肌肽对血管平滑肌细胞钙化的影响及机制研究

目的:探讨肌肽对β磷酸甘油诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化形成的影响及可能的机制。方法:原代分离和培养大鼠胸主动脉VSMCs,分为对照组(正常培养液)、钙化组(10mMβ-磷酸甘油)和干预组(10mMβ-磷酸甘油和10mM肌肽),连续处理10d。茜素红染色和碱性磷酸酶(ALP)活性测定各组细胞钙化情况,Western Blot测定BMP-2、Runx2、Cleaved-caspase3、β-catenin、GSK-3β(Ser9)的蛋白表达。结果:β-磷酸甘油处理后,VSMCs出现钙化,与对照组比较,钙盐沉积显著增加,碱性磷酸酶活性明显上调,成骨标志物BMP-2、Runx2蛋白表达显著升高;与钙化组比较,肌肽能显著减少钙盐沉积、降低碱性磷酸酶活性,下调BMP-2、Runx2蛋白表达。细胞凋亡结果显示,钙化组Cleaved-caspase3蛋白表达显著上调,肌肽明显降低Cleaved-caspase3水平。信号通路蛋白检测发现,β-磷酸甘油下调GSK-3β(Ser9)蛋白表达,上调β-catenin蛋白表达,肌肽可明显反转这一作用。结论:肌肽可抑制由高磷诱导的VSMCs钙化,其机制可能与抑制β-catenin信号通路调控的成骨因子转录生成和细胞凋亡有关。

大鼠胸主动脉钙化程度与血清多项指标表达的关系

目的 分析血清特征指标表达特征与大鼠胸主动脉钙化程度的相关性。方法 2020年3月-2021年5月,对40只健康大鼠和40只胸主动脉钙化大鼠(根据钙化严重程度分为轻度组25例、中度组7例和重度组8例)进行对照实验研究,比较健康组和模型组大鼠、模型组不同病情大鼠总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、空腹血糖、碱性磷酸酶、全段甲状旁腺激素、白蛋白、血红蛋白、补体成分3、钙离子、磷、肌酐、尿酸、血尿素氮含量的统计学差异。采用SPSS 20.0统计软件,计量资料用均值±标准差表示,两组比较用两独立样本t检验,三组比较用F检验,两两比较用SNK-t检验。结果 模型组总胆固醇(t=11.792,P<0.001)、甘油三酯(t=14.598,P<0.001)、低密度脂蛋白(t=12.217,P<0.001)、碱性磷酸酶(t=42.948,P<0.001)、全段甲状旁腺激素(t=7.277,P<0.001)、补体成分3(t=26.223,P<0.001)含量均高于健康组,模型组的高密度脂蛋白(t=16.116,P<0.001)、白蛋白(t=19.728,P<0.001)、血红蛋白(t=12.846,P<0.001)含量低于健康组,差异均有统计学意义。不同病情大鼠比较,总胆固醇(F=39.778,P<0.001)、甘油三酯(F=13.068,P<0.001)、低密度脂蛋白(F=4.252,P<0.001)、高密度脂蛋白(F=6.213,P<0.001)、全段甲状旁腺激素(F=33.990,P<0.001)、白蛋白(F=10.271,P<0.001)、血红蛋白(F=4.291,P<0.001)、补体成分3(F=160.229,P<0.001)含量的差异均有统计学意义。结论 大鼠胸主动脉钙化程度与多项血清指标血脂指标及相关酶、蛋白、补体均存在一定关联性。