戊型肝炎病毒长爪沙鼠感染模型的初步研究

旨在探索应用长爪沙鼠(Meiiones unguiculataus)构建戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)动物模型的可行性,从猪粪便稀释悬液中提取HEV RNA并鉴定,经腹腔和口服接种HEV于长爪沙鼠,并每周采集血液、相关器官(心、肝、脾、肺、肾、肠系膜淋巴结、脾脏)及粪便。用反转录PCR(RT-PCR)和免疫组化等检测方法分析各个样品。结果表明,感染后第7天开始,可从血液、肾脏、脾脏、肠系膜淋巴结、肝脏、肺、粪便中检测到HEV RNA;通过免疫组化和组织病理学观察,发现HEV可在肝脏中进行表达,并且能引起肝组织病理变化,但感染HEV后长爪沙鼠均缺乏较明显的临床表现症状。结果提示,长爪沙鼠对HEV具有易感性,感染后肝脏出现小叶性肝炎的病理变化,具有作为HEV感染动物模型的潜在价值。

柴胡剂治疗糖尿病合并泌尿系感染的中医证候疗效分析

目的:基于"三焦气化"理论与导师姜良铎教授和南征教授多年临床经验,研究"柴胡剂"对糖尿病合并泌尿系感染的中医证候疗效。方法:选取就诊于两位教授及两所医院内分泌科门诊符合西医诊断标准及纳入标准的糖尿病合并泌尿系感染的患者223例,分为常规辨治组、调化三焦组、西药治疗组,分别以3种方案进行治疗。连续观察3个疗程,并随访3个月。结果:"柴胡剂"在糖尿病相关中医证候方面的疗效优于其他两组,且有统计学意义。结论:"柴胡剂"体现了姜良铎教授和南征教授的"三焦气化"理论,提高了治疗糖尿病合并泌尿系感染的疗效。

戊型肝炎病毒Ch-S-1株全长体外转录载体的构建及表达初步研究

目的:构建出HEV Ch-S-1株的全长c DNA克隆,并转染至Hep G2细胞并对其表达进行初步研究。方法:利用重叠PCR方法获得HEV Ch-S-1株全长PCR产物;构建体外转录载体p KS-HEV,成功获得HEV基因组RNA,并转染至Hep G2细胞,通过RT-n PCR、套式PCR和间接免疫荧光实验检测病毒的表达。结果:成功构建了HEV基因组全长c DNA体外转录载体p KS-HEV,并证明了该c DNA克隆在Hep G2细胞中成功进行了表达。结论:成功构建了HEV Ch-S-1株全长体外转录载体p KS-HEV,并对其表达进行了初步研究,为将来在分子水平上研究HEV及研发疫苗提供了一些实验基础。

巨刺一针法配合刺络放血治疗急性落枕的临床研究

目的:观察巨刺一针法配合刺血拔罐治疗急性落枕的临床研究,以提高临床疗效。方法:治疗组采用巨刺法针刺外关穴并配合刺络放血进行治疗;对照组采用单纯针刺相应穴位治疗。观察2组的疗程与疗效。结果:治疗组临床疗效总有效率为93.5%,而对照组为92.5%。2组比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组疗效优于对照组。结论:临床治疗急性落枕,巨刺一针法配合刺血拔罐优于传统针刺疗法,且疗程短,针刺少,疗效佳。

中医束悗推拿法治疗糖尿病周围神经病变手法作用探讨

糖尿病周围神经病变是糖尿病最常见的神经系统并发症,中医病因病机为久病阴虚燥热,血瘀阻络,致筋脉失养、气血不达四末、失于温煦,而见麻木不仁、四肢厥冷。糖尿病患者并发周围神经病变人群数量巨大,因目前对其发病机制尚未清楚,故西药疗效并不十分满意。笔者治疗该病以补虚行气通瘀为原则,应用束悗推拿法治疗,明显减轻了患者的麻木、疼痛症状,并明显促进了末梢神经功能的恢复,收到较好的临床效果。

吉林地区人群戊型肝炎病毒感染的流行病学调查

目的调查吉林地区部分人群戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法用ELISA检测人群血清中抗HEV抗体;对部分血清用RT-PCR检测HEV RNA,对PCR阳性产物进行测序,所得序列构建系统发育树。结果 ELASA方法检测7 514份人血清,1 621份抗HEV抗体阳性,阳性率21.57%。其中男、女性阳性率分别为30.87%和12.01%,男、女性感染者之比为2.64︰1。感染者抗体水平随年龄增加而升高。不同职业人群HEV率不同,以猪销售人员及养猪从业人员感染率最高,分别为97.18%和97.09%。从戊型肝炎患者中检测HEV RNA,序列分析结果为HEV基因Ⅳ型。结论吉林地区人群HEV感染率较高。从进化关系角度分析,吉林地区人源HEV与猪源HEV可能分化于同一分支。

猪戊型肝炎病毒吉林地区分离株全基因序列的分析

为了了解吉林地区HEV分子背景和流行特征,对2013年采自吉林地区养殖场的毒株编号为Ch-S-1的Ⅳ型戊型肝炎病毒(HEV)的全基因序列进行了分析。通过提取病毒RNA,采用RT-PCR方法分段扩增HEV全长基因,两端采用RACE法扩增,经过序列测定和拼接,利用ClusterX1.81、MEGA3.0、Phylop win 3.0软件分析基因序列。最终得到了HEV Ch-S-1全长基因组(GenBank登录号EF077630,7 261bp),其中ORF1、ORF2和ORF3分别编码1 706,674,114个氨基酸。与人源及猪源各基因型HEV相比,Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF1片段同源性在78.8%~86.9%之间,而与基因Ⅳ型的ORF1片段同源性在93.7%~97.6%。Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF2片段同源性在87.5%~92.4%之间,而与基因Ⅳ型的ORF2片段同源性在95.9~98.2%。Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF3片段同源性在75.2%~84.0%之间,而与基因Ⅳ型的ORF3片段同源性在97.5%~99.2%。结果表明:HEV Ch-S-1全序列的基因结构特征与HEVⅣ型基本一致。

新城疫病毒和传染性支气管炎病毒多重DNA微列阵鉴定方法的构建

目的建立可同时检测新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的多重DNA微列阵鉴定方法。方法针对NDV和IBV设计PCR引物和微阵列探针,制备检测用微阵列。将样品与微列阵进行杂交,分析微阵列的特异性和灵敏度。结果建立的微阵列检测NDV和IBV为阳性,且能区分NDV和IBV,而流感病毒传染性法氏囊病毒等阴性对照无杂交信号。通过GenePix 4.1软件分析杂交信号的平均SNR532,NDV和IBV的检出限为1×10~3copies/μl。结论建立的多重DNA微列阵鉴定方法具有高特异性和高敏感性,可用于NDV和IBV感染检测。