转化医学理念在医学遗传学教学中的体现

转化医学是现代医学发展的需要,转化医学人才的培养对基础医学教学提出了更高的要求。从教学模式、教学内容、教学方式等方面介绍了在转化医学思想启发下所进行的医学遗传学教学改革和实践,强调了在基础医学教育阶段培养转化医学意识、建立基础与临床有效联系的重要性和必要性。

H19基因在辅助生殖技术领域中的研究进展

辅助生殖技术(ART)虽然已成为人们解决不孕不育的主要手段,但该项技术仍存在一定安全隐患,如经卵胞浆内单精子注射(ICSI)和体外受精-胚胎移植(IVF-ET)获得的胎儿有表观遗传学改变的可能,这些表观遗传学的改变是否对后代造成不利影响,有待进一步深入研究和探讨。H19基因为母源性基因,是最早被鉴定的印迹基因之一。研究显示H19基因变异与胎儿表观遗传学性状改变相关。综述H19基因与ART的关系。

基于案例引导和研讨教学融合的多模态教学在新药研究与开发课程中的应用

目的:分析多模态教学在新药研究与开发课程教学中的应用效果。方法:选取皖南医学院2018、2019级临床药学的学生作为研究对象,比较传统教学和多模态教学模式在新药研究与开发课程中的教学效果。2018级学生(n=61)采用传统教学模式教学,2019级学生(n=57)采用多模态教学。从平时成绩、期末考试成绩和问卷调查3个方面对教学效果进行评价。结果:研究组学生的平时成绩、期末考试成绩和成绩优良率[(84.00±8.27)分、(82.74±5.32)分、82.45%]均高于对照组[(74.90±2.31)分、(72.72±11.68)分、24.59%](P<0.05),且问卷调查结果显示研究组学生对教学方式的满意度及教学效果认可度也高于对照组(P<0.05)。结论:多模态教学模式可以有效激发学生的学习兴趣,提高学生成绩,总体教学效果优于传统教学模式。

来曲唑与枸橼氯米芬对多囊卵巢综征患者诱导排卵的效果分析

目的:比较来曲唑(LE)和枸橼氯米芬(CC)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者诱导排卵的效果。方法:经达英-35和二甲双胍治疗后,内分泌正常的PCOS患者72例拟行诱导排卵治疗。随机分为LE组36例和CC组36例,分别于月经周期的第4天开始服用LE与CC,阴道超声监测卵泡发育情况。在卵泡直径≥18mm时,注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导排卵,同时在HCG日抽血测定黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和睾酮(T),并跟踪观察比较两组子宫内膜厚度、优势卵泡数、HMG用量、排卵率、未破裂卵泡黄素化(LUF)发生率和临床妊娠率等。结果:LE组的周期排卵率、妊娠率与CC组相比差异无统计学意义;LE组HCG日E2水平低于CC组(P<0.05),但子宫内膜厚度大于CC组(P<0.05),卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率明显低于CC组(P<0.01),LE组单卵泡排卵率优于CC组。结论:在PCOS诱导排卵治疗中,LE促排卵单卵泡排卵率高,子宫内膜容受性好,可降低多胎妊娠和OHSS的发生率,更适用于PCOS患者促排卵治疗,有望成为PCOS新一代一线诱导排卵药物。

鼠胚实验在新建IVF胚胎培养室中的质控研究

目的:利用昆明系小白鼠行体、内外受精技术,对新建IVF胚胎培养室及技术员操作水平进行评估。方法:①手术获得昆明小白鼠雌雄配子,行体外受精;②手术获得昆明小白鼠体内受精胚(原核胚);培养观察两组鼠胚的受精率、卵裂率、囊胚率。结果:共进行24个周期的体外受精实验,取卵938枚,受精率89.87%、卵裂率96.32%、囊胚率95.39%;共进行24个周期的体内受精实验,取卵916枚(包括原核胚),受精率96.29%、卵裂率97.21%、囊胚率93.57%。结论:两组鼠胚实验结果表明,体内受精胚在体外发育更稳定,其对新建IVF胚胎培养室能够进行很好的质量控制;体外受精胚随小鼠批次及饲养环境等不同,在体外培养时其受精率、2-细胞率等会发生波动,但其对技术人员的操作水平能进行更好的评估;两者结果均能对新建胚胎培养室进行各项质控的监测。

195个周期宫腔内人工授精结局的影响因素探讨

目的:探讨影响夫精宫腔内人工授精妊娠率的因素。方法:回顾性分析2007年1月～2012年12月期间因不孕症行宫腔内人工授精(IUI)治疗的104对夫妇的195个周期。分析年龄、不孕年限、IUI治疗周期数、不孕原因、促排卵、成熟卵泡数目、子宫内膜厚度等因素和妊娠之间的关系。结果:单因素和多因素Logistic回归分析均表明继发性不孕症患者妊娠率更高(OR=3.494,P=0.032,OR=3.657,P=0.048)。与自然周期相比,促排卵周期成熟卵泡数目更多(OR=18.279,P=0.000),子宫内膜增厚(OR=0.186,P=0.007)。促排卵周期的妊娠率高于自然周期,有统计学意义(χ2=5.946,P=0.015)。结论:在IUI治疗中,选择合适的患者和促排卵治疗可提高妊娠率。

曲普瑞林与HCG联合应用于PCOS患者成熟卵泡“扳机”的临床分析

目的:观察绒毛膜促性腺激素(HCG)、曲普瑞林与曲谱瑞林+HCG应用于多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡成熟时"扳机"的临床效果比较。方法:138例PCOS患者均采用来曲唑+尿促性腺激素(HMG)诱导排卵,每组46例患者,分别使用HCG 10 000 IU(A组)、曲普瑞林0.2 mg(B组)、曲谱瑞林0.1 mg+HCG 5 000 IU(C组),观察3组的排卵率、妊娠率及卵泡未破黄素化综合征(LUFS)、卵巢过度刺激综合征(OHSS)的发生情况。结果:本资料中显示3组排卵率和LUFS率有差异,A组的排卵率明显低于B、C组,LUFS率高于B、C组(P<0.05);3组临床妊娠率无统计学意义(P>0.05)。结论:HCG组、曲普瑞林组与曲谱瑞林组+HCG组均为帮助PCOS患者破卵的有效方法,但在PCOS患者中应用曲普瑞林则更加安全有效。

亚临床甲状腺功能减退对患者体外受精胚胎移植结局影响分析

目的:分析亚临床甲状腺功能减退(亚甲减)患者行体外受精胚胎移植治疗时的胚胎情况。方法:选取2014年6月至2017年10月于安徽省皖南医学院弋矶山医院生殖医学中心接受第一次体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的患者249人为研究对象,其中亚甲减67例,甲状腺功能正常患者182例,所有亚甲减患者在进周期时给予左旋甲状腺素片(优甲乐)治疗。利用回顾性分析方法,比较两组患者的获卵数、体外成熟(MⅡ)卵数、受精率、卵裂率、补救卵泡浆内单精子注射(ICSI)率、优胚率等。结果:两组患者受精率、卵裂率和补救ICSI率差异有统计学意义(P<0.05),而获卵数、MⅡ卵数及优胚率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:亚甲减患者进周期时虽给予治疗,维持TSH水平2.5 m IU/mL,但仍有可能会降低受精率、卵裂率及增加补救ICSI率,故认为给予患者药物治疗亚甲减,维持甲状腺功能的稳定是必要的。

抗苗勒管激素在卵巢功能及相关疾病中的应用进展

抗苗勒管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)是睾丸支持细胞和卵巢颗粒细胞分泌的一种由二硫键连接两个相同亚基的二聚体糖蛋白,属于转化生长因子β超家族成员,具有调节两性生殖细胞发育的功能。在卵巢功能方面,AM能够调节卵泡发育,参与卵泡生长过程,还能早期评估卵巢储备情况,及早预测绝经年龄,更能早期发现卵巢疾病并评估疾病发展及预后,在辅助生殖技术中亦起到重要作用。随着检测技术的发展,AMH浓度的测量更加简便和精确,而且与其他生物学指标比较,AMH浓度相对稳定,所以AMH已成为近年来的研究热点之一。就近年来AMH与卵巢功能及相关疾病的关系综述如下。

Y染色体AZFc区域DAZ基因拷贝类型与生精障碍相关性研究

Y染色体上“无精子因子”区（azoospermia fac-tor，AZF）的微缺失已是男性生精障碍的重要遗传因素之一。AZF分为AZFa、AZFb和AZFc3个区域，约80％的微缺失出现在AZFc区。该区域主要有两大功能基因家族，DAZ和CDY基因家族。

过表达TrxR1重组HEK293细胞株的构建和鉴定

目的构建稳定过表达硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)的HEK293细胞株,为TrxR1的功能研究以及靶向TrxR1药物筛选提供细胞模型。方法通过PCR扩增,连接转化以及Sanger双脱氧测序构建并筛选出TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-Puro-TXNRD1,转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞株。后续研究分为3组进行:①TrxR1过表达HEK293细胞:pLVX-Puro-TXNRD1载体稳定转染细胞;②对照HEK293细胞:pLVX-Puro空载病毒载体稳定转染细胞;③正常HEK293细胞;通过RT-qPCR、Western blot实验检测上述3组细胞中TrxR1的mRNA以及蛋白表达情况;通过胰岛素终点法以及TRFS-green探针成像检测上述3种细胞内TrxR1的酶活力;通过CCK8实验检测上述3种细胞对TrxR1特异性抑制剂auranofin的敏感性。结果构建载体经DNA测序,成功获得插入TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-Puro-TXNRD1。与HEK293以及HEK293-NC细胞相比,HEK293-TrxR1-OE细胞中TrxR1的mRNA和蛋白高表达,且酶活力也同样显著上升(P<0.005);而与HEK293以及HEK293-NC细胞相比,auranofin对HEK293-TrxR1-OE细胞中TrxR1酶活力以及细胞增殖的抑制效率均显著下降(P<0.005)。结论通过构建pLVX-Puro-TXNRD1慢病毒载体,成功获得过表达TrxR1酶的HEK293细胞株,该细胞对特异性靶向TrxR1的抑制剂的抗增殖作用具有抵抗,因而可用于靶向TrxR1药物的筛选。

PCOS患者来曲唑诱导卵泡生长前联合用药预处理后临床治疗结局分析

目的:观察分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者来曲唑(LE)诱导排卵之前给予预处理治疗的临床效果。方法:210例门诊PCOS患者随机分为A、B、C 3组,每组70例,治疗3个月后,比较治疗前后各项人体参数指标、激素水平变化、空腹胰岛素(IRI)及甘油三脂(TG)等的变化,同时均采用LE和尿促性腺激素(HMG)诱导排卵及指导同房。观察A、B、C组首次LE加用HMG促排卵治疗的临床妊娠结局。结果:A组为达英-35和二甲双胍联合治疗,效果比较显著,临床妊娠率在首次促排卵治疗后可达25.7%;B组为单一用达英-35,治疗后部分症状得到改善,但总体治疗效果无联合用药的A组好,临床妊娠率在首次促排卵治疗后为22.85%;C组为单一用二甲双胍,治疗后临床妊娠率为15.71%。结论:PCOS患者在诱发卵泡生长前须行必要的预处理。达英-35和二甲双胍联合治疗可以改善其脂代谢异常等,有利于在首次促排卵获得临床妊娠。但本研究结果仍需要进一步扩大样本量,进行深入研究证实。

移植2枚冻融胚胎发生单卵单胎合并单卵双胎并成功减胎一例

目的辅助生殖技术的普及增加了多胎妊娠率,减胎术可改善多胎妊娠的妊娠过程和临床结局。方法通过报道1例移植2枚冻融胚胎获三胎妊娠(单卵单胎合并单卵双胎)并成功减一胎的病例,结合文献总结分析多胎妊娠中单卵双胎发生率、不良影响、辅助生殖技术中的影响因素及治疗。结果该例患者成功减胎并持续妊娠,孕33+5周剖宫产分娩2名健康男活婴。结论多胎妊娠尤其是单卵双胎,对于母儿均有严重不良影响,减胎术是降低多胎妊娠率、改善多胎妊娠预后的首选补救措施。

生长激素和维生素E联合应用治疗薄型子宫内膜的研究

目的:研究生长激素(GH)和维生素E(Vit.E)联合应用治疗子宫内膜过薄的效果。方法:20只雌性SD大鼠随机分为四组,分别为对照组、模型组、GH组和治疗组,每组各5只。对照组常规饲养;模型组、GH组及治疗组大鼠于动情期行95%乙醇宫腔灌注术构建薄型子宫内膜模型,术后6~8 h后,模型组大鼠宫腔内灌注0.2 mL生理盐水,GH组及治疗组大鼠灌注等量GH,治疗组并于次日开始每日60 mg/kg Vit.E灌胃治疗14 d,术后3个动情周期(约2周)处死大鼠,子宫组织行HE染色对模型进行鉴定,同时行免疫组织化学染色检测子宫内膜内Cytokeratin 19及Vimentin水平。结果:模型组大鼠子宫内膜厚度明显变薄,GH组、治疗组大鼠内膜厚度较模型组显著增加,且治疗组子宫内膜厚度高于对照组,但GH组内膜厚度略低于对照组;角蛋白及波形蛋白表达量,模型组低于GH组、对照组和治疗组,差异有统计学意义。结论:生长激素和维生素E治疗后子宫内膜相关增殖指标明显增加,生长激素和维生素E可以有效促进子宫内膜细胞增殖。

解脲支原体感染对不同年龄段IVF/ICSI-ET/FET患者妊娠结局的影响

目的:探究解脲支原体感染对不同年龄段体外受精/卵胞浆内单精子显微注射-胚胎移植/冻胚解冻移植(IVF/ICSI-ET/FET)患者妊娠结局的影响。方法:收集2014年10月~2020年10月在弋矶山医院生殖医学中心接受IVF/ICSI-ET/FET助孕的887例(周期)不孕患者的相关资料进行回顾性分析,20~34岁为低龄组,35~46岁为高龄组;根据其助孕前支原体检查结果分为A组(阳性组)、B组(阳性治疗后转阴组)、C组(阴性组),采用方差齐性检验、LSD-t检验、卡方检验或Fisher确切概率法分析得出不同年龄阶段的相关资料及检查结果和患者妊娠结局的关系。结果:低龄组3组临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05);A组和C组的分娩率均高于B组(P<0.05),而A组和C组的分娩率差异无统计学意义(P>0.05);高龄组B组和C组的临床妊娠率均高于A组(P<0.05),而B组和C组的分娩率差异无统计学意义(P>0.05);C组的分娩率高于A组(P<0.05),而其他组间的分娩率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高龄组支原体阳性的不孕患者临床妊娠率和分娩率显著降低,提示感染支原体可能会对高龄女性的IVF/ICSI-ET/FET助孕结局产生不利影响。

Igf2/H19印迹基因在辅助生殖技术(ART)早期胚胎中的作用

辅助生殖技术(ART)目前成为了人们解决不孕不育的主要方式,但是通过ART出生的后代发生基因印迹改变导致表观遗传学疾病的报道出现,使得辅助生殖技术的安全性受到了人们的关注。早期胚胎发育受印迹基因的调控,而Igf2/H19基因是最早被发现的内源性印迹基因,正确的印迹对哺乳动物的胎儿和胎盘正常发育至关重要。Igf2/H19基因编码重要的印迹基因,控制正常的早期胚胎发育。Igf2/H19基因与ART早期胚胎的关系尚不十分明确,有待进一步的深入研究和探讨。

利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除TrxR1基因的HCT-116细胞株

为更好地研究靶向硫氧还蛋白还原酶1的小分子化合物的细胞内靶点选择性,利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除TrxR1基因(编码硫氧还蛋白还原酶1)的HCT-116细胞株。首先根据TrxR1基因序列和CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计并选择合适的敲除位点,再根据敲除位点序列设计敲除TrxR1基因的sgRNA干扰序列,以pCasCMV-Puro-U6空质粒载体为骨架构建能表达该sgRNA干扰序列的重组质粒。质粒共转染至HCT-116细胞后,利用嘌呤霉素筛选TrxR1敲除的HCT-116细胞,通过DNA测序、免疫蛋白印迹、TRFS-green荧光探针和细胞内TrxR1酶活力检测等方法鉴定和验证HCT-116细胞的TrxR1基因敲除效果。进一步通过CCK-8实验初步研究靶向TrxR1小分子化合物对细胞内TrxR1酶活力和细胞增殖力抑制的相关性。结果显示,表达sgRNA干扰序列的重组质粒可以敲除HCT-116细胞中TrxR1基因,筛选获得的稳定敲除细胞HCT116-TrxR1-KO中无TrxR1蛋白表达,而靶向TrxR1小分子抑制剂对该细胞无TrxR1酶活力和细胞增殖力抑制效果。本研究利用CRISPR/Cas9系统成功构建了HCT-116的TrxR1基因敲除的稳定细胞株,为进一步研究TrxR1在相关疾病的发生机制和治疗中的作用奠定了基础。

染色体多态性对体外受精/卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植胚胎结局的影响

目的探讨在辅助生殖技术助孕过程中染色体多态性对胚胎发育结局的影响。方法回顾性病例对照研究分析2014年12月—2018年10月期间在皖南医学院附属弋矶山医院生殖医学中心接受体外受精/卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗的712例患者的染色体核型,将其分为染色体多态性组(多态性组,n=191)和染色体正常组(正常组,n=521),比较组间的获卵数、MII卵率、受精率、双原核(2PN)率、卵裂率、优质胚胎率和第3日可移植胚胎率。结果多态性组和正常组的获卵数分别为14.52±8.43和13.74±7.25,MII卵率分别是83.62%和84.54%,组间差异均无统计学意义(P>0.05);多态性组的受精率(84.98%)和2PN率(77.12%)稍低于正常组(85.03%,77.16%),但差异均无统计学意义(P>0.05);多态性组的优质胚胎率(65.55%)高于正常组(64.77%),差异无统计学意义(P>0.05);多态性组和正常组的卵裂率(98.30%比98.19%)和第3日可移植胚胎率(93.95%比92.91%)差异均无统计学意义(P>0.05)。在所检出的191例染色体多态性中,男方Y染色体多态性检出率最高,占57.59%;女方各种染色体多态性占32.98%,男性高于女性,但差异无统计学意义。结论染色体多态性患者行辅助生殖技术助孕后的胚胎结局和正常人群差异无统计学意义,但其妊娠结局及最终抱婴回家率有待严密随访跟踪。