基于ERS信号蛋白异常表达探讨清肝降浊方治疗NAFLD的机制研究

目的通过试验研究探讨清肝降浊方基于ERS信号蛋白异常表达治疗非酒精性脂肪肝病的作用机制。方法采用高脂饮食饲喂的方法,诱导建立非酒精性脂肪肝病大鼠动物模型。给药8周后,进行肝功能指标AST、ALT、AKP检测、血清中TC、TG、NEFA及肝组织匀浆中TC、TG检测、肝组织匀浆中SOD、MDA检测,检测信号通路相关蛋白ATF4、eIF2a、CHOP的表达水平。结果清肝降浊方865.1 mg/kg、432.6 mg/kg和216.3 mg/kg给药组动物血清AST、ALT、AKP活性及肝组织中ATF4、CHOP表达量、TG含量均明显的低于模型组,而肝组织中SOD活性显著高于模型组(P<0.01或P<0.05);865.1 mg/kg和432.6 mg/kg 2个给药组动物血清TC、TG、NEFA含量及肝组织中TC、TG、MDA含量、eIF2a表达量均低于模型组(P<0.01或P<0.05)。结论清肝降浊方治疗NAFLD作用机制可能是通过调节ERS信号蛋白异常表达,从而达到防治非酒精性脂肪肝病。

解淀粉芽孢杆菌BA-2原生质体的制备及纤维素酶高产突变菌株筛选

目的确认解淀粉芽孢杆菌BA-2(Bacillus amyloliquefaciens BA-2)原生质体制备的最佳条件,并对其菌株进行复合诱变筛选获得耐高温性状产纤维素酶菌株。方法通过探究菌龄、溶菌酶浓度、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂的pH、再生培养基类型和培养方式等考察原生质体制备与再生条件的影响因素,确定其最优条件。并用紫外线对原生质体进行诱变,获得的再生突变菌株作为出发菌株进行后续诱变处理,采用化学诱变剂硫酸二乙酯处理菌株,设置培养温度梯度筛选菌株。结果解淀粉芽孢杆菌BA-2原生质体制备的最优条件为菌龄8 h,溶菌酶质量浓度1.5 mg/mL,酶解时间65 min,酶解温度37℃,渗透压稳定剂pH 6.5。在此条件下,解淀粉芽孢杆菌原生质体的形成率为98.85%±0.26%,再生率为57.39%±0.76%。经过复合诱变获得突变菌株BA-DES4在培养温度55℃下酶活达到(76.58±1.19)U/mL,滤纸酶活较出发菌株BA-2提高24.5%。结论本研究获得了解淀粉芽孢杆菌BA-2原生质体制备的最佳条件,并通过复合诱变筛选获得耐高温性状产纤维素酶菌株BA-DES4,该菌株稳定性强、适应性好,具有开发成为工业化生产纤维素酶的微生物潜力,突变菌株产酶条件有待进一步研究,以满足于工业化生产的需求。

五仁丸加减方对高脂饲料诱导小鼠肥胖的预防作用

目的 探讨五仁丸加减方对高脂饲料诱导小鼠肥胖的预防作用。方法 将60只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、阳性组(27.3 mg/kg奥利司他)和五仁丸加减方低、中、高剂量组(0.75、1.50、2.25 g/kg),每组10只,给予60%纯化的高脂饲料造模,同时分别灌胃给予相应药物,连续60 d。记录小鼠体质量、腰围和进食量,CT扫描内脏脂肪和总脂肪蓄积程度,记录肾周脂肪和附睾脂肪含量,检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,观察肾周脂肪和附睾脂肪病理学变化。结果 与模型组比较,五仁丸加减方组小鼠体质量和腰围降低(P<0.01),但不影响进食量(P>0.05);内脏脂肪、总脂肪蓄积程度及肾周脂肪、附睾脂肪含量降低(P<0.05,P<0.01);血清TC、TG、LDL-C水平降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平升高(P<0.05,P<0.01);脂肪细胞体积和形态得到改善。结论 五仁丸加减方可通过促进肥胖小鼠脂肪消耗来发挥对肥胖的预防作用。

古田山亚热带常绿阔叶林凋落物分解及养分释放动态

亚热带常绿阔叶林在我国森林生态系统碳存储方面发挥着重要作用,研究其凋落物分解机制对理解和预测亚热带森林生态系统养分循环和碳储存具有重要意义。以古田山国家级自然保护区典型亚热带常绿阔叶林为研究区域,以两种亚热带树种马尾松(Pinus massoniana)和石栎(Lithocarpus glaber)凋落叶作为分解基质,通过对凋落物分解速率、凋落物养分释放速率、土壤微生物群落结构、土壤胞外酶活性以及土壤理化性质的测定,从凋落物质量、分解者和分解环境三个层面探究亚热带常绿阔叶林凋落物分解的主场效应、养分释放模式以及土壤微生物作用机制。研究结果表明:(1)马尾松凋落叶主场效应不明显,而石栎凋落叶在分解过程中表现出一定主场效应,并具有时间依赖性,在分解后期主场效应较为强烈,说明具有较低初始有机碳含量的凋落物可能存在相对明显的正主场效应;(2)马尾松和石栎凋落叶的有机碳均呈净富集状态,马尾松凋落叶氮在分解后期呈释放模式,而石栎凋落叶氮则表现为净富集模式;(3)亚热带常绿阔叶林内凋落物分解主要受养分残留率、土壤微生物群落结构(真菌/细菌比和革兰氏阳性/阴性细菌比)和土壤pH的影响。综上,揭示了马尾松和石栎凋落物分解主场效应的差异性表现和时间依赖性,有助于亚热带常绿阔叶林优势树种的凋落物分解机制的深入理解。

同种异体子宫内膜异位症大鼠模型用于GnRH激动剂类药物的药效评价研究

目的用同种异体移植的方法构建大鼠子宫内膜异位症模型,并评价促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)激动剂GenSci006对实验大鼠子宫内膜异位症模型的影响。方法取供体SPF级雌性SD大鼠的子宫内膜移植于受体雌性大鼠的腹腔壁上,构建同种异体的子宫内膜异位症模型。3周后,测量异位内膜的长、宽、高,计算给药前异位内膜的体积V1。将进行假手术操作的大鼠设为假手术组,将造模大鼠随机分为模型组、曲普瑞林组(0.25mg/kg)、GenSci006-1组(0.125mg/kg)和GenSci006-2组(0.25mg/kg)共4组,每组大鼠16只。各组大鼠单次给予相应的药物,假手术组和模型组给予同等体积的溶剂。3周后,再次测量异位内膜,计算给药后异位内膜的体积V2和抑制率;通过比较脏器系数及病理切片的变化,判断GenSci006对大鼠子宫和卵巢组织的影响;ELISA法测定血清中雌二醇(estradiol,E_(2))、孕酮(progesterone,P_(4))、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizinghormone,LH)水平的变化;实时荧光定量PCR法测定下丘脑和垂体中GnRH受体(GnRHreceptor,GnRHR)mRNA的表达水平。蛋白质印迹法检测异位内膜组织中雌激素受体(estrogen receptor,ER)α、ERβ和孕激素受体(progesterone receptor,PR)蛋白的表达。结果给药3周后发现,与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠的体重显著增加(P<0.05),而异位内膜的体积显著减小(P<0.05)。与假手术组相比,模型组子宫、卵巢脏器系数及子宫内膜厚度无明显变化(P>0.05);与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组子宫脏器系数及子宫内膜厚度显著降低(P<0.05)。与假手术组相比,模型组血清中E_(2)、P_(4)、FSH、LH水平无明显变化(P>0.05);与模型组相比,曲普瑞林组、GenSci006-1组和GenSci006-2组大鼠的卵巢脏器系数和血清P4水平均显著降低(P<0.05),而GenSci006-1组大鼠的血清LH水平明显升高(P<0.05),但各组血清E_(2)和FSH水平并无显著变化(P>0.05)。与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠垂体GnRHRmRNA表达水平显著下调(P<0.05);各组大鼠下丘脑组织中GnRHRmRNA表达及异位内膜组织中ERα、ERβ、PR蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。结论大鼠同种异体子宫内膜异位症模型适宜作为筛选和评价子宫内膜异位症治疗药物的动物模型,而且异位内膜体积、抑制率、子宫及卵巢脏器系数、血清E_(2)水平均可作为检测药物疗效的指标。

企业财务BP的价值内涵与构建策略研究

在市场竞争日益激烈的背景下,企业财务BP作为企业财务管理中的重要一环,其价值在于将财务理念和价值观贯穿于企业的各个业务环节,为企业的战略制定、运营管理、风险控制和价值创造等提供有力支持。文章对企业财务BP的构建策略进行了深入研究,阐述了企业财务BP在规范财务流程、降低财务风险、支持决策制定、落地业财融合、支持业务端价值创造等方面的作用;并提出了构建有效的企业财务BP的策略,包括深入分析业务需求、优化流程设计、利用信息技术强化流程控制、建立风险管控机制、加强数据分析应用、搭建高效业财沟通机制等方面。有效的企业财务BP能够提高企业的财务管理水平、降低财务风险、支撑战略决策、支持业务端价值创造等,对企业价值的提升具有重要意义。

马耳它布氏杆菌bp26基因缺失株的构建及鉴定

为了建立马耳他布氏杆菌M5-90株弱毒疫苗株与野生株的鉴别诊断,本研究以bp26基因作为重组靶位点,以M5-90为亲本,利用bp26基因ORF外侧序列作为同源序列,将卡那霉素抗性基因(Kanr)整合到细菌基因组中,双交叉重组阳性菌株,经SDS-PAGE和western blot试验表明迁移率约为29ku的BP26蛋白在亲本菌中表达并可被鼠抗BP26高免血清识别,而突变株M5-90-26反应结果为阴性,表明BP26蛋白在突变疫苗株M5-90-26中未表达。M5-90-26具备从血清学角度区分M5-90-26免疫与野生型布氏杆菌感染,对布氏杆菌病防制、监测及净化具有重要的意义。

外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子凝胶对烧烫伤动物的疗效

目的观察外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)凝胶对实验性动物烧烫伤的治疗作用。方法采用电烙铁方法建立实验性大鼠烫伤创面,烫伤部位分别采用外用rhGM-CSF凝胶基质、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)喷雾剂、外用rhGM-CSF凝胶高(20μg/cm2)、低(5μg/cm2)剂量进行治疗,观察外用rhGM-CSF凝胶对烫伤创面的治疗作用,包括烫伤皮肤的病理学检查、烫伤创面的愈合情况、烫伤创面的感染情况及烫伤动物的死亡情况。采用凝固气油烧灼建立实验性小鼠Ⅲ°烧伤模型,烧伤部位分别采用rhGM-CSF凝胶基质、bFGF喷雾剂和外用rhGM-CSF凝胶进行治疗,观察小鼠死亡数量、感染情况及创面愈合后生毛时间。结果与凝胶基质对照组比较,外用rhGM-CSF凝胶高、低剂量治疗大鼠烫伤后的皮肤愈合时间明显缩短。病理检查结果显示,外用rhGM-CSF凝胶高、低剂量治疗大鼠烫伤创面的愈合程度明显优于凝胶基质对照组。外用rhGM-CSF凝胶对小鼠Ⅲ°烧伤具有保护和抗感染作用。烫伤创面愈合后生毛时间明显短于凝胶基质对照组。结论外用rhGM-CSF凝胶对实验性动物烧烫伤具有较好的治疗效果。

木瓜籽提取物抗感染镇痛活性研究

目的:研究木瓜籽乙醇提取物镇痛、抗感染的作用。方法:采用热板刺激法和醋酸刺激扭体法研究木瓜籽提取物的镇痛作用,采用木瓜籽提取物对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性、二甲苯致小鼠耳廓肿胀和大鼠棉球肉芽肿形成的抑制研究其抗感染作用。结果:木瓜籽提取物能明显延长小鼠的疼痛域值,抑制小鼠腹腔毛细血管通透性、二甲苯致小鼠耳廓肿胀和大鼠棉球肉芽肿形成。结论:木瓜籽乙醇提取物有明显的镇痛、抗感染作用。

人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤细胞B16的增殖抑制及对Bcl-2/Bax表达的影响

研究人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤细胞的增殖抑制作用及对Bcl-2/Bax表达的的影响:(1)MTT法测定人参水溶性总蛋白对黑色素瘤B16细胞株的增殖抑制率。(2)RT-PCR(Real-time PCR)法检测Bcl-2、Bax基因的mRNA表达情况。(3)Western blot测定凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:(1)人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞株有明显的增殖抑制作用,其抑制率随着加药浓度的增加而升高;并与加药浓度呈现一定的量效关系。(2)随着人参水溶性总蛋白浓度的增高(0、100、500、1 000μg/m L),RT-PCR检测的Bcl-2 mRNA相对表达量逐渐降低,Bax mRNA相对表达量逐渐升高,当加药浓度为1 000μg/m L时,Bcl-2的相对表达量最低,为0.20±0.05;Bax的相对表达量最高,为16.83±0.07;与对照组相比,Bcl-2和Bax基因的相对表达量差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)经Western blot测定,各组Bcl-2蛋白的表达均低于对照组,各组Bax蛋白表达均高于对照组,且随着加药浓度的增加,Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,Bax蛋白表达量逐渐升高。说明人参水溶性总蛋白可以抑制小鼠黑色素瘤B16细胞株增殖,其分子机制可能与调控Bcl-2/Bax凋亡蛋白的表达有关。

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在创面愈合中的应用进展

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte／macmphage colony—stimulating factor，GM—CSF）是近几十年来医学研究的一热门细胞因子。1977年它由Burgess等在鼠的肺条件培养液中首次发现。因能刺激造血前体细胞形成粒细胞巨噬细胞集落．故而得名。1985年，人类GM．CSF基因（human GM—CSF．hGM．CSF）被首次克隆表达．此后重组人GM—CSF（recombinant human GM—CSF，rhGM—CSF）渐应用于临床。GM．CSF有多种功能，可刺激造血前体细胞增殖、分化及促进其向外周转移，又可诱导多种细胞如巨噬细胞、角质细胞等的分化、增殖．并活化、增强其功能。rhGM．CSF已成功应用于多个临床领域，如改善放化疗、严重感染等原因导致的骨髓抑制．增强疫苗的免疫原性，促进创面愈合等。

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因在卡介苗中的优化表达

为构建牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)基因工程活载体疫苗,根据已知的BVDV Changehun184毒株E2基因序列,利用DN.AStar生物学软件对其进行分析,预测了可能存在的抗原表位,设计6对引物,分别扩增了包含预测抗原位点的6个片段,1—297 aa、1—345 aa、1—374 aa、45—297 aa、45—345 aa和45—374 aa,克隆至穿梭表达载体pMV361中,经酶切、PCR扩增和测序证实已正确插入到表达载体中,构建了6个原核表达质粒。阳性重组质粒通过电转化到卡介苗(BCG)感受态中,热诱导后,进行SDS-PAGE分析和免疫印迹检测。结果表明6个重组质粒在卡介苗中均有不同程度的表达,表达产物与理论推测的相对分子质量一致。Western blot结果显示其融合蛋白能被牛抗BVDV的阳性血清识别,具有相应的反应原性。本研究为进一步研究BVDV基因工程活载体疫苗奠定了基础。

龙胆化学成分及药理作用研究进展

综述了龙胆化学成分及药理作用研究进展,为龙胆的进一步研究、利用和开发提供理论基础。

新型抗病毒药物法昔洛韦的合成

以氯乙酸乙酯为原料 ,采用 2 -氨基嘌呤位置有择烷基化反应合成新型抗病毒药物法昔洛韦 ,总收率 2 1 % .关键中间体及最终化合物的结构经元素分析、质谱、核磁共振氢谱及碳谱得到确证 .

高效液相法测定琦红丸中酸式及内酯洛伐他汀含量

目的：建立琦红丸中洛伐他汀（酸式及内酯）的含量测定标准。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法测定琦红丸中的洛伐他汀的含量,色谱柱：XDB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：甲醇∶0.12%磷酸溶液（77∶23）,检测波长：238 nm,流速：1.0 mL/min,柱温：24℃。结果：洛伐他汀（内酯）在8.44~253.2μg/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为99.25%。结论：本方法操作简便,结果准确,重现性好,可用于琦红丸中洛伐他汀的含量测定。

外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子凝胶与注射用重组人生长激素联合应用对实验性烫伤动物的疗效

目的观察外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)凝胶与注射用重组人生长激素(rhGH)联合应用对实验性烫伤动物的疗效。方法将脱毛的Wistar大鼠背部皮肤浸入(85±1)℃恒温水浴中持续15s,造成深Ⅱ度烫伤。大鼠烫伤部位分别涂抹外用rhGM-CSF凝胶、易孚凝胶、美宝湿润烧伤膏、磺胺嘧啶银、医用凡士林膏,金因肽组用金因肽喷湿创面,rhGH组和GM+GH组在烫伤后24h开始皮下注射rhGH。各组每天给药1次,连续用药25d。每5d用透明硫酸纸描绘烫伤皮肤面积,并称重,计算烫伤皮肤愈合率;烫伤后6h、9d和25d,各组随机选取3只大鼠,对其烫伤创面进行病理学检查。结果从给药第10天开始,各给药组大鼠烫伤皮肤愈合率均比模型组明显提高;以GM+GH组最高。病理学观察显示,烫伤后25d,各给药组大鼠绝大多数创面表皮细胞增生明显,真皮层可见毛囊、皮脂腺腺体修复,GM+GH组炎细胞浸润不明显,模型组多见化脓性炎症改变,并见脓肿灶形成。结论各给药组均可减轻烫伤后炎症反应,促进烫伤皮肤愈合,对深Ⅱ度烫伤大鼠皮肤有明显治疗作用,其中以外用rhGM-CSF凝胶联合应用rhGH的治疗效果最好。

辣蓼草和紫苏粕面包的研制

以低筋面粉为主要原料,添加辣蓼草、紫苏粕、甘草、白砂糖、面包改良剂、黄油等辅料生产辣蓼草、紫苏粕面包,此工艺采用一次发酵,通过响应面方法确定辣蓼草和紫苏粕面包的最佳工艺配方。结果表明,辣蓼草、紫苏粕面包的最佳工艺配方为:白砂糖为63 g,中草药提取物为10.3 g,干酵母5.6 g,(以面粉300 g计),此时预测值为96.7,所制得的辣蓼草、紫苏粕面包的品质最佳。

慢性束缚应激对大鼠行为学和杏仁核5-HT、5-HIAA含量的影响及加味甘麦大枣汤的干预

目的:探讨慢性束缚应激对大鼠在旷场迷宫中的行为学参数和大脑杏仁核部位5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响,以及加味甘麦大枣汤的干预作用。方法:采用经典的慢性束缚应激的实验方法,复制大鼠慢性应激的模型,然后记录大鼠在旷场迷宫中的行为学参数;分离大鼠大脑杏仁核部位,采用酶联免疫吸附法测定其中5-HT、5-HIAA的浓度,进而推算出慢性束缚应激对杏仁核部位5-HIAA/5-HT比值的影响,并探究加味甘麦大枣汤对其的干预作用。结果:实验结果表明,与空白组相比,模型组大鼠在穿格数、直立次数和理毛次数这三个行为学参数上明显减少(P<0.05),而排便次数这个参数则显著增加(P<0.05);杏仁核部位5-HT、5-HIAA含量以及5-HIAA/5-HT比值明显减小(P<0.05)。与模型组相比,给药组大鼠在穿格数和理毛次数这两个指标上显著增加(P<0.05),排便次数明显减少(P<0.05);在直立次数这个指标上虽有增加的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。杏仁核部位5-HT、5-HIAA的含量显著升高(P<0.05),虽然5-HIAA/5-HT的比值有升高的趋势,但是无统计学上的差异(P>0.05)。结论:慢性束缚应激使大鼠在旷场迷宫中的各行为学参数明显改变,使大鼠杏仁核部位5-HT和其代谢产物的含量以及5-HT能神经系统的兴奋性降低。中药复方加味甘麦大枣汤能明显对抗慢性束缚应激对大鼠造成的影响。

炙甘草汤加减对急性心肌缺血大鼠心电图和血清酶学指标的影响

目的探讨急性心肌缺血对大鼠心电图和血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)浓度的影响及炙甘草汤加减方对其的干预作用。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法,复制急性心肌缺血大鼠的模型,运用多道生理记录仪监测大鼠心电图(ECG)的变化,分别记录大鼠冠状动脉结扎30、60 min、2、4、6 h后ECG中J点的位移(ΔJ),冠脉结扎后6 h取血,测定大鼠血清中CK、LDH及MDA的浓度,并探究炙甘草汤加减方对其的干预作用。结果与假手术组相比,模型组大鼠在30、60 min、2、4、6 h J点位移明显增高(P<0.05),血清中CK、LDH及MDA的浓度也显著上升(P<0.05);与模型组相比,给药组大鼠在这五个时间点上的J点位移显著降低(P<0.05),血清中CK和LDH的浓度也明显下降(P<0.05),在MDA这个指标上虽有下降的趋势,但是差异无统计学上的意义(P>0.05)。结论大鼠结扎冠脉左前降支后,心电图发生明显变化,血清中CK、LDH及MDA浓度明显升高,本实验所用的炙甘草汤加减方能明显缓解急性心肌缺血对大鼠造成的影响。

马来酸罗格列酮的合成

以 2 -溴吡啶为原料 ,采用两种不同的路线合成马来酸罗格列酮 ,总收率分别为 1 5%和1 7%.实验表明 ,经由 Meerwin芳基化反应的途径具有反应原料来源方便易得 ,而经由Knoevenagel缩合反应的途径具有合成路线较短等特点 .关键中间体及最终化合物的结构经元素分析、质谱、核磁共振氢谱及碳谱得到确证 .合成中避免使用高温、高压等条件 。