重编程诱导多功能干细胞的研究进展

诱导多功能干细胞（ induced pluripotent stem cells，iPSCs），即通过不同的转导方法，将影响重编程的关键转录因子、RNA、蛋白或小分子化合物导入到成体细胞，使其＂返老还童＂回到胚胎干细胞状态，并能够被诱导分化产生不同的细胞类型。 iPSCs 的问世，对干细胞的发展具有划时代的意义，使得患者来源的体细胞可以被诱导成iPSCs，用于相关疾病的检测分析与干细胞治疗，规避了免疫排斥和道德论理等问题。但是由于iPSCs诱导的低效性和致瘤性，使得这个＂新星＂在临床中的应用被质疑，目前科学家一直围绕这2个核心问题展开研究，通过改进转导途径，改变重编程方法来提高它的安全性和效率，并取得了一系列喜人的结果，从而使iPSCs未来用于临床的前景变得越来越光明。

视网膜和脉络膜新生血管的基因治疗

抑制视网膜或脉络膜新生血管是治疗视网膜或脉络膜血管性疾病的关键。基因治疗是目前研究的热点,我们从动物模型、载体、治疗性靶基因的选择等方面对视网膜和脉络膜新生血管治疗的进展进行综述。

角膜形态学评价的方式及其在LASIK中作用

准分子激光手术安全性问题随着准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)的发展受到越来越多的重视,所以在选择手术适应证方面应该慎重。在术前筛查患者时,角膜形态学检查是各种术前检查最具临床意义的检查之一。角膜形态学检查历经几代检查仪器的更新进步,形态学变化也得以应用于LASIK术后观察角膜愈合情况、监测各种并发症的发生等。其中OrbscanII及Pentacam系统为目前最具优势且被广泛应用的角膜形态学检查,在LASIK术前术后具有极其重要的临床意义。

PTEN mRNA在兔晶状体上皮细胞增殖中的表达

目的:探讨PTEN mRNA在兔晶状体上皮细胞增殖中的作用.方法:将健康白色家兔42只随机分为实验组(36只)和对照组(6只).实验组兔行双眼透明晶状体皮质吸除术,对照组未做处理.在术后1d,3d,1wk,2wk,1mo和2mo各处死6只.应用免疫组化法检测赤道部晶状体上皮细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA);应用原位杂交和RT-PCR方法检测PTEN mRNA的表达.结果:①正常赤道部晶状体上皮细胞核可见PC№弱阳性表达,术后1～7d PC№的表达维持在高水平状态.2wk后,随着时间的延长,PC№表达逐渐减弱,1～2mO时大致恢复术前状态.②正常兔晶状体上皮细胞中PTEN mRNA的表达呈阳性,术后1 d时PTENmRNA表达明显下降;术后3d时,PTEN mRNA表达仍处于低水平状态.随着时间的延长,术后1wk时略有恢复,2wk时趋于明显好转,1～2mo时恢复正常.PTEN mRNA与PC№的表达呈负相关.结论:PTEN mRNA在正常兔晶状体上皮细胞胞质中有表达;PTEN参与晶状体上皮细胞的增殖代谢过程,对细胞的增殖起抑制作用.

地塞米松诱导晶状体上皮细胞凋亡的实验研究

目的探讨地塞米松(dexamethasone,Dex)诱发体外培养的牛晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)凋亡情况。方法取健康1a龄内牛眼,提取LEC,传代培养;分为2组:对照组和Dex组。透射电镜观察Dex诱导LEC凋亡的超微结构改变,流式细胞术探讨Dex对LEC核内DNA含量的影响。结果透射电镜下可观察到Dex组LEC细胞核内染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等细胞凋亡的形态学改变,核内DNA含量下降,出现典型的细胞凋亡峰,凋亡百分率从第1天的(1.522±0.593)%提高到第7天的(25.318±3.432)%,与对照组相比有统计学意义(P<0.01),并呈时间依赖关系。结论Dex诱导LEC凋亡可能是激素性白内障发生发展的细胞学和分子生物学机制之一。

LASIK术后层间上皮生长

角膜板层间上皮生长是 L ASIK后并发症之一 ,有的病例可严重影响术后效果 ,已经引起广大眼科医师的重视。本文就 L ASIK后层间上皮生长这一术后并发症的病因、发病机理。

兔晶状体皮质吸出后FGF-R1mRNA在细胞增殖中的作用

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子受体1(fi-broblastgrowthfactorreceptor1,FGF-R1)在兔晶状体上皮细胞增殖中的作用。方法:将健康白色家兔42只随机分入实验组(36只)和对照组(6只)。实验组兔行双眼透明晶状体皮质吸除术,对照组未做处理。在术后1,3,7,14,30,60d各处死6只。应用免疫组化和RT—PCR方法检测赤道部晶状体上皮细胞中增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)及FGF-R1mRNA的表达。结果:FGF-R1mRNA相对含量随术后时间的发展,表现出明显的变化。术后1～3d时FGF-R1表达迅速升高到最高值。术后7d时仍维持在较高水平状态。14d后明显下降,逐渐恢复术前状态。FGF-R1mRNA与PCNA的表达呈正相关。结论:FGF-R1参与兔晶状体上皮细胞的增殖代谢过程,与细胞的增殖状态相关。

实验性单纯疱疹病毒Ⅰ型感染兔眼部扫描电镜观察研究

应用ＤＭＳＯ（Ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ二甲基亚砜）冷冻割断制样扫描电镜技术首次动态观察了不同感染阶段（ｐｏｓｔＩｎｆｅｃｔｉｏｎ，ＰＩ）实验性单纯疱疹病毒性角膜炎（ＨＳＫ）兔的角膜、三叉神经节（ＴＧ）泪腺等组织的病变情况。初步报告并分析了各组织病变的扫描图像结果，并对冷冻割断法观察扫描电镜的原理及优缺点予以讨论，认为该技术应用于眼部单疱病毒感染的研究图像清晰、直观、简便可行，是一种有实用价值的方法。

应用冷冻割断扫描电镜技术观察兔实验性单纯疱疹病毒性角膜炎的病理变化

应用二甲基亚砜冷冻割断扫描电镜技术，首次动态观察了不同感染阶段实验性单纯疱疹病毒性角膜炎、兔角膜、三叉神经节、泪腺等组织的病变情况。初步报告并分析了各组织病变的扫描图像结果，并对冷冻判断法观察扫描电镜技术的原理及特点予以讨论，认为该技术应用于眼部单纯疱疹病毒感染的研究图像清晰、直观、简便易行，是一种有实用价值的方法。

0度人工晶体植入术的临床应用

本文对11例高度近视眼伴白内障患者进行了白内障摘除加“0”度人工晶体植入术。结果:11例患者均未出现术中并发症,术后视力均较术前矫正视力有所提高(P<0.05,X2检验),术后平均屈光矫正为-2.8±1.18D,观察其间4例出现后发性白内障,其中2例行YAG激光治疗,2例手术截开后囊膜,术后均未出现并发症。本文对高度近视眼伴白内障患者的“0”度人工晶体植入术的适应证的选择,术后并发症及植入人工晶体的必要性进行了探讨。

一叶萩碱（SCRN）抗Ⅰ型单纯疱疹病毒眼部感染的临床研究

一叶萩碱（ＳＣＲＮ）为中草药一叶的主要生物碱。在体外细胞培养及动物实验证实ＳＣＲＮ具有明显的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－１）活性的作用基础上，本文应用０．１％ＳＣＲＮ点眼剂及０．１％无环鸟苷点眼剂治疗临床单疱病毒角膜炎患者５８例（６７眼），进行疗效对比观察，同时对患者治疗前后泪液中ＳＩｇＡ及锌离子含量的变化进行了动态检测。结果表明ＳＣＲＮ点眼剂治疗ＨＳＫ患者具有显著的疗效，尤其在治疗浅层型ＨＳＫ及降低复发率方面更为突出。经过ＳＣＲＮ治疗的患者泪液中ＳＩｇＡ及锌离子水平显著提高，接近正常水平；作者阐明、分析了ＳＣＲＮ治疗ＨＳＫ的作用机制。

后房型人工晶体缝线三点固定术

后房型人工晶体缝线三点固定术王海林于雅范陶军许懿贾广学张柏新夏德昭近年来，经巩膜缝线固定后房型人工晶体这项术式已被眼科医生广泛接受［１～４］。虽然前房型虹膜支撑的人工晶体的设计逐渐趋于合理且放置容易，但仍有诸如虹膜炎、青光眼及无足够虹膜等情况不能施行...

羊膜培养液抑制角膜新生血管的实验研究

目的 研究羊膜培养液对小鼠角膜新生血管的抑制作用及机制。方法 应用cornealmicropocket方法 ,将含 10 0ng碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和 12 %hydronpolymer的缓释颗粒植入角膜层间 ,制备小鼠角膜新生血管模型。实验分对照组、羊膜组和去上皮羊膜组 ,每组 10只眼 ,收集各组培养液于模型制作当日起 ,每日滴眼 4次至术后 7d摄片观测角膜新生血管长入情况并处死动物。对脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)进行体外培养 ,并应用Boyden小房技术和荧光结合(CyQUANT)实验分别检测羊膜培养液对HUVEC细胞迁移和细胞增殖的影响。利用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组培养液中金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP1)和 2 (TIMP2 )的含量。结果 羊膜培养液明显抑制由bFGF诱发的小鼠角膜新生血管的形成 ,对照组、羊膜组和去上皮羊膜组角膜新生血管面积分别是 (2 4 8± 0 76 )mm2 、(0 6 4± 0 5 2 )mm2 和 (1 96± 0 6 5 )mm2 。羊膜培养液明显抑制血管内皮细胞的迁移和增殖 ,而对照组和去上皮羊膜组对HUVEC细胞迁移无作用。羊膜培养液中TIMP2水平明显增高 ,而TIMP1的含量无变化。结论 羊膜培养液中TIMP1的含量未增加。而羊膜上皮产生或释放大量的TIMP2 ,抑制血管内皮细胞的迁移和增殖 。

实验性单疱病毒性角膜炎组织形态及超微结构的研究

目的研究单疱病毒性角膜炎（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｋｅｒａｔｉｔｉｓ，ＨＳＫ）不同病程阶段角膜组织微观及超微结构的病理变化。方法采用实验性ＨＳＫ原发感染模型，对单疡病毒Ｉ型感染后不同的感染阶段３、７、１４、２１及６０天的兔角膜标本行ＨＥ、Ｍａｌｌｏｒｙ染色于光镜及透射电镜下观察。结果ＨＳＫ时炎性细胞浸润以多形核中性粒细胞为主，急性感染３及７天时角膜基质层内可见炎性细胞与成纤维细胞接触，角膜水肿，严重者内皮层炎性细胞嵌入，电镜下仅２例标本在急性感染阶段中可见单疱·病毒Ｉ型颗粒。结论单疮病毒Ｉ型可直接破坏及损伤机体免疫功能是ＨＳＫ病毒变化的基础，角膜内皮细胞受炎性细胞或免疫细胞浸润可能是基质水肿的一个重要因素。

后房型人工晶体植入眼的伪调节

目的研究后房型人工晶体植入眼的伪调节。方法对植入单焦硬性后房型人工晶体的７３只眼进行远、近视力，屈光状态，瞳孔的大小及运动状态，散瞳前、后前房深度等检查；并在戴镜矫正屈光不正的基础上，测定伪调节力。结果伪调节力为１．５３±０．５９Ｄ。伪调节与瞳孔直径呈负相关（ｒ＝－０．６２）；瞳孔运动状态佳者，其伪调节相对较大。散瞳前、后晶体位置发生变化，平均变化量为０．４ｍｍ，且伪调节与散瞳前、后人工晶体位置的变化量，即晶体移动度呈正相关（ｒ＝０．４７）。伪调节与散瞳前前房深度及患者年龄等因素无明显相关性（ｒ＝０．２６，ｒ＝０．２２）。结论伪调节是瞳孔大小及运动状态、角膜散光等诸多因素共同作用而致眼内焦点深度改变的结果，故术后保留一定的近视散光及良好的瞳孔运动状态对植入单焦硬性后房型人工晶体眼伪调节的产生是有益的。

复明中药对牵拉性视神经损伤轴浆流的影响

目的 :研究牵拉性视神经损伤时视神经轴浆物质运输的变化 ,同时观察复明中药对实验性牵拉性视神经损伤后轴浆运输的影响。方法 :建立牵拉性视神经损伤的动物模型 ,利用 3 H—亮氨酸作为示踪剂 ,制做放射自显影光镜标本观察轴浆物质运输情况 ,通过液体闪烁仪测定视神经中的放射能分布 ,并计算正常及损伤后用药至 1个月时的视神经轴浆流速度。辣根过氧化物酶做为电镜标本示踪剂观察轴浆物质运输情况。结果 :正常家兔视神经轴浆流速为 160 mm/day,损伤后视神经轴浆流速约为 67± 2 0 mm/day,一个月时用药组轴浆流速恢复明显快于对照组 ( p<0 .0 5 ) ,用药组放射自显影银颗粒着色较多。一月时用药组电镜观察可发现 HRP颗粒 ,而对照组则较少见。结论 :牵拉性视神经损伤后 ,其轴浆流速明显降低 ,复明中药可明显加快牵拉性视神经损伤后轴浆流速度的恢复。

晶体不全脱位白内障超声乳化Ⅰ期人工晶体囊袋内植入术

晶体不全脱位白内障超声乳化Ⅰ期人工晶体囊袋内植入术张劲松张洋孙荔中国医科大学附属第一临床学院眼科（１１０００１）晶体不全脱位伴有白内障的病例临床进行手术处理较为困难。本文最近采用超声乳化（ＰＥＡ）技术并Ⅰ期人工晶体植入术，经观察取得了较好的结果。现报...

节段状视网膜动脉周围炎并发睫状视网膜动脉阻塞1例

患者女４６岁左眼视力下降伴同侧偏头痛一个月，在当地县医院诊为左眼葡萄膜炎，给予对症治疗１０天，未见明显好转，于１９９８年１月４日来我院就诊。眼部检查：右眼视力１．０，未见明显异常。左眼视力０．５，轻度睫状充血，角膜后羊脂状ＫＰ３个，前房正常深，瞳孔３...

ABC免疫组化法在单疱病毒性角膜炎诊断中的应用

本文应用ＡＢＣ免疫组化法对３７例ＨＳＫ病人４０眼及１４例非ＨＳＫ病例１４眼角膜上皮细胞涂片进行ＨＳＶ－１抗原检测，结果敏感性９７．５％、特异性１００％。作者认为该方法不仅可用于临床ＨＳＫ病人早期、快速诊断，而且还是监测ＨＳＫ复发及观察应用抗病毒药物疗效的有实用价值的诊断方法。