和特异性。同时应用ROC曲线对实验方法及不同的实验条件进行评价。结果:PCR法共检出79株m ecA基因阳性菌株,阳性率为73.8%。以PCR法为“金标准”,上述6种方法的ROC曲线下面积分别为0.994,0.964,0.955,0.946,0.932,0.862。结论:选择最佳实验条件,用两种表型检测方法作平行检测,对可疑结果用PBP2 a胶乳凝集试验或PCR法确诊。

院内传播耐甲氧西林葡萄球菌的DNA指纹图谱分析

目的对医院内传播的12株耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)作DNA指纹图谱分析,寻找传播途径,控制院内感染。方法纸片琼脂扩散(K-B)法检测细菌耐药性,聚合酶链反应(PCR)法检测mecA基因携带情况,采用ERIC-PCR作DNA指纹图谱分析。结果12株分离菌耐药表型和基因型相同,均对万古霉素和替考拉宁敏感,对其他13种抗菌药物耐药,mecA基因全部阳性。12株不同来源菌株的DNA同源性达100%。患者家属及医护人员的手和病房物体表面被污染情况严重。结论MRS对抗菌药物呈多重耐药性。患者家属及医护人员手部卫生意识薄弱,这是引起MRS医院内传播的主要原因。应加强监控,防止MRS的医院内感染。

457株葡萄球菌临床分离率及耐药性分析

目的:回顾性分析2005年1月～2006年3月本地区临床标本中分离的457株葡萄球菌,对该时段细菌的临床分布情况及耐药性进行调查分析。以指导临床合理用药,控制医院内感染及进行流行病学调查。方法:对457株葡萄球菌的分布及耐药性进行统计分析,并检测mecA基因的携带情况,比较耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)与甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)的耐药率。结果:MRS感染以60￣88岁的呼吸科、老年病科及ICU的患者居多(57.3%)。MRS在痰液样本中分离率最高(54.5%)。纸片扩散法和微量肉汤稀释法的检出率为均77.9%,葡萄球菌mecA基因检出率为73.5%。101株MSS对青霉素及氨苄青霉素的耐药率为87.1%和86.1%,而对氨苄西林/舒巴坦的耐药率为28.7%。MRS与MSS相比,对非β-内酰胺类抗生素的耐药率差异存在显著性。而对利福平和莫匹罗星,两者的耐药率均<5%,且差异无显著性。未发现对万古霉素和替考拉宁耐药菌株。结论:MRS所致医院内感染情况严重,对抗菌药物呈多重耐药,其耐药性显著高于MSS。故临床治疗MRS感染必须依据实验室的结果合理选用抗生素。

多重聚合酶链反应快速鉴别葡萄球菌及mecA基因检测

目的:建立快速鉴定葡萄球菌及检测mecA基因的多重聚合酶链反应(PCR)诊断方法。方法:以葡萄球菌16SrRNA、金黄色葡萄球菌的nuc基因以及耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的mecA基因合成3对引物,采用多重PCR扩增法,快速鉴定葡萄球菌,同时判断MRS菌株。结果:107株葡萄球菌的16SrRNA基因扩增片段全部为阳性,与常规鉴定结果符合率为100%;nuc基因阳性48株,阴性59株,与金黄色葡萄球菌核酸酶试验一致;以PBP2a乳胶凝集试验结果为金标准,苯唑西林(含2%NaClMHA)及头孢西丁纸片扩散法的敏感性为98.7%和100%,特异性分别为75.0%和82.1%;PCR扩增法的敏感性和特异性均为100%。结论:多重PCR法能快速准确地从临床分离菌株中鉴别葡萄球菌,并可同步对mecA基因进行准确检测。