细胞-酶联免疫吸附试验及其应用

酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）问世数十年来，广泛应用于检测各种体液中的可溶性抗原或抗体。在传统的ELISA中，微孔板上包被的是可溶性的抗体或抗原，然而在免疫学研究和临床检测时，需要了解免疫活性细胞表面表达的特定分子以对细胞特性进行认定和分类，亦需测定抗某种细胞的抗体或评价某种细胞的功能，因而传统的ELISA中的包被物或受检物就要被替代，检测模式有所改变。

检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法的建立及初步应用

目的 建立检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法（BSA—ICC）并作临床初步应用。方法 从健康人外周血单个核细胞（PBMC）中富集CD4细胞，加入莫能霉素，用不同浓度的佛波醇酯（PMA）和钙离子载体（A23817）诱导CD4细胞不同时间，比较其胞内表达白细胞介素-2（IL-2）／白细胞介素-4（IL-4）的细胞百分率，确定最适诱生条件；用不同稀释度的IL-2McAb、IL-4McAb、不同浓度的生物素化羊抗鼠IgG（bio-SAMIgG）和辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（HRP-SA）作棋盘配比试验，确认McAb、bio-SAMIgG和HRP—SA的最适浓度，根据上述结果建立了检测细胞内细胞因子的BSA—ICC法。用所建方法检测20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中表达IL-2／IL-4细胞的百分率。结果 诱导CD4细胞胞内表达IL-2和IL-4的细胞最高百分率的PMA和A23817浓度分别为100μg/L和2．0μmol／L，诱导高峰时间分别为5和7h，BSA-ICC法中所用IL-2McAb、IL-4McAb最适稀释度分别为1：20和1：40，bio—SAMIgG和HRP-SA浓度分别为10～15μg/ml和15μg/ml。20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中分泌IL-2的细胞百分率分别为（45．90±4．39）％、（37．28±2．67）％和（25．19±3．49）％，分泌IL-4的细胞百分率分别为（10．5±1．50）％、（9．94±1．06）％和（16．13±2．50）％，IL-2^＋CD4^＋／IL-4^＋CD4^＋比值分别为3．65±0．94、3．55±0．76和1．27±0．26。结论 所建方法可用于T辅助（Th）细胞亚型的测定，从而判断Th细胞的极化状态。妇科恶性肿瘤患者Th细胞功能失衡极化，呈Th2反应，可能与恶性肿瘤的发生有关。

应用CD_2^+细胞增长试验筛选和评价免疫制剂

建立 1种筛选和鉴定生物制品免疫活性的方法—— BSA免疫细胞化学法 CD+ 2 细胞增长试验。经预试 ,确定了胰酶的最适浓度和处理时间 ,业经处理的 PBMC温育的合适时间和药物的最适浓度 ,并对已知具有免疫增强或免疫抑制功能的若干种制剂作活性检测 ,表明本法具有操作简便、重复性好、易标准化的优点。

硒对提高胃肠癌患者术前免疫水平的探讨

本文将31例胃肠癌患者分为治疗组和对照组（未加服硒），观察术前投药前后血清硒浓度与T淋巴细胞亚群、NK细胞的活性的变化。结果显示：胃肠癌患者入院时血硒水平为0．825±0．11μmol／L，低于正常对照组，口服硒剂后血硒浓度升高，与对照组相比差异有显著性（P＜0．05），服硒后血中CD3、CD4、CD8细胞以及CD4／CD8细胞比值仍维持原有水平，但对照组有所下降（P＜0．05），值得注意的是服硒后患者血中NK细胞活性明显升高，与对照组相比差异显著。结果表明：术前适量补充有机硒能在短期内可作为一个有效的辅助治疗。

酶联免疫吸附试验检测体液中细胞因子的影响因素

健康人体液中细胞因子含量极低，若出现较高量时，常与机体细胞免疫失衡或患者病情及治疗等情况有关，现今医院检验科已开展这方面的工作，有的也列入常规项目。细胞因子测定的方法有好几种，其中酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）以其快速、特异性强、精确性高和不受体液中药物的干扰等优点而得到广泛的应用。为能给临床提供可靠的信息，在选用优质的试剂盒和严格遵守试验操作程序的基础上，强调重视影响试验本身的因素。

影响免疫系统功能的重要微量元素——锌

锌能促进人体组织细胞的正常分化和发育，促进组织再生，也是体内多种金属酶的组成成份，它与其他微量元素在体内保持着微妙的平衡作用，一旦失去平衡，会导致疾病的发生。近几年，随着现代免疫学研究的深入，进一步了解到，锌也是免疫系统所需的重要微量元素之一，凡血浆锌水平低下伴随多种疾病所出现的明显缺锌的个体，其免疫应答均有所减弱，而且缺锌常使机体感染细菌、病毒和真菌的频率增高．本文扼要介绍这方面的近期研究概况．

乳腺癌患者四项细胞免疫参数的检测和评价

检测乳腺癌患者的四项细胞免疫参数：T淋巴细胞总数、CD＋／CDs＋比值、sIL－2R及NK细胞活性。结果显示，不能手术组患者的T淋巴细胞、CD＋／CD＋比值、NK细胞活性明显低于健康对照组及手术后组，而sIL－2R明显高于健康对照组和手术后组。此外，不能手术组和手术后组的NK细胞活性与sIL－2R呈负相关。提示用NK细胞活性和sIL－2R的检测作为癌症患者细胞免疫状态的监测指标有实用的临床意义。

加强衰老与细胞免疫内在联系的研究

世界卫生组织新近发表的1998年“世界卫生状况”报告预测，到2025年世界人均出生时预期寿命将从现在的66岁提高到73岁．人类进入廿一世纪将恬得更健康、更长寿．延缓人体的衰老是保证长寿的基础，但人类迄今对自身衰老本质的了解还十分肤浅，其涉及的内容也十分广泛和复杂。衰老时免疫系统与其他系统也同样进行着生理性衰退，放老年人易患感染性疾病．自身免疫病和肿瘤等与免疫密切相关的病种，可以想象衰老与免疫问有着内在的联系，值得从事老年病研究者和医师们的重视．

检测和研究人体细胞免疫功能的实用技术——酶联免疫斑点试验

机体的免疫类型分体液免疫和细胞免疫，两者相辅相成，但不同疾病所表现的免疫类型有所侧重。如胞内寄生的病原菌、病毒和寄生虫感染以及肿瘤等疾病与患者体内的细胞免疫功能异常或失衡密切相关。目前，临床免疫枪验项目早已突破局限于传染病诊断的血清学试验，如检测各种免疫活性细胞的数量及其功能特性，T细胞亚群的平衡状态等诸多免疫指标，有助于临床深入评价患者在疾病的病程中或治疗状态下的免疫应答特点及其变化规律，藉以提高临床诊疗水平。

载脂蛋白E基因多态性与老年人认知功能相关性研究

目的 研究载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与老年人认知功能之间的相关性。方法 采用简易精神状态检查(MMSE)对134例住院患者作认知功能评分,分为MMSE≤23组和MMSE≥24组,做ApoE的基因分型鉴定并进行比较。结果 MMSE≥24组,ApoEε3/ε3型占77.8％,MMSE≤23组,ApoEε3/ε3型占52.1％。ApoEε4/ε3型频率(28.8％)和ApoE ε4等位基因频率(17.6％)均高于MMSE≥24组,两组相比有显著性差异(P<0.01)。在MMSE≤23组中男女患者相比ApoEε4等位基因频率和年龄均无显著性差异(P>0.05),而女性患者在MMSE≤23组中的人数比男性患者多,有显著性差异(P>0. 05)。结论 无痴呆老年人的认知功能与ApoE基因型存在关联性,ApoEε4等位基因是对老年认知功能产生有害影响的因素,可能不是AD所特有的。ApoEε4等位基因频率分布无性别差异。

CD术语的来龙去脉及其与医学检验的关系

ＣＤ术语原是免疫学中常用的专有名词。随着现代免疫学理论和技术间有关学科的不断渗透，近年来，ＣＤ术语屡在本刊和各医学临床杂志出现，使用频率日增。它在一定程度上为医学检验增添崭新的内容和免疫学检验项目。本文概述有关ＣＤ的基本内容供读者参考。ＣＤ术语的起源...

应用CD^(2+)细胞增长试验体外检测人PBMC对免疫制剂的应答能力

为考核 CD2 + 细胞增长试验在评价人体对免疫制剂应答能力中的应用价值 ,用已建立的生物素 -链霉亲和素免疫细胞化学法 CD2 + 细胞增长试验 ,将健康人和肿瘤病人外周血单个核细胞 (PBMC)与 IL - 2、IFNγ 和胸腺肽3种免疫制剂共温后 ,分别检测 CD2 +细胞增长率。结果表明 ,健康人 PBMC经 3种药物作用后的 CD2 +细胞增长率高于肿瘤患者 ,而肿瘤患者对该 3种药物的应答能力低下 ,有明显的个体差异。据此认为 ,CD2 +细胞增长试验可用于临床评估患者对拟用免疫制剂的应答能力 ,预测疗效 ,有利于临床对个体合理选用免疫制剂。

艾灸对老年人衰老见证和T细胞亚群的影响

本文采用隔药饼灸，观察了艾灸对老年人衰老见证和外周血Ｔ淋巴细胞及其亚群的影响。结果表明，艾灸不仅可使老年人衰老见证积分值明显下降，且对外周血Ｔ淋巴细胞及其亚群也有一定的调节作用，提示：艾灸可在一定程度上改善老年人的细胞免疫功能，延缓机体的衰老。

小儿急性呼吸道感染C反应蛋白、前白蛋白及白细胞介素-6检测临床评价

目的评价 C-反应蛋白 (CRP)、前白蛋白 (PA)、白细胞介素 - 6 (IL- 6 )在区分小儿急性呼吸道感染病原体中的作用。方法检测急性呼吸道感染患儿 30例及外科无炎症手术患儿 11例血常规和血清中 CRP、PA、IL- 6含量。结果 (1)细菌感染组与对照组相比较 ,CRP明显增高 ,两者差异有显著性 (P<0 .0 1) ,PA明显降低 (P<0 .0 1) ,IL- 6变化不明显。 (2 )病毒感染组与对照组比较 ,CRP、PA、IL- 6差异均无显著性。结论在小儿急性呼吸道感染时 ,血液中 CRP和 PA呈不同程度的变化可藉以鉴别细菌感染 ,但临床上 CRP检测因其快速、简便、准确而更值得推荐。

B淋巴细胞的活化标志及其在慢性肾衰竭的临床意义

目的 以CD2 3分子作为B淋巴细胞活化的标志 ,观察慢性肾衰 (CRF)维持性血液透析 (HD)患者B淋巴细胞激活状态。方法 以金黄色葡萄球菌CowanI株菌体 (SAC)与健康人外周血单个核细胞 (PBMC)数 5 0∶1的比例 ,以终浓度 5 0 μg/L的佛波醇酯 (PMA)分别培养PBMC 12h、2 4h和 5 0h ;用生物素链霉亲和素免疫细胞化学法 (BSA ICC)检测CD2 3 +细胞百分率 ;以速率散射比浊法检测SAC或PMA刺激 5 0h的上清液中IgG水平 ;以双抗体夹心ELASA检测血清可溶性CD2 3 (sCD2 3 )。结果 未经刺激的健康人和CRF HD患者PBMC中CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 6.6± 0 .9) %和 ( 17.9± 3 .7) %差异有显著性 (P <0 .0 1)。健康人PBMC经SAC刺激12h、2 4h、5 0h后CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 8.8± 1.7) %、( 13 .0± 1.6) %和 ( 16.2± 1.9) % ,与无药对照管比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;经PMA刺激 12h、2 4h后CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 17.0± 2 .3 ) %、( 3 1.5± 2 .9) % ,与无药对照管比较差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1) ;经SAC或PMA刺激 5 0h培养上清液IgG含量分别为 ( 9.1± 4.6) g/L和 ( 14.6± 5 .7)g/L ,后者与无药对照管 ( 7.3± 3 .7g/L)差异有显著性 (P <0 .0 1)。健康人和CRF HD患者血清sCD2 3含量分别为 ( 1.8± 0 .

检测党参等中药在体外对人单个核细胞的作用

用生物素链霉亲和素系统 （ Ｂ Ｓ Ａ） 免疫细胞化学法 Ｃ Ｄ２ ＋ 细胞增长实验检出： 党参等５种中药均能促进外周血单个核细胞 Ｃ Ｄ２ ＋ 细胞的增长， 增长率为１１８５ ％ ～１８６９ ％ 。提示党参等几种中药有助于改善免疫功能。 Ｂ Ｓ Ａ 方法简单敏感， 重复性好。