病理技术选修课在硕士研究生教学中的体会

为了让研究生尽快掌握常用的形态学技术和方法，从1980年起我室开设了病理技术选修课，并根据本课程在医学研究生病理学教学计划中的地位，作用，授课学时及研究生课题研究需要等特点，逐年对教学手段和方法进行改进和加强，经过多年教学实践取得了很好效果。

慢性缺氧大鼠右心房的超微病理变化及血浆ANF含量改变的实验研究

目的 :研究慢性间断性缺氧时右心房心肌细胞的病理改变及血浆、右心房心房利钠因子 (ANF)含量的变化规律。方法 :利用电镜观察模拟海拔 5 0 0 0m高度缺氧条件下不同时期大鼠右心房的超微病理改变 ,同时利用免疫组织化学方法检测右心房ANF含量的改变 ,并利用放射免疫方法测定慢性间断性缺氧大鼠血浆ANF含量的变化规律。结果 :慢性间断性缺氧时 ,右心房心肌细胞及间质具有多种超微病理改变 ,右心房组织ANF含量下降 ,血浆ANF含量升高。结论 :慢性间断性缺氧可导致右心房产生明显的病理变化。血浆ANF升高是右心房心肌细胞分泌心房特殊颗粒 (ASG)增多所致机体对缺氧损害的一种代偿反应。

凋亡抑制因子存活素的研究进展

凋亡抑制因子存活素(survivin)在细胞中呈周期依赖性表达,与有丝分裂期纺锤体微管相互作用,调节G2/M期,并可直接抑制caspase-3和caspase-7的活性。在肿瘤发生发展中,存活素与肿瘤细胞的凋亡负相关,与细胞增殖活性和血管生成正相关。在人类肿瘤中,存活素表达上调可预示生存期缩短和预后不良。体内、外研究中应用存活素反义核酸和突变体可诱导肿瘤细胞凋亡,使肿瘤细胞的生长减弱,并可增加肿瘤细胞对化疗和X射线辐射的敏感性。提示存活素可能是肿瘤诊断和治疗的新靶点。

大剂量糖皮质激素诱导兔股骨头坏死的研究

目的 :采用大剂量糖皮质激素诱导实验性股骨头坏死 ,观察用糖皮质激素过程中和停药后股骨头的变化。方法 :给家兔注射 2 5mg·kg-1·d-1的地塞米松 ,光镜、透射电镜和X线摄片观察股骨头的病理变化过程。结果 :① 4周光镜下股骨头国软下区出现典型骨坏死灶 ,且随时间的延长而加重。 8周软骨下区平均骨陷窝空虚率达 ( 5 1 8± 11 7) %,骨髓坏死广泛。停药后骨坏死程度加重 ,6周骨陷窝空虚率为 ( 72 9±11 4) %;负重区新骨形成少。②电镜下见骨细胞经历了变性、坏死、溶解的病理过程。③ 6～ 8周X线片示股骨头出现不规则透亮区 ,停药 6周仍存在且伴周围骨质硬化。结论 :大剂量糖皮质激素可直接导致股骨头坏死 ,停药后骨坏死病程仍继续发展 ;负重区骨修复能力差可能是股骨头坏死塌陷的重要病理基础之一 ;地塞米松诱导的兔股骨头坏死反映了该病的基本病变特征和病理过程。

NDGA对内皮细胞增殖抑制的作用研究

目的 :探讨去甲二氢愈创木酸 (NDGA)对内皮细胞增殖活性的影响及特点。方法 :采用形态学观察、细胞计数、流式细胞仪分析、免疫组织化学等技术方法观测不同浓度NDGA作用下人脐静脉内皮细胞ECV 3 0 4细胞增殖活性的变化。结果 :①不同浓度 ( 5 0～ 2 0 0 μmol/L)的NDGA处理ECV 3 0 4细胞 2 4～ 72h后或一定浓度 ( 10 0 μmol/L)的NDGA处理ECV 3 0 4细胞不同时间 ( 1～ 8d)后 ,均出现NDGA抑制细胞增殖的作用 ,且这种作用与NDGA的浓度和作用时间有关。②NDGA处理细胞后出现细胞增殖活性降低 ,主要表现为有丝分裂计数和细胞增殖指数降低 ,细胞的生长抑制率增加 ,细胞生长减慢 ,免疫组化显示PCNA、BrdU标记指数下降等。结论 :NDGA对内皮细胞增殖有明显抑制作用 ,此抑制作用可能是其影响血管生成的主要原因之一。

PAF拮抗剂BN50739对大鼠急性肺损伤的作用研究

目的 观察PAF拮抗剂BN5 0 73 9在治疗烧伤内毒素血症所致的急性肺损伤中的作用 ,为临床治疗提供依据。方法 采用烧伤复合内毒素血症大鼠模型 ,于致伤前 5min腹腔注射BN5 0 73 9。动态观察肺病理改变、血气分析、支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量及肺内TNF表达。结果 BN5 0 73 9可以明显减轻肺水肿 ,使BALF中蛋白含量明显低于生理盐水对照组 ,使伤后 1 5h和 6h血氧分压明显提高。BN5 0 73 9尚能部分抑制TNF表达。结论 BN5 0 73 9能部分改善烧伤复合内毒素血症所致的急性肺损伤。

鼻及副鼻窦内翻性乳头状瘤临床病理及其与预后的关系

目的 探讨鼻腔内翻性乳头状瘤临床病理及其与预后的关系。方法 采用组织学观察、多参数统计学分析方法对 43例鼻腔内翻性乳头状瘤的临床特点、病理形态及预后的相关性进行研究。结果 ①预后与患者的性别、年龄、病程及肿瘤发生部位无关 (P >0 .0 5 ) ;②对临近骨质的侵犯、瘤细胞不典型增生程度及核分裂像多少与癌变关系密切 (P <0 .0 1) ,但与复发无关 (P >0 .0 5 ) ;③复发患者比不复发患者易于癌变 (P <0 .0 1)。结论 瘤细胞不典型增生、核分裂像可能是预测内翻性乳头瘤癌变的指标。对邻近骨质的侵犯及复发是导致内翻性乳头状瘤癌变的重要因素。

恶性黑色素瘤的预后研究

目的拟找出与各级恶性黑色素瘤预后相关的因素.方法选择南京军区福州总医院、福建医科大学第一附属医院及第三军医大学附属西南医院、附属新桥医院、附属大坪医院病理科1995～1998年间归档的各级恶性黑色素瘤标本55例.同时选取尸检对应部位正常组织共10份作为阴性对照.应用链霉素亲生物素-过氧化物酶标S-p法检测石蜡标本中耐药基因胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)、DNA拓朴酶Ⅱ(TopoⅡ)、P-糖蛋白(Pgp)和Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并用形态计量方法检测肿瘤内微血管密度(MVD),对所得的各项指标进行统计学分析.结果美国癌症联合会(AJC)分级与预后相关(P＜0.05).耐药基因Pgp、GST-π和TopoⅡ的表达率分别为36.4%(20/55=36.4%)、52.7%(29/55=52.7%)和43.6%(24/55=43.6%),相互间差异无显著性(P＞0.05).Pgp、GSTπ和TopoⅡ的表达和TopoⅡ和TopoⅡ的表达与患者预后显著相关(P＜O.05).Ki-67在肿瘤和正常组织中呈多少不等的阳性,不同级别及与非肿瘤组织之间差异有显著性.多元回归分析显示该指标是预后的独立危险因素之一,以27%为分界点两条生存曲线间时序分析差异有显著性(P＜0.01).微血管密度:AJC分级中Ⅰ级与正常黏膜组织之间的微血管密度差异无显著性,而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的微血管密度均显著增多(P＜0.01),坏死组织中微血管平均数更为增多,VEGF的表达与微血管密度呈显著性相关(P＜0.01).微血管计数＞39.5的恶性黑色素瘤比＜39.5的恶性黑色素瘤生存期显著缩短.结论用COX逐步回归模型进行多因素分析,筛选出了对恶性黑色素瘤预后有密切关系的7个指标:AJC分级是最重要的预后因子,其次为Ki-67阳性率、微血管密度、肿瘤耐药因子Pgp、TopoⅡ、GSTπ,而组织有无坏死则为保护因素.

烧伤合并内毒素血症早期肠粘膜损害机制的研究

目的 :探讨烧伤合并内毒素血症早期肠粘膜损害的发生机制。方法 :采用 2 0 %Ⅲ度体表烧伤合并小剂量内毒素 (LPS 1mg/kg)注射的大鼠模型 ,动态检测了肠组织血小板激活因子 (PAF)、黄嘌呤氧化酶(XO)、丙二醛 (MDA)等的变化。结果 :烧伤合并内毒素注射后肠组织PAF升高较XO出现早 ,0 5h即显著高于正常对照组 ,6h达高峰 ,肠组织XO和MDA分别与PAF呈显著正相关 (P <0 0 0 5 ;P <0 0 0 1) ,MDA与XO呈显著正相关 (P <0 0 1) ,在PAF及MDA的高峰期 ,肠粘膜损害更明显。结论 :烧伤合并内毒素血症早期肠粘膜损害的发生是由于包括PAF等炎症介质的释放 ,导致肠上皮细胞XO及巨噬细胞活化、自由基的产生 ,其后中性粒细胞的浸润 ,协同促进肠粘膜损害的发展。

脑星形细胞瘤微血管密度与临床病理的关系

目的 :探讨星形细胞瘤微血管密度与其临床病理的关系。方法 :采用免疫组织化学S P法 ,对血管内皮细胞行第八因子相关抗原 (FⅧRAg)染色 ,然后测定微血管密度 (MVD)。 结果 :MVD与患者性别、肿瘤生长部位、大小无明显相关 ;不同病理组织学级别间MVD差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,病理级别越高 ,MVD越大 ;瘤周水肿程度不同的星形细胞瘤之间 ,MVD差异有显著性 (P <0 0 1) ;复发患者MVD高于未复发患者 (P <0 0 1)。结论 :星形细胞瘤MVD与病理级别、术后复发及瘤周组织水肿关系密切 。

寓教于乐的病理课堂教学

病理学是一门基础与临床医学的桥梁学科，其课堂教学主要涉及疾病的病因、发病机制、病理变化以及结局、转归。学科内容丰富但抽象难懂，易使学生感到枯燥乏味，学习起来多倾向于死记硬背，容易产生厌学心理。作者结合多年教学实践中的经验和感触，谈谈如何激发学生学习热情提高病理教学质量的体会。

线粒体DNA控制区研究进展

哺乳动物线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)控制区由中央保守区、ETAS区和CSB区构成。近十年的研究发现线粒体基因组的缺陷和衰老、肿瘤、神经退行性疾病、肌病、心肌病以及糖尿病的关系密切。由于控制区调控整个线粒体DNA的复制和转录,因此,该区的碱基突变可能引起线粒体DNA复制和转录速度加快,造成突变的线粒体DNA相对增多,经过长期的累积可能导致肿瘤的发生。过去的研究主要注重线粒体的形态结构和能量代谢的异常,近年来研究发现控制区某些区段的突变率是核基因组的100～200倍。因此,控制区的突变在肿瘤发生中的作用和地位越来越受到重视。mtDNA的拷贝数远高于nDNA,它的突变较容易被检测到。因此,寻找与特定肿瘤相关的特异性mtDNA控制区突变成为近年来研究的热点之一。

诺帝对永生化人宫颈上皮细胞HPV16E6基因抑制作用的初步研究

目的:研究诺帝(Nordy)对永生化人宫颈上皮细胞(H8细胞)HPV16E6基因的抑制作用和机制。方法:免疫细胞化学SP法检测诺帝作用前后H8细胞E6蛋白和p53蛋白表达;免疫细胞化学SP法检测增殖细胞核抗原MCM5表达,RT-PCR检测诺帝作用前后HPV16E6 mRNA的表达情况。结果:免疫细胞化学显示,E6和p53蛋白在对照组细胞内呈阳性表达,阳性物分别位于胞浆和胞核,经100μmol/L诺帝处理72h后,H8细胞E6蛋白和p53蛋白表达明显减弱,与对照组相比,差异有显著性。MCM5蛋白在对照组细胞内呈强表达,呈棕黄色分布于胞核内,经100μmol/L诺帝处理96h后,MCM5的表达明显下降。用浓度10μmol/L诺帝处理H8细胞72小时后,H8细胞的HPV16E6 mRNA表达量与对照组表达量无明显差异,而较高浓度的诺帝(50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L)处理H8细胞72小时后,H8细胞的HPV16E6 mRNA表达量相比对照组有明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:诺帝具有一定抑制HPV16病毒的作用,主要表现在抑制HPV16E6基因的mRNA表达,进而影响E6基因的转录,导致病毒E6蛋白和p53蛋白表达降低,降低永生化细胞MCM5表达,抑制细胞的增殖活性。

Survivin在结直肠癌组织中表达的临床意义及其与细胞凋亡、血管生成的关系

背景与目的:关于survivin在结直肠癌中的表达及其与病理因素、细胞凋亡及血管生成的关系仍然不清楚。本研究旨在通过探讨survivin在结直肠癌中的表达对细胞凋亡的影响及其与血管生成的关系,以认识survivin对结直肠癌发展及预后的影响。方法:应用免疫组化技术检测survivin、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor.VEGF)在91例结直肠癌组织中的蛋白表达,TUNEL法检测癌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。结果:结直肠癌伴远处器官转移者的survivin蛋白表达(56%,14/25)高于未转移者(48.5%,32/66)(P<0.05),5年生存者survivin蛋白表达阳性率穴(n阳性患者平均生存期为91.3月熏阴性患者为116.4月,前者的5年生存率穴65.2%熏30/46雪显著低于survivin阴性者穴88.9%熏40/45雪穴P<0.01雪;survivin阳性患者的AI均数(0.74±0.19)%显著低于阴性患者(1.07±0.24)%穴P<0.01雪;survivin与VEGF蛋白表达显著相关穴Pearson系数:0.721雪。结论:survivin可抑制结直肠癌细胞凋亡和调节肿瘤血管生成。

肿瘤转移抑制基因KAI1在大肠癌进展中的作用

背景与目的:对于肿瘤转移抑制基因KAI1在大肠癌中的表达及其与病理分期的关系存有争议,关于它与肿瘤患者预后的报道仍然较少。本研究旨在探讨KAI1在大肠癌进展中的作用及其在预后判断中的价值。方法:采用免疫组化法检测91例大肠癌原发灶及25例淋巴结转移灶中KAI1表达。结果:KAI1在大肠癌原发灶中阳性表达54例(59.3%),弱阳性22例(24.2%),阴性15例(16.5%)。KAI1在低分化、有淋巴结转移、远处脏器转移肿瘤中表达显著降低(P<0.01);5年生存者的KAI1阳性表达率(67.14%)显著高于5年内死亡者(33.33%)(P<0.05);KAI1表达阳性、弱阳性以及阴性患者的5年生存率依次为87.04%、63.34%、60.00%,呈下降趋势(P<0.05),淋巴结转移灶的KAI1表达显著低于原发灶(P<0.05)。结论:KAI1的异常表达可能参与了大肠癌的恶性进展。检测KAI1的表达对判断肿瘤的分化、淋巴结转移和远处转移及大肠癌患者预后有一定的参考价值。

112例乳腺癌组织学类型、分级与预后

目的 探讨乳腺癌组织学类型、分级与预后的关系。方法 根据腺管形成、核的多形性及核分裂像数确定分级标准和舟山会议推荐方案确定分类、分型方案 ,对 112例乳腺癌进行组织学分类、分型及分级 ,收集临床资料并进行随访。结果 组织学类型中浸润性普通型癌与浸润性特殊型癌、组织学分级的Ⅱ级与Ⅲ级、腋窝淋巴结有转移和无转移的 10年累积生存率和无瘤生存率差异均非常有显著性 (P <0 .0 1)。浸润性普通型癌中单纯癌与其它四型癌的 10年累积生存率差异具有显著性 (P <0 .0 5 ) ;而其10年累积无瘤存活率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 乳腺癌组织学类型。

早产孕妇血清β-hCG水平的临床检测意义

目的 探讨早产孕妇血清 β hCG水平变化及意义。方法 采用放射免疫分析法检测 3 0例早产患者和 2 43例正常晚期妊娠孕妇的血清 β hCG水平 ,对早产患者的胎盘胎膜组织进行病理学检查并观察其新生儿状况。结果 早产组血清 β hCG水平(2 5 2 4± 13 87) μg /L显著高于对照组 (16 45± 7 3 7) μg/L ,P <0 0 1。早产组中 β hCG水平升高 (≥ 2MOM )的发生率显著高于对照组(10 /3 0vs 7/12 8,P <0 0 0 1。)早产组中 β hCG水平升高者胎盘病变和胎儿预后不良的发生率均高于 β hCG未升高 (<2MOM)者 ,差异有显著性。结论 动态监测整个妊娠期尤其是 3 0周以后的母体血清 β hCG水平 。

MDR基因及MDR基因编码产物在咽喉部恶性黑色素瘤中表达及其意义

目的 :研究多药耐药 (mnlti-drugresistance ,MDR)基因胎盘型谷胱甘肽 -S -转移酶 (GST -π)和DNA拓朴酶Ⅱ (TopoⅡ )以及MDR基因编码产物P -糖蛋白 (Pgp)、在咽喉部恶性黑色素瘤中的表达及其意义。方法 :应用链霉素亲生物素 -过氧化物酶标S -P法检测 2 8例咽喉部恶性黑色素瘤中Pgp、GST -π和TopoⅡ的表达 ,分析MDR基因及MDR基因编码产物阳性表达率与肿瘤主要临床病理特征的关系。结果 :2 8例标本中Pgp、GST -π和TopoⅡ的表达率分别为 35 .7%、5 7.1%和 4 6 .4 % ,相互间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。Pgp、GST -π和TopoⅡ的表达与性别、年龄、肿瘤大小无明显相关 (P >0 .0 5 ) ,与AJC分级显著相关 (P <0 .0 5 )。结论 :Pgp、GST -π和TopoⅡ等多因素联合作用是咽喉部恶性黑色素瘤多药耐药的主要作用机理 ,其表达在化疗敏感性预测中具有必要性和可行性。