布鲁氏菌引起的巨噬细胞依赖性树突状细胞迁移与免疫应答

目的:研究阴道巨噬细胞清除后小鼠对布鲁氏菌疫苗的免疫应答机制。方法:BALB/c小鼠60只随机分为3组,每组20只,实验组小鼠阴道内滴注脂质体包裹的clodronate以清除阴道巨噬细胞,3d后阴道滴注10μL布鲁氏菌疫苗(含6×108个布鲁氏菌)。同时设空脂质体对照组(不含clo-dronate)和PBS对照组。依次在12、24、36、72h收集小鼠阴道、髂内淋巴结和血液。采用免疫组织化学染色法观察阴道巨噬细胞清除效果和树突状细胞(DC)的迁移,并用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的含量。收集小鼠腹腔液制备巨噬细胞进行细胞培养,1.2×106个巨噬细胞中加入布鲁氏菌疫苗10μL,于不同时间点对巨噬细胞进行姬姆萨染色,观察巨噬细胞的变化。结果:清除巨噬细胞组小鼠接种布鲁氏菌疫苗后,髂内淋巴结中S-100阳性DC数量没有明显的变化,IFN-γ和IL-4的含量也没有明显的升高。非清除组中,不同的时间点,髂内淋巴结中S-100阳性DC明显增多,与PBS对照组相比,IFN-γ含量显著增高,而IL-4则没有明显变化。体外巨噬细胞负载布鲁氏菌疫苗发现,随着时间的延长,巨噬细胞吞噬布鲁氏菌逐渐增多,在12h,巨噬细胞开始出现坏死性凋亡。结论:小鼠在对布鲁氏菌疫苗的免疫应答中,DC的迁移是巨噬细胞依赖性的,并且这种依赖性有可能是由布鲁氏菌抗原成分在细胞间间接传递引起的。