NFATc3在恶性黑素瘤中的表达及其对细胞存活和转移的影响

目的探讨NFATc3在不同恶性程度的恶性黑素瘤(malignant melanoma,MM)组织及细胞中的表达及意义。方法收集转移(11例)和未转移(20例)MM组织及癌旁组织(3例)石蜡切片;对比不同恶性度MM细胞系,运用免疫组化染色、Crispr/Cas9敲减技术并转染细胞,通过qPCR、Westernblot、CCK-8及流式细胞学等方法观察NFATc3表达对MM细胞活性、增殖凋亡与侵袭迁移的影响。结果(1)NFATc3在转移性MM组织中呈高表达,在癌旁组织中几乎无表达(P<0.01);在转移性MM细胞Mel-RM中,NFATc3 mRNA和蛋白水平较原位来源MM细胞A375显著上调(P<0.01);(2)敲减NFATc3后,敲减组的细胞存活率显著下降(P<0.01),而Caspase-3阳性荧光细胞比例则显著升高(P<0.01);流式细胞检测及TUNEL染色结果显示,敲减组中凋亡细胞比例增加(P<0.01);Western blot检测发现敲减组细胞中活化的Caspase-3(17×103)和Caspase-8(18×103)蛋白表达增高;(3)划痕实验及Transwell检测均表明敲减组中侵袭和迁移的细胞数目显著减少(P<0.01)。结论NFATc3在转移性MM中表达上调,且其表达水平与恶性程度相关。下调NFATc3能减少MM细胞存活、促进细胞凋亡并抑制细胞转移能力。