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ERK1/2和p38MAPK在介导CGRP和AngⅡ诱导血管平滑肌细胞Nox1表达中的作用
被引量:
4
1
作者
张晓一
于潇华
+5 位作者
刘玉环
杨丽
王珍
阳芳
秦旭平
曾泗宇
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2017年第1期13-19,共7页
目的:探讨胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)在降钙素基因相关肽(CGRP)和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导血管平滑肌细胞NADPH氧化酶-1(Nox1)表达中的作用。方法:体外培养鼠源性A10血管平滑肌细胞株(A10VSMC),用A...
目的:探讨胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)在降钙素基因相关肽(CGRP)和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导血管平滑肌细胞NADPH氧化酶-1(Nox1)表达中的作用。方法:体外培养鼠源性A10血管平滑肌细胞株(A10VSMC),用Ang Ⅱ或/和CGRP作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot检测ERK1/2和p38MAPK总蛋白和磷酸化蛋白以及Nox1蛋白的表达水平。结果:与对照组和CGRP组相比,Ang Ⅱ在诱导A10VSMC活力和增殖的同时,亦能增加磷酸化ERK1/2和p38MAPK信号激酶和Nox1的表达。CGRP预孵育细胞30 min却能显著抑制Ang Ⅱ诱导的细胞增殖活力、Nox1蛋白、磷酸化ERK1/2和p38MAPK的表达;二苯基碘(DPI)能抑制Ang Ⅱ诱导的细胞增殖、磷酸化p38MAPK及Nox1表达,但不能抑制Ang Ⅱ诱导的ERK1/2磷酸化。p38MAPK阻断剂SB203580不但能抵消Ang Ⅱ诱导的Nox1表达作用,而且能协同CGRP抑制Ang Ⅱ诱导的Nox1表达。而ERK1/2阻断剂PD98059对CGRP和/或Ang Ⅱ诱导Nox1表达作用的影响无统计学意义。结论:Ang Ⅱ诱导A10VSMC增殖与激活Nox1有关,CGRP抑制Ang Ⅱ诱导的Nox1表达,可能主要通过抑制p38MAPK信号途径发挥作用,而与ERK1/2信号途径无显著关系。
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关键词
血管紧张素Ⅱ
降钙素基因相关肽
血管平滑肌细胞
NADPH氧化酶
丝裂原激活蛋白激酶
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职称材料
汉黄芩苷体外抗结肠癌作用及机制研究
被引量:
3
2
作者
李文媛
宋丽华
《中国药物与临床》
CAS
2017年第8期1119-1122,I0001,共5页
目的研究汉黄芩苷对结肠癌细胞和肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法体外培养的结肠癌细胞和肾小球系膜细胞经不同浓度的汉黄芩苷处理后,MTT法检测细胞的存活率,激光共聚焦显微镜观察LoVo细胞的形态学变化...
目的研究汉黄芩苷对结肠癌细胞和肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法体外培养的结肠癌细胞和肾小球系膜细胞经不同浓度的汉黄芩苷处理后,MTT法检测细胞的存活率,激光共聚焦显微镜观察LoVo细胞的形态学变化,流式细胞仪术检测LoVo细胞的凋亡率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测LoVo细胞凋亡相关基因bcl-2、bax的表达情况。结果 MTT检测结果显示,汉黄芩苷对体外培养的结肠癌细胞(CT-26,LoVo,Caco-2)的增殖具有明显的抑制作用,并呈剂量-效应关系,而对正常肾小球系膜细胞的毒性较小;明场和荧光图像显示汉黄芩苷作用后LoVo细胞出现明显的凋亡特征;流式细胞仪分析显示汉黄芩苷可以诱导LoVo细胞发生凋亡;RT-PCR检测结果显示汉黄芩苷可抑制LoVo细胞中bcl-2 mRNA的表达,促进bax mRNA的表达。结论汉黄芩苷可以显著抑制结肠癌细胞的增殖并诱导其凋亡,而对正常细胞影响较小,其机制可能与抗凋亡基因bcl-2表达下调,促凋亡基因bax表达上调有关。
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关键词
汉黄芩苷
结肠肿瘤
细胞增殖
细胞凋亡
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职称材料
二甲双胍逆转卵巢癌细胞对紫杉醇耐药性的研究
3
作者
霍静
黄燕
+2 位作者
宋少娟
刘丰其
宋丽华
《长治医学院学报》
2017年第3期161-165,共5页
目的:探讨二甲双胍对卵巢癌耐药细胞A2780/Taxol紫杉醇耐药性的逆转作用及可能的机制。方法:实验分为对照组和二甲双胍作用组(10mM、20mM、30mM)。药物作用48h后,使用CCK-8法检测细胞A2780/Taxol的增殖;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;...
目的:探讨二甲双胍对卵巢癌耐药细胞A2780/Taxol紫杉醇耐药性的逆转作用及可能的机制。方法:实验分为对照组和二甲双胍作用组(10mM、20mM、30mM)。药物作用48h后,使用CCK-8法检测细胞A2780/Taxol的增殖;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞的迁移能力;流式细胞术检测细胞内Rh123的积累;蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3及Bcl-2蛋白的表达。结果:二甲双胍抑制细胞A2780/Taxol的增殖,实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);实验组细胞染色质凝集,细胞凋亡率增高(P<0.05);细胞的迁移能力下降,实验组与对照组差异明显(P<0.05);10mM、20mM组细胞内Rh123累积量增加,与对照组差异明显(P<0.05);凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达下降。结论:二甲双胍可能通过上调cleaved Caspase-3表达、下调Bcl-2蛋白表达,启动线粒体内源性凋亡途径来逆转卵巢癌细胞A2780/Taxol对紫杉醇的耐药性。
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关键词
卵巢癌
耐药性
二甲双胍
细胞凋亡
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职称材料
慢病毒载体介导hTERT对肝细胞生物学特性的影响
4
作者
郭伟
李文媛
《长治医学院学报》
2011年第4期244-247,共4页
目的:研究慢病毒介导人端粒酶逆转录酶(h-TERT)基因对人张氏肝细胞(chang liver)生物学特性的影响。方法:将表达h-TERT基因的重组慢病毒感染人张氏肝细胞,通过杀稻瘟筛选获得阳性克隆。分别采用实时荧光RT-PCR、TRAP-PCR及ELISA方法检...
目的:研究慢病毒介导人端粒酶逆转录酶(h-TERT)基因对人张氏肝细胞(chang liver)生物学特性的影响。方法:将表达h-TERT基因的重组慢病毒感染人张氏肝细胞,通过杀稻瘟筛选获得阳性克隆。分别采用实时荧光RT-PCR、TRAP-PCR及ELISA方法检测转染前后chang liver细胞的h-TERT-mRNA水平和端粒酶活性的变化。通过MTT法、流式细胞术(FCM)观察其形态变化及生长增殖情况。结果:转染后的chang liver细胞存在h-TERT基因过表达和端粒酶活性上调,体外培养条件下维持肝细胞原有形态,存活期显著延长,增殖能力较强。结论:外源性h-TERT基因的异位表达不仅上调chang liver细胞的端粒酶活性,而且促进其增殖。
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关键词
慢病毒
端粒酶
h-TERT基因
肝细胞
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职称材料
香叶木素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用
被引量:
1
5
作者
雷静文
郭小莉
+5 位作者
宋丽华
张晓京
张晓一
毋亚男
刘芳
张菊红
《中国临床药理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第22期2679-2683,共5页
目的探索香叶木素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)暴露于30 mmol·L^(-1)高葡萄糖(HG)中48 h,建立高糖诱导的血管内皮细胞损伤模型。将模型细胞分为模型组(30 mmol·L^(-1)...
目的探索香叶木素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)暴露于30 mmol·L^(-1)高葡萄糖(HG)中48 h,建立高糖诱导的血管内皮细胞损伤模型。将模型细胞分为模型组(30 mmol·L^(-1) HG干预48 h)和低、中、高3个浓度香叶木素处理组(30 mmol·L^(-1) HG干预48 h+5,10,20 mmol·L^(-1)香叶木素处理24 h)。处理结束后噻唑蓝法检测各细胞活力;相关试剂盒检测各组中一氧化氮(NO),乳酸脱氢酶(LDH)和活性氧(ROS)水平;流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平;免疫荧光观察自噬标志物微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)和细胞色素c氧化酶亚基IV(COXIV)的共定位比例;蛋白质印迹法测量Yes相关蛋白(YAP)、戴帽蛋白肌Z系Β(CAPZB)和B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达水平。结果对照组、模型组和低、中、高3个浓度实验组的细胞活性分别为(100.00±2.43)%,(25.12±1.19)%,(28.34±1.32)%,(45.45±2.68)%,(66.93±2.51)%,(89.46±2.89)%;这5组细胞凋亡率分别为(5.23±0.38)%,(19.41±1.17)%,(13.38±0.84)%,(10.12±0.46)%,(6.15±0.25)%;这5组免疫荧光共定位比例分别为(100.45±2.39)%,(25.31±1.22)%,(24.48±1.17)%,(50.56±1.88)%,(76.28±1.91)%;这5组ROS水平的分别为(100.36±2.59)%,(452.62±14.23)%,(386.27±16.31)%,(267.33±11.37)%,(220.42±12.25)%;这5组YAP蛋白表达水平分别为(100.21±2.17)%,(25.45±1.28)%,(43.36±1.44)%,(60.39±1.53)%,(71.33±3.06)%;这5组CAPZB蛋白表达水平分别为(100.48±2.51)%,(24.13±1.07)%,(35.05±1.38)%,(47.36±2.49)%,(71.42±3.75)%;这5组Bax蛋白表达水平分别为(100.16±1.08)%,(368.73±3.69)%,(271.54±2.47)%,(184.58±1.86)%,(122.47±7.82)%。上述指标,模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);不同浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论香叶木素可通过激活YAP信号通路减轻HG诱导的HUVEC损伤。
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关键词
香叶木素
Yes相关蛋白信号通路
高糖
血管内皮细胞
细胞凋亡
保护作用
原文传递
题名
ERK1/2和p38MAPK在介导CGRP和AngⅡ诱导血管平滑肌细胞Nox1表达中的作用
被引量:
4
1
作者
张晓一
于潇华
刘玉环
杨丽
王珍
阳芳
秦旭平
曾泗宇
机构
长治医学院药学系药理教研室
南华大学药物
药理
研究所血管生物学实验室
广东省第二人民医院药物临床试验基地
出处
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2017年第1期13-19,共7页
基金
国家自然科学基金(30572192
81173060)
广东省自然科学基金(2015A030310076)
文摘
目的:探讨胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)在降钙素基因相关肽(CGRP)和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导血管平滑肌细胞NADPH氧化酶-1(Nox1)表达中的作用。方法:体外培养鼠源性A10血管平滑肌细胞株(A10VSMC),用Ang Ⅱ或/和CGRP作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot检测ERK1/2和p38MAPK总蛋白和磷酸化蛋白以及Nox1蛋白的表达水平。结果:与对照组和CGRP组相比,Ang Ⅱ在诱导A10VSMC活力和增殖的同时,亦能增加磷酸化ERK1/2和p38MAPK信号激酶和Nox1的表达。CGRP预孵育细胞30 min却能显著抑制Ang Ⅱ诱导的细胞增殖活力、Nox1蛋白、磷酸化ERK1/2和p38MAPK的表达;二苯基碘(DPI)能抑制Ang Ⅱ诱导的细胞增殖、磷酸化p38MAPK及Nox1表达,但不能抑制Ang Ⅱ诱导的ERK1/2磷酸化。p38MAPK阻断剂SB203580不但能抵消Ang Ⅱ诱导的Nox1表达作用,而且能协同CGRP抑制Ang Ⅱ诱导的Nox1表达。而ERK1/2阻断剂PD98059对CGRP和/或Ang Ⅱ诱导Nox1表达作用的影响无统计学意义。结论:Ang Ⅱ诱导A10VSMC增殖与激活Nox1有关,CGRP抑制Ang Ⅱ诱导的Nox1表达,可能主要通过抑制p38MAPK信号途径发挥作用,而与ERK1/2信号途径无显著关系。
关键词
血管紧张素Ⅱ
降钙素基因相关肽
血管平滑肌细胞
NADPH氧化酶
丝裂原激活蛋白激酶
Keywords
angiotensin II
calcitonin gene re-lated peptide
vascular smooth muscle cell
Nox
MAPK
分类号
R965.2 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
汉黄芩苷体外抗结肠癌作用及机制研究
被引量:
3
2
作者
李文媛
宋丽华
机构
长治医学院药学系药理教研室
出处
《中国药物与临床》
CAS
2017年第8期1119-1122,I0001,共5页
基金
长治医学院科技创新团队支持项目(CX201413)
文摘
目的研究汉黄芩苷对结肠癌细胞和肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法体外培养的结肠癌细胞和肾小球系膜细胞经不同浓度的汉黄芩苷处理后,MTT法检测细胞的存活率,激光共聚焦显微镜观察LoVo细胞的形态学变化,流式细胞仪术检测LoVo细胞的凋亡率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测LoVo细胞凋亡相关基因bcl-2、bax的表达情况。结果 MTT检测结果显示,汉黄芩苷对体外培养的结肠癌细胞(CT-26,LoVo,Caco-2)的增殖具有明显的抑制作用,并呈剂量-效应关系,而对正常肾小球系膜细胞的毒性较小;明场和荧光图像显示汉黄芩苷作用后LoVo细胞出现明显的凋亡特征;流式细胞仪分析显示汉黄芩苷可以诱导LoVo细胞发生凋亡;RT-PCR检测结果显示汉黄芩苷可抑制LoVo细胞中bcl-2 mRNA的表达,促进bax mRNA的表达。结论汉黄芩苷可以显著抑制结肠癌细胞的增殖并诱导其凋亡,而对正常细胞影响较小,其机制可能与抗凋亡基因bcl-2表达下调,促凋亡基因bax表达上调有关。
关键词
汉黄芩苷
结肠肿瘤
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
Upiegukition of wogonoside
Colonic neoplasms
Cell proliferation
Apoptosis
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
二甲双胍逆转卵巢癌细胞对紫杉醇耐药性的研究
3
作者
霍静
黄燕
宋少娟
刘丰其
宋丽华
机构
长治
医学院
基础
医学
部生物学
教研室
长治
医学院
基础
医学
部生化
教研室
长治
医学院
基础
医学
部
长治医学院药学系药理教研室
出处
《长治医学院学报》
2017年第3期161-165,共5页
基金
长治医学院科技创新团队(CX201413)
长治医学院科技启动基金项目(QDZ201501)
文摘
目的:探讨二甲双胍对卵巢癌耐药细胞A2780/Taxol紫杉醇耐药性的逆转作用及可能的机制。方法:实验分为对照组和二甲双胍作用组(10mM、20mM、30mM)。药物作用48h后,使用CCK-8法检测细胞A2780/Taxol的增殖;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞的迁移能力;流式细胞术检测细胞内Rh123的积累;蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3及Bcl-2蛋白的表达。结果:二甲双胍抑制细胞A2780/Taxol的增殖,实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);实验组细胞染色质凝集,细胞凋亡率增高(P<0.05);细胞的迁移能力下降,实验组与对照组差异明显(P<0.05);10mM、20mM组细胞内Rh123累积量增加,与对照组差异明显(P<0.05);凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达下降。结论:二甲双胍可能通过上调cleaved Caspase-3表达、下调Bcl-2蛋白表达,启动线粒体内源性凋亡途径来逆转卵巢癌细胞A2780/Taxol对紫杉醇的耐药性。
关键词
卵巢癌
耐药性
二甲双胍
细胞凋亡
Keywords
ovarian cancer
drug- resistance
met formin
apoptosis
分类号
R737 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
慢病毒载体介导hTERT对肝细胞生物学特性的影响
4
作者
郭伟
李文媛
机构
长治
医学院
附属和济医院普外二科
长治医学院药学系药理教研室
出处
《长治医学院学报》
2011年第4期244-247,共4页
文摘
目的:研究慢病毒介导人端粒酶逆转录酶(h-TERT)基因对人张氏肝细胞(chang liver)生物学特性的影响。方法:将表达h-TERT基因的重组慢病毒感染人张氏肝细胞,通过杀稻瘟筛选获得阳性克隆。分别采用实时荧光RT-PCR、TRAP-PCR及ELISA方法检测转染前后chang liver细胞的h-TERT-mRNA水平和端粒酶活性的变化。通过MTT法、流式细胞术(FCM)观察其形态变化及生长增殖情况。结果:转染后的chang liver细胞存在h-TERT基因过表达和端粒酶活性上调,体外培养条件下维持肝细胞原有形态,存活期显著延长,增殖能力较强。结论:外源性h-TERT基因的异位表达不仅上调chang liver细胞的端粒酶活性,而且促进其增殖。
关键词
慢病毒
端粒酶
h-TERT基因
肝细胞
Keywords
Lentivirus
Telomerase
h-TERT gene
Hepatocyte
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
香叶木素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用
被引量:
1
5
作者
雷静文
郭小莉
宋丽华
张晓京
张晓一
毋亚男
刘芳
张菊红
机构
长治医学院药学系药理教研室
长治
医学院
药学系
生药
教研室
长治
医学院
药食同源功能食品山西省重点实验室
江苏康缘药业股份有限公司
山东新华鲁抗医药有限公司
出处
《中国临床药理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第22期2679-2683,共5页
基金
山西省卫生计生科研基金资助项目(2017158)。
文摘
目的探索香叶木素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)暴露于30 mmol·L^(-1)高葡萄糖(HG)中48 h,建立高糖诱导的血管内皮细胞损伤模型。将模型细胞分为模型组(30 mmol·L^(-1) HG干预48 h)和低、中、高3个浓度香叶木素处理组(30 mmol·L^(-1) HG干预48 h+5,10,20 mmol·L^(-1)香叶木素处理24 h)。处理结束后噻唑蓝法检测各细胞活力;相关试剂盒检测各组中一氧化氮(NO),乳酸脱氢酶(LDH)和活性氧(ROS)水平;流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平;免疫荧光观察自噬标志物微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)和细胞色素c氧化酶亚基IV(COXIV)的共定位比例;蛋白质印迹法测量Yes相关蛋白(YAP)、戴帽蛋白肌Z系Β(CAPZB)和B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达水平。结果对照组、模型组和低、中、高3个浓度实验组的细胞活性分别为(100.00±2.43)%,(25.12±1.19)%,(28.34±1.32)%,(45.45±2.68)%,(66.93±2.51)%,(89.46±2.89)%;这5组细胞凋亡率分别为(5.23±0.38)%,(19.41±1.17)%,(13.38±0.84)%,(10.12±0.46)%,(6.15±0.25)%;这5组免疫荧光共定位比例分别为(100.45±2.39)%,(25.31±1.22)%,(24.48±1.17)%,(50.56±1.88)%,(76.28±1.91)%;这5组ROS水平的分别为(100.36±2.59)%,(452.62±14.23)%,(386.27±16.31)%,(267.33±11.37)%,(220.42±12.25)%;这5组YAP蛋白表达水平分别为(100.21±2.17)%,(25.45±1.28)%,(43.36±1.44)%,(60.39±1.53)%,(71.33±3.06)%;这5组CAPZB蛋白表达水平分别为(100.48±2.51)%,(24.13±1.07)%,(35.05±1.38)%,(47.36±2.49)%,(71.42±3.75)%;这5组Bax蛋白表达水平分别为(100.16±1.08)%,(368.73±3.69)%,(271.54±2.47)%,(184.58±1.86)%,(122.47±7.82)%。上述指标,模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);不同浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论香叶木素可通过激活YAP信号通路减轻HG诱导的HUVEC损伤。
关键词
香叶木素
Yes相关蛋白信号通路
高糖
血管内皮细胞
细胞凋亡
保护作用
Keywords
diosmetin
Yes-associated protein signaling pathway
high glucose
vascular endothelial cell
apoptosis
protective effect
分类号
R28 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
ERK1/2和p38MAPK在介导CGRP和AngⅡ诱导血管平滑肌细胞Nox1表达中的作用
张晓一
于潇华
刘玉环
杨丽
王珍
阳芳
秦旭平
曾泗宇
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2017
4
下载PDF
职称材料
2
汉黄芩苷体外抗结肠癌作用及机制研究
李文媛
宋丽华
《中国药物与临床》
CAS
2017
3
下载PDF
职称材料
3
二甲双胍逆转卵巢癌细胞对紫杉醇耐药性的研究
霍静
黄燕
宋少娟
刘丰其
宋丽华
《长治医学院学报》
2017
0
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职称材料
4
慢病毒载体介导hTERT对肝细胞生物学特性的影响
郭伟
李文媛
《长治医学院学报》
2011
0
下载PDF
职称材料
5
香叶木素对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用
雷静文
郭小莉
宋丽华
张晓京
张晓一
毋亚男
刘芳
张菊红
《中国临床药理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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