褪黑素对前额叶皮层锥体神经元兴奋性的影响及MT1R-cAMP-PKA信号通路在其中的作用

目的评价褪黑素对前额叶皮层锥体神经元兴奋性的影响及褪黑素受体1-环磷酸腺苷-蛋白激酶A(MT1R-cAMP-PKA)信号通路在其中的作用。方法取出生14~21 d的雄性SD大鼠,取脑组织,制备厚约350μm的脑片,置于人工脑脊液中。采用随机数字表法,将脑片分为5组(n=6):对照组(C组)、褪黑素组(M组)、MT1/2R拮抗剂2-苯基-N-乙酰色胺+褪黑素组(L+M组)、MT2R拮抗剂4-苯基-2-丙酰胺曲胺+褪黑素组(P+M组)和PKA抑制剂腺苷-3,5-环状硫代磷酸三乙基铵盐+褪黑素组(R+M组)。C组细胞外灌流人工脑脊液2 min;M组细胞外灌流1μmol/L褪黑素2 min;L+M组细胞外灌流1μmol/L MT1/2R拮抗剂2-苯基-N-乙酰色胺和1μmol/L褪黑素的混合液2 min;P+M组细胞外灌流1μmol/L MT2R拮抗剂4-苯基-2-丙酰胺曲胺和1μmol/L褪黑素的混合液2 min;R+M组电极内液持续给予1 mmol/L PKA抑制剂腺苷-3,5-环状硫代磷酸三乙基铵盐,细胞外灌流1μmol/L褪黑素2 min。采用全细胞膜片钳技术,记录前额叶锥体神经元膜电位和钳制电流。结果与C组比较,M组钳制电流升高,膜电位降低(P<0.05);与M组比较,L+M组和R+M组钳制电流降低,膜电位升高(P<0.05),P+M组钳制电流和膜电位差异无统计学意义(P>0.05)。结论褪黑素可抑制前额叶皮层锥体神经元兴奋性,其机制与激活MT1R-cAMP-PKA信号通路有关。