培养条件对HBsAg转基因人参细胞的生长及表达量的影响

目的研究培养条件对HBsAg转基因人参细胞生长及HBsAg表达量的影响。方法通过单因子实验,分别考察碳源、氮源、有机成分对HBsAg转基因人参细胞生长和HBsAg表达量的影响,并通过不同组合实验,探索氮源浓度、有机成分和起始pH的最佳组合。结果在3%蔗糖、10mmol/L氮源、0·25%乳清蛋白和起始pH6·2的情况下,细胞生长量略有增加,HBsAg的表达量增加1倍。结论通过改善培养条件,可以提高HBsAg转基因人参细胞的生长速度和抗原表达量。

α_(2a)型基因工程干扰素发酵工艺的研究

对干扰素工程菌PBV32 0 / 7118 α2a型发酵工艺 ,由批式培养改为反馈式流加培养〔1〕 可显著提高工程菌PBV32 0 / 7118 α2a在

α2a型基因工程干扰素发酵工艺的改进

应用自行设计的适宜PBV320／7118－α2a工程菌发酵的程序控制和“流加式”培养方法，各连续培养了3批工程菌，产量提高1倍以上，干扰素表达量提高1～3倍。该工艺稳定、简便、省时、省力。

分泌型重组人生长激素工程菌的高密度发酵

目的 研究葡萄糖剂补加策略 ,以获得大肠杆菌的高密度发酵和人生长激素 (HGH)的高表达。方法 采用批式发酵和补料批式发酵方式 ,葡萄糖的补加采用逐渐增加的方式 ,包括pH、DO和浓度控制。结果 获得HGH的表达量为 30 0mg/L ,光密度达到 12 4(A60 0 )。结论 在大肠杆菌中表达异源蛋白时 ,葡萄糖的补加方式是关键因素 。

离子凝聚法制备负载流感疫苗的壳聚糖微球

采用三聚磷酸钠(TPP)作为离子交联剂,应用离子凝聚法制备负载流感疫苗的壳聚糖微球.筛选出壳聚糖起始质量分数为1%.TPP的浓度对壳聚糖微球的制备影响较大,采用低浓度的TPP(200μg/mL)制备的微球放置过夜均出现沉淀现象,高浓度的TPP(800μg/mL)在制备过程中出现絮状沉淀.固化比影响微球的释放行为,固化比为1∶1的微球爆炸式释放率达到90%,固化比为1∶3的微球6 h后逐步释放,12 h后释放率达到95%.固化比为1∶5的微球6 h后没有明显的释放行为.壳聚糖溶液的pH对微球的制备和释放没有显著的影响.通过对负载流感疫苗的壳聚糖微球的制备条件和释放行为的研究结果表明,pH=5.6的壳聚糖溶液,固化比为1∶3,TPP的质量浓度为400μg/mL是较理想的流感疫苗壳聚糖微球的制备条件.

当归与白芷水煎提取液杀菌效果的试验观察

将中药当归、白芷的水煎提取液混匀制成消毒液。以原液浓度为 10 0 % ,使用时加蒸馏水稀释。用悬液定量杀菌试验法检测其杀菌效果。以其 1 2 %溶液对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌作用 1 0min ,杀灭率均达 99 9%以上。当有 5%小牛血清存在时 ,其杀菌效果明显下降。

肝硬化患者血管紧张素Ⅱ-RIA水平与门脉血流动力学的关系

目的 :探讨肝硬化门脉高 (PTH)的血流动力学变化及其与血中AT Ⅱ的关系。方法 :4 8例肝硬化PTH患者 (代偿期 18例、失代偿期 30例 )及 32例正常人作为研究对象 ,应用双功能多普勒测定门、脾静脉血流量 (PVBF&SVBF) ,同步测定血中AT Ⅱ的水平 ,并分析PVBF&SVBF与AT Ⅱ的相关性。结果 :门脉系统高血流动力学改变存在于肝硬化PTH发病的始终 ,代偿期显著下降的AT Ⅱ与门脉高血流动力学变化无相关性 ,失代偿期显著升高的AT Ⅱ与门脉高血流动力变化呈正相关。结论 :此研究对临床诊治有指导意义。

浅谈掌握医患沟通技巧在减少医院医疗纠纷中的作用

医院是和谐社会的一个窗口,和谐的医患关系是构建和谐医院、和谐社会的关键。随着社会发展和生活水平的提高,人们对身心健康的要求以及对医务人员的良好服务的期望值不断提高。随着医学模式的转变以及心理学、社会学、行为学研究的不断深入,患者自我保护意识的不断增强，医疗纠纷的发生也呈上升趋势。

重组人干扰素α2_a发酵工艺的研究

对干扰素工程菌ＰＢＶ３２０／７１１８－α２ａ型发酵工艺，由批式培养改为反馈式流加培养［１］可显著提高工程菌ＰＢＶ３２０／７１１８－α２ａ在４０Ｌ发酵罐中的菌体产量及干扰素的表达水平。

做好门诊病人的心理特点分析构建和谐的医患关系

随着社会的进步,医学模式的改变,和谐的医患关系在医疗人际关系中显得更为重要,在医疗过程中占有十分突出的位置。和谐的医患关系是一切医疗活动的基础[1]。加强医患沟通是防范医疗纠纷的最主要的措施之一。构建和谐的医患关系有利于医院正常医疗活动的开展,有利于医学事业的发展。

亚甲基兰法检测人白介素-2(rhIL-2)活性

用亚甲基兰法、3 H TdR掺入法和MTT法 3种方法对 2 0批检品重组人白介素 2 (rhIL 2 )活性进行检测 ,结果差异不显著 ( p >0 .0 5)。与3 H -TdR掺入法和MTT法相比较 ,亚甲基兰法具有经济、快捷、对操作者无损害和对环境无污染等特点 ,是一种值得采用的重组人白介素 2活性检测方法 ,适合重组人白介素 2生产过程中中间品的质量监控。

钢丝网架EPS外保温复合墙体裂缝及结露问题的对策

通过对节能复合保温墙体裂缝及结露这一问题的关注,希望引起建筑施工技术及质检人员的足够重视,加强质量管理,确保工程质量.同时,分别从墙体刚度、室内外温差、材料及施工工艺等方面进行了原因分析,总结了工程施工中常采用的处理方法.通过实践检验,对控制节能复合保温墙体裂缝及结露问题具有较为实用价值.

外用重组人干扰素α2a凝胶剂研究

研究重组人干扰素α2a凝胶剂以应用于临床。重组人干扰素α2a以卡波普940NF为基质,加入保湿剂、保护剂、防腐剂制成外用凝胶,用于治疗单纯疱疹、带状疱诊、尖锐湿疣等病毒性皮肤病。稳定性试验结果表明,4℃保存有效期可达2a;药效学试验表明,rhIFNα2a(20万IU/g)对HSVⅠ病毒抑制效价>103.0,HSVⅡ病毒抑制效价>104.0;毒理学试验表明,该品对皮肤无毒,无刺激性,无红斑、水肿现象。临床试验结果表明,重组人干扰素α2a凝胶剂可应用于临床治疗单纯疱疹及预防尖锐湿疣的复发。

低剂量电离辐射对糖尿病小鼠肾脏ICAM-1 mRNA和蛋白表达的影响

目的:研究低剂量电离辐射(LDR)对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(DM)小鼠肾脏细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及蛋白表达的影响,阐明LDR抗炎作用可能是其治疗糖尿病的主要机制。方法:选取健康适龄C57BL/6J小鼠,分为4组(对照、DM、LDR和DM/LDR组)。其中DM与DM/LDR组经腹腔注射STZ,建立DM模型,另2组给予等量枸橼酸溶液。造模后DM/LDR与LDR组给予25mGy隔日照射,共照射4周。在照射后2、4、8、12及16周,利用RT-PCR及Westernblotting方法检测其肾脏ICAM-1mRNA及蛋白表达。结果:小鼠造模后照射前各组肾脏总ICAM-1mRNA及蛋白表达差异无显著性(P>0.05)。给予LDR2周时DM组肾脏ICAM-1mRNA及蛋白表达显著高于其他3组(P<0.05)。照射后4周时DM/LDR组ICAM-1mRNA表达水平明显高于非DM组(P<0.05),但仍显著低于DM组,这种差异一直保持到照后16周。而LDR组其表达水平显著高于对照组(P<0.05)。免疫组织化学检测:与非DM组比较,DM组小鼠肾小球、肾小管结构异常,且阳性细胞染色数量明显增多。但DM/LDR组肾小球肾小管损伤较DM组有所减轻,且阳性细胞数量显著少于DM组。结论:在糖尿病状态下LDR能有效降低ICAM-1mRNA及蛋白表达水平,缓解肾脏的炎症反应;在正常机体LDR可提高免疫力,促进免疫相关因子释放,提示LDR视机体所处不同状态发挥不同的调节功能。

重组人碱性成纤维细胞生长因子工程菌高密度发酵及表达产物的纯化

目的 研究重组人碱性成纤维细胞生长因子工程菌高密度发酵和表达产物的纯化工艺。方法采用最适基质浓度、pH、溶氧量、培养温度等发酵表达条件及产物提纯方法。结果 菌体密度A6000达40.8,表达量达160mg/L。提纯的bFGF回收率为40％,生物学活性（ED50）为 0.21ng/mL,比活性达4.76×106U/mg,其纯度、分子量、残余DNA等各项检测结果均符合“重组 DNA制品质量控制要点”。结论 为hbFGF工业化生产和临床应用提供了依据。

HPLC法测定小儿白贝止咳糖浆中原阿片碱的含量

目的:采用高效液相色谱法测定小儿白贝止咳糖浆中原阿片碱的含量。方法:色谱柱:Bonchrom C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.4%磷酸(20:80);检测波长:289 nm。结果:原阿片碱进样量在0.087～0.870μg范围内,呈良好的线性关系(r=0.999 9)。平均加样回收率为98.8%,RSD=0.84%(n=6)。结论:方法易于操作,结果准确,重复性良好,可用于小儿白贝止咳糖浆的质量控制。

bFGF活性稳定性的研究

目的 :研究bFGF的生物活性稳定性。方法 :通过在不同稳定剂中 ,改变bFGF与肝素钠结合的比例 ,经MTT法检测bFGF生物活性。结果 :以甘露醇、甘油和人血白蛋白作稳定剂时 ,bFGF与肝素钠的最佳结合比例为 3∶1;以海藻糖作稳定剂时 ,bFGF与肝素钠的最佳结合比例为 1∶1;以右旋糖苷作稳定剂时 ,bFGF与肝素钠的最佳结合比例为 2∶1。以右旋糖苷作稳定剂最好 ,以甘露醇、甘油和人血白蛋白作稳定剂较好 ,以海藻糖作稳定剂稍差。结论 :配方中有肝素钠存在可明显提高bFGF的生物活性。

冻干重组碱性成纤维细胞生长因子无人血清白蛋白保护剂的研究

目的在冻干重组碱性成纤维细胞生长因子制剂中引入一种无人血清白蛋白保护剂。方法采用 3种药用辅料按一定比例配制保护剂。结果加入无人血清白蛋白保护剂的 3批供试品 ,成品各项检查均合格。生物效价在 (40± 2 )℃、(2 5± 2 )℃、2℃～ 8℃保存分别达 6、12、3 0个月。

表达酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)工程菌的培养及aFGF的纯化

目的 从大肠杆菌中大规模纯化aFGF。方法 建立aFGF发酵和纯化工艺 ,连续大量纯化 9批 ,并对纯品进行全面鉴定。结果 建立了稳定的发酵和纯化工艺流程 ,采用IPTG诱导表达的haFGF ,其表达量为2 0 8mg L ,经离子交换及肝素亲合层析后得到的aFGF纯品 ,SDS PAGE纯度达 98.8%。比活性为 2 .5× 10 5U mg ,所有检测指标均符合 2 0 0 0版《中国生物制品规程》 ,适宜产业化生产。结论 成功纯化符合规程要求的aFGF纯品。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子纯化工艺的研究

对大肠杆菌表达的重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)进行了纯化工艺的研究。 3批纯化后的终产品经SDS PAGE检测 ,其纯度为 99.3% ,经HPLC(高效液相 )检测 ,其纯度为 10 0 % ,分子质量为 17.8ku ,其平均比活性为 2 .8× 10 6AU/mg ,其表达量为 97.5mg/ml.。