携带不同HBV抗原基因片段的重组腺相关病毒转染树突状细胞诱导CTL的效应研究

目的了解携带不同HBV抗原基因片段的重组腺相关病毒(rAAV-HBV-S、C、E、X)转染慢性乙型肝炎患者来源的树突状细胞(DC)诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的效应。方法采用携带不同HBV抗原基因片段的rAAV-HBV-S、C、E、X转染慢性乙型肝炎患者外周血中分离出的单核细胞,并在GM-CSF、IL-4和TNF-α作用下继续培养7d获得成熟的DC。通过观察DC的状态和流式细胞仪(FACS)检测各段HBV转染后DC分化抗原(CD)的表达,评价其成熟与功能。将同一个体的DC与T细胞混合培养制备CTL,通过四甲基偶氮唑盐(MTS)细胞杀伤实验研究被激活的CTL对HBV感染的靶细胞HepG2.2.15特异性的细胞毒作用。结果不同HBV抗原基因rAAV-HBV-S、C、E、X转染DC后CD14、CD80、CD83、CD86的表型表达中,CD80、CD83差异有统计学意义(P<0.05);rAAV/HBV-X转染的DC其CD80表达最高,rAAV/HBV-S转染的DC其CD83表达最高。转染不同HBV抗原基因片段rAAV(S、C、E、X)的DC诱导的CTL对MHC-Ⅰ类抗原阳性且有HBV的靶细胞(HepG2.2.15)的特异性杀伤效率显著高于对无HBV的靶细胞(HepG2)的非特异性杀伤效应(P<0.01),但不同rAAV-HBV组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rAAV-HBV-S、C、E、X转染DC均可诱导CTL引起MHC-Ⅰ依赖的特异性细胞毒效应。

美国医学院临床前期课程改革现状及趋势

为了使医学院校培养的学生能更好地满足 2 1世纪社会对医师的要求 ,美国医学院协会选定 2 3所医学院校作为实施医学院培养目标研究的基地。在这些医学院校新一轮的教学改革中 ,教学改革的重点为临床前期课程改革。主要做法为临床前期以学科综合课程为主 ,加强基础与临床的结合 ,临床前期教学大量溶入临床内容 。

酒精对脑组织及胶质细胞白细胞介素-1α基因表达的影响

为了阐明酒精中毒对神经系统损害的机理，用新生CD大鼠酒精中毒模型及原代培养的神经小胶质细胞作为研究对象，用RT－PCR的方法测定酒精中霉对脑组织及体外培养细胞中IL－1α基因水平的改变作用。结果显示：酒精持续染毒11d后，大脑皮层、小脑、海马、纹状体及丘脑组织中的IL－1α基因表达都有不同程度的增加，其中海马增加程度最为明显，是对照组的2．5倍；酒精对基底神经节组织IL－1α基因表达无影响。酒精也使体外培养的小胶质细胞在染毒24h后IL－1α基因表达量开始升高，72h达到高的。体内及体外实验均表明：酒精中毒时IL－1α的基因表达水平增加，继而调控神经和免疫功能，并可能在酒们导致的大脑神经损伤中起重要的作用。

隐马尔可夫模型在生物学和医学研究中的应用

马尔可夫过程（Markov process）是具马尔可夫特性即无记忆性（memorylessness）又称无后效性（non-aftereffect）的随机过程,其未来状态的条件概率仅与系统的当前状态（或此前的少数若干个历史状态）有关,

PPARγ的分子生物学及其作用

PPARγ是一种能调控参与脂肪细胞分化，脂质储存，胰岛素敏感的一大类基因表达的核受体，它能与其天然配基，如前列腺素J2，脂肪酸衍生物结合并被其活化，合成的配基：thiazolidinediones及非甾体类抗炎性药物是PPARγ的拮抗剂，最近的研究表明，这种核受体在调节糖尿病及肥胖的代谢，细胞周期调控，癌基因，炎症及动脉粥样硬化的形成中起着重要的作用。

ASB3基因功能缺失突变和表达下调促进结直肠癌细胞的生长和转移

背景与目的锚蛋白重复序列和SOCS盒蛋白3(ankyrin repeat and SOCS box protein 3, ASB3)是ASB家族成员,包含锚蛋白重复序列和SOCS盒结构域。以往研究表明,它介导肿瘤坏死因子受体2的泛素化和降解,并可能参与炎症反应。然而它对肿瘤发生的作用尚不清楚。本研究旨在探讨ASB3对结直肠癌(colorectal cancer, CRC)的生长与转移的影响。方法使用新一代测序或Sanger测序法检测结直肠癌标本或细胞系中的ASB3突变,并用实时定量PCR、蛋白免疫印迹、免疫组化或免疫荧光法来测定基因的表达。通过MTT和集落形成实验检测细胞的增殖,用流式细胞仪检测细胞周期分布,并用Transwell和划痕实验检测细胞迁移和侵袭。应用裸鼠实验来检测肿瘤细胞的成瘤性和肝转移。结果在结直肠癌病例中ASB3基因经常发生突变(5.3%)和下调(70.4%)。沉默内源性ABS3的表达在体外可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,在体内可促进成瘤和肝转移。相反,过表达野生型ASB3可抑制肿瘤的生长和转移,而过表达ASB3突变体不具有这种抑制效应。进一步分析表明,ASB3通过上调β?catenin、E?cadherin和下调转录因子8、N?cadherin和vimentin阻止上皮?间充质转换来抑制结直肠癌转移。结论在结直肠癌中常存在ASB3基因突变或表达下调,在结直肠癌的发生和进展中起到重要作用。

含乙型肝炎病毒C基因的重组腺相关病毒对树突状细胞的作用

目的 研究腺相关病毒(AAV)为载体的含有乙型肝炎病毒(HBV)C基因重组病毒(rAAV-HBV-C)感染树突状细胞(DC)的效率及对DC生长和成熟的影响。 方法 从正常人外周血中分离单个核细胞收取单核细胞进行体外培养,分别用rAAV-HBV-C和293细胞裂解物感染刺激单核细胞,感染后的单核细胞在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF α)存在的条件下继续培养获得成熟的DC。用逆转录聚合酶链反应及流式细胞仪细胞内染色检测目的基因(HBV-C)的转录及表达;通过观察不同时间DC的形态及检测收获DC时其表面分化抗原(CD)的表达来评价DC的生长和成熟状态。 结果 rAAV-HBV-c感染后的DC可转录HBV-C基因并表达HBV-C抗原,病毒感染组与对照组收获的DC在细胞形态与CD表达方面差异无统计学意义。 结论 rAAV-HBV-C可有效感染DC,感染的病毒对DC的生长及成熟没有显著影响。

腺相关病毒Rep78蛋白对乙型肝炎病毒C基因的抑制作用

目的 研究腺相关病毒(AAV)Rep78蛋白对乙型肝炎病毒C基因(HBV-C)的抑制作用及机制。 方法 以pEOB6(含有HBV全长的质粒)为模板,聚合酶链反应法分别扩增出HBV-C启动子基因及含有HBV-C启动子的HBV-C基因。利用pMAL-Rep78体外扩增得到Rep78蛋白。以凝胶电泳阻滞实验检测Rep78与HBV-C启动子的结合,体外转录实验观察Rep78对HBV-C转录的影响。 结果 聚合酶链反应法扩增出了的HBV-C启动子基因(182 bp)及含有HBV-C启动子的HBV-C基因(789 bp)。凝胶电泳阻滞实验结果显示Rep 78与HBV-C启动子结合,呈剂量依赖性并可以被Rep 78抗体阻滞。体外转录实验显示Rep78明显抑制HBV-C的转录。 结论 AAVRep78可以通过与HBV-C启动子结合抑制HBV-C的转录。

美国的创伤急救和创伤系统

据统计，美国40岁以下的人群中，创伤排在死亡原因的首位，每年约有15万人，这是非常高的死亡率。同时，在美国因创伤所导致的永久性伤残者是死亡人数的3倍，每年45万，这是一个很大的数字。在我们中国，现在还没有具体的统计，但也会是一个比较惊人的数字。美国每年创伤所导致的社会及经济损失是17亿美金，所以不论对社会还是家庭，创伤所导致的后果都是非常严重的。