NLRP3炎性小体在病毒性心肌炎患者中的水平及临床意义

目的:检测病毒性心肌炎(VMC)患者的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体水平,探讨其临床意义。方法:选择2014年1月~2018年12月入院的170例VMC患者为VMC组,同期50例健康体检者为健康对照组。根据VMC病情严重程度,患者被进一步分为轻度组(60例)、中度组(56例)和重度组(54例)。测量比较各组外周血NLRP3 mRNA、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1 mRNA、白介素(IL)-1β和IL-18水平,分析VMC患者外周血单个核细胞(PBMCs)NLRP3 mRNA水平与Caspase-1 mRNA、IL-1β和IL-18水平的相关性,并采用ROC曲线分析NLRP3对VMC严重程度的预测价值。结果:与健康对照组比较,VMC组外周血NLRP3 mRNA[(0.98±0.08)比(2.04±0.25)]、Caspase-1 mRNA[(1.02±0.20)比(1.88±0.31)]、IL-1β[(20.10±5.10)pg/ml比(41.63±6.50)pg/ml]和IL-18[(29.50±6.13)pg/ml比(36.80±8.70)pg/ml]水平均显著升高,P均=0.001。在不同严重程度的VMC亚组间,上述指标水平均符合:轻度组<中度组<重度组,两两比较均有显著差异,P均=0.001。Pearson相关分析显示VMC患者PBMCs NLRP3 mRNA水平与Caspase-1 mRNA、IL-1β和IL-18水平呈显著正相关(r=0.650~0.830,P均=0.001)。ROC曲线分析显示,外周血NLRP3水平的曲线下面积(AUC)为0.885(95%CI 0.806~0.965),最佳工作点(OOP)为1.66NLRP3/GAPDH amol/amol,以此OOP对VMC严重程度进行预测,其敏感性和特异性分别为86.36%和80.00%。结论:外周血NLRP3炎性小体与病毒性心肌炎的发生、发展密切相关,对其病情严重程度的预测,有一定的价值。

氧化应激在孕期糖尿病致子代大鼠肾脏多巴胺D1受体功能障碍中的作用

目的探讨氧化应激在孕期糖尿病致子代大鼠肾脏多巴胺D1受体功能障碍中的作用。方法Sprague Dawley(SD)孕鼠10只,采用随机数字表法分为糖尿病组(孕期第0天腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg)和对照组(注射等体积的0.9%的生理盐水),每组5只。子代大鼠分为4组,分别为孕期对照子代大鼠溶剂组(对照子代溶剂组)、孕期对照子代大鼠抗氧化组(对照子代抗氧化组)、孕期糖尿病子代大鼠溶剂组(糖尿病子代溶剂组)和孕期糖尿病子代大鼠抗氧化组(糖尿病子代抗氧化组),每组10只。子代大鼠从4周龄开始,溶剂组给予正常饮水,抗氧化组给予抗氧化剂tempol(1.0 mmol/L溶于饮用水)饮水,直至研究结束期(20周龄)。无创鼠尾测压仪连续检测子代大鼠血压。检测子代大鼠肾脏氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)活性及多巴胺D1受体激动剂fenoldopam介导的尿钠排泄功能。检测子代大鼠肾脏G蛋白偶联受体激酶(GRK)2、GRK4及多巴胺D1受体的蛋白表达及磷酸化水平。结果糖尿病子代溶剂组大鼠平均动脉压明显高于对照子代溶剂组(P=0.013),而糖尿病子代抗氧化组大鼠平均动脉压则明显低于糖尿病子代溶剂组(P=0.038)。糖尿病子代溶剂组大鼠药物期尿流速和尿钠排泄率均明显低于对照组子代溶剂组(P均<0.01),糖尿病子代抗氧化组大鼠尿流速和尿钠排泄率则均明显高于糖尿病子代溶剂组(P均<0.01),而对照组子代抗氧化组与对照子代溶剂组比较差异则均无统计学意义(P均>0.05)。糖尿病子代溶剂组大鼠肾脏组织MDA活性明显高于对照子代溶剂组(P<0.01),SOD活性则明显低于对照子代溶剂组(P=0.013)。而糖尿病子代抗氧化组大鼠肾脏组织组MDA活性则明显低于糖尿病子代溶剂组(P<0.01),SOD活性明显高于糖尿病子代溶剂组(P=0.035)。糖尿病子代溶剂组大鼠肾脏GRK2和GRK4蛋白表达水平均明显高于对照子代溶剂组(P均<0.01),而糖尿病子代抗氧化组大鼠肾脏GRK2和GRK4蛋白表达水平则均明显低于糖尿病子代溶剂组(P均<0.01)。4组子代大鼠多巴胺D1受体蛋白表达水平差异无统计学意义(P=0.735)。糖尿病子代溶剂组大鼠肾脏多巴胺D1受体磷酸化水平明显高于对照子代溶剂组(P<0.01),而糖尿病子代抗氧化组大鼠肾脏多巴胺D1受体磷酸化水平则明显低于糖尿病子代溶剂组(P<0.01)。结论氧化应激参与了孕期糖尿病大鼠子代肾脏多巴胺D1受体功能障碍。