干扰LncRNA BCYRN1对乳腺癌MCF-7细胞增殖、运动和移植瘤生长的影响

目的探讨短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰长链非编码RNA BCYRN1(long noncoding RNA BCYRN1,LncRNA BCYRN1)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、运动及移植瘤生长的影响。方法实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测乳腺癌及癌旁组织BCYRN1表达,将乳腺癌MCF-7细胞分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)和干扰组(sh-BCYRN1),通过试剂盒转染转入目的片段并进行RT-PCR验证,Edu法、transwell法、划痕实验和蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测细胞增殖、侵袭、迁移能力及其相关蛋白表达,免疫荧光检测细胞波形蛋白(Vimentin)水平。通过裸鼠腋下注射MCF-7细胞建立裸鼠移植瘤模型,待成瘤后将裸鼠分为空白对照组、干扰组,每组各20只,干扰组、空白对照组裸鼠分别给予sh-BCYRN1及其阴性对照转染干预,观察4周后移植瘤BCYRN1表达、肿瘤重量和Ki67、N-钙粘蛋白(N-cadherin)蛋白表达。结果乳腺癌组织BCYRN1表达高于癌旁组织(P<0.05)。比较空白对照组,干扰组Edu阳性细胞百分比、单个视野细胞侵袭数目、细胞迁移率、Vimentin阳性率降低(P<0.05),Ki67、N-cadherin蛋白表达降低,E-钙粘蛋白(E-cadherin)蛋白表达升高(P<0.05)。干扰组移植瘤BCYRN1表达降低,肿瘤质量、Ki67及N-cadherin蛋白表达低于空白对照组移植瘤(P<0.05)。结论shRNA干扰LncRNA BCYRN1可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、运动和移植瘤生长。

姜黄素对子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖、侵袭能力及相关蛋白的影响

目的探究姜黄素对子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖、侵袭能力及相关蛋白的影响。方法低、中、高剂量实验组及对照组子宫内膜癌HEC-1-B细胞分别以30、60、120μmol·L^-1姜黄素处理,各组分别处理24、36、48 h,噻唑蓝(MTT)法检测HEC-1-B细胞增殖抑制情况;Transwell小室实验检测HEC-1-B细胞侵袭能力;蛋白免疫印迹(WB)法检测HEC-1-B细胞基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、MMP-9)及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达情况。结果低、中、高剂量实验组HEC-1-B细胞增殖抑制率均随着姜黄素作用浓度增大及作用时间延长呈逐渐升高趋势,侵袭细胞数量、侵袭率及MMP-2、MMP-9及Cyclin D1蛋白相对表达量均随姜黄素作用浓度增大呈逐渐降低趋势,且均低于对照组,两两之间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论姜黄素可有效抑制子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖,降低其侵袭能力,同时有效抑制MMP-2、MMP-9及Cyclin D1蛋白的表达,发挥抗子宫内膜癌作用。