IDH1突变型胶质母细胞瘤临床病理分析

目的探讨IDH1突变型胶质母细胞瘤(glioblastoma IDH1-mutant,GBM IDH1-mut)的临床病理学特征。方法收集2014-2018年陆军军医大学大坪医院病理科10例GBM IDH1-mut患者临床及影像学资料,观察其病理学形态及免疫表型,检测其分子改变,并复习相关文献,探讨GBM IDH1-mut的临床病理特征及分子机制。结果GBM IDH1-mut患者10例,其中男性6例,女性4例;年龄28~63岁;7例累及额叶,以头昏、头痛为主要症状,5例有胶质瘤病史。显微镜下观察GBM IDH1-mut共同形态学特征为细胞密集,细胞呈圆形、梭形、多角形,细胞异型明显,核分裂象易见,微血管增生、坏死。微血管增生以肾小球样微血管增生为主,坏死表现为栅栏状坏死和凝固性缺血性坏死,根据累及范围分为大片和局灶。8例GBM IDH1-mut周围见WHOⅡ/Ⅲ胶质瘤成分。免疫组化结果:GFAP、Nestin、IDH1呈阳性表达,Olig-2可见不同程度表达(9/10),P53呈弥漫阳性表达(9/10);ATRX均不表达;Ki-67标记指数为10%~80%,而肿瘤细胞NeuN、NF、CD68、Syn、CD34均为阴性,CD34血管内皮细胞阳性。分子病理结果:10例均见IDH1R132H突变,9例MGMT启动子发生甲基化,1p/19q未缺失(0/4),未检测到TERT突变和BRAFV600E突变(0/3)。结论GBM IDH1-mut少见,坏死局限和微血管增生不显著提示预后较好,坏死广泛和微血管显著增生提示预后较差。

70例骨肉瘤临床病理分析及其Notch亚型表达的预后意义

目的探讨骨肉瘤的临床病理特征、Notch受体配体表达及其对预后的影响。方法收集2008-2015年陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院、陆军特色医学中心病理科70例骨肉瘤进行临床资料总结和组织学观察,并行Notch通路4个受体Notch 1～4和3个配体Jagged1、Jagged2、DLL4免疫组织化学染色。对54例病例行预后因素分析。结果 70例患者平均年龄25. 1岁,男女比例3∶2。95. 7%(67/70例)的患者就诊时处于临床Ⅱ～Ⅲ期。影像学表现显示:61例(87. 1%)存在骨质破坏,8例(11. 4%)髓腔累及,29例(41. 4%)骨皮质累及,28例(40%)有骨膜反应。组织病理学可见,40例(57. 1%)浸润性生长,70例肉瘤细胞和肿瘤性骨样组织。免疫组化结果显示:受体Notch4表达率最高,为91. 4%(64/70),其次分别为Notch1(87. 1%)、Notch3(68. 6%)、Notch2(33. 9%)。配体Jagged1、Jagged2、DLL4表达率分别为87. 1%(61/70)、84. 3%(59/70)、88. 6%(62/70)。42例患者(60%)接受了化疗,67例患者(95. 7%)进行了手术。54例有随访资料的患者平均生存时间41. 68个月。1、2年和5年生存率分别为87%、66%和30%。生存曲线比较示Enneking分期、术前化疗、Notch3表达与预后相关(P=0. 017),Cox比例风险回归模型分析Enneking分期、术前化疗、Notch3表达是独立预后因素。结论骨肉瘤5年生存率低,Enneking分期晚、未行术前化疗、Notch3表达的患者生存时间短。

研精覃思,见微知著——人工智能开启精准病理诊断新时代

精准医疗时代,病理学作为基础医学与临床医学的桥梁学科,担负着为疾病个体化治疗提供关键信息的重要任务。精准病理诊断为病理医师的工作带来巨大挑战,人工智能“赋能”病理诊断,通过整合患者临床信息、组织病理学影像、多组学信息,有效辅助精准病理诊断、预测患者预后、分子改变等,有望在精准病理诊断的新时代发挥至关重要的作用,开启精准病理诊断新时代。

超声量化评分系统联合细针穿刺鉴别诊断甲状腺结节的临床分析

目的探讨甲状腺超声量化评分系统联合超声引导下细针穿刺在鉴别甲状腺结节良恶性中的临床应用价值。方法回顾性分析2015年10月至2017年6月我院内分泌科收治的接受超声引导下细针穿刺且手术病理证实的100例甲状腺结节患者的超声声像图,分别对常规灰阶超声及多普勒超声显示的结节形状、回声强度、生长形状、钙化灶、光晕、回声结构、直径、边界、增长速度、颈部淋巴结等10项超声特征,按照超声量化评分表予以评分;超声引导下细针穿刺的细胞学结果采用贝塞斯达系统(Bethesda System)予以分级,以手术后病理结果为金标准,分别绘制超声量化评分系统、超声引导下细针穿刺及二者联合ROC曲线,比较三者的诊断价值。结果共纳入100例甲状腺结节患者,年龄20～73岁(45.29±11.70)岁,其中男性15例,女性85例。促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone TSH)高于正常值的11例、低于正常值的5例、在正常范围内84例。超声量化评分系统、超声引导下细针穿刺及二者联合的ROC曲线下面积分别为0.783、0.740、0. 844。超声量化评分系统的最佳评分切点是2,即>2分诊断为恶性,<2分诊断为良性。诊断效能的灵敏度为84. 37%,特异度为55. 56%,阳性预测率为77.14%,阴性预测率为66. 67%。细针穿刺的最佳分类切点是3,即细胞学分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级为良性,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ级为恶性,诊断效能的敏感度为79.69%,特异度为61.11%,阳性预测率为78.46%,阴性预测率为62.86%。二者联合的诊断效能的敏感度为85.94%,特异度为77.78%,阳性预测率为87. 30%,阴性预测率为75.68%。结论超声量化评分系统联合细针穿刺对甲状腺结节良恶性的诊断效能高于单一一种诊断方法。超声量化评分和细针穿刺分级对甲状腺结节良恶性的联合诊断回归方程为Logit(P)=0.797×超声评分+0.600×细针穿刺分级-3.746,以0.4为截断点能获得最大的诊断效能。

下调Notch3表达对骨肉瘤细胞生物学特性的影响

目的观察Notch3在骨肉瘤细胞中的表达及下调Notch3表达后对骨肉瘤细胞增殖、凋亡及侵袭迁移的影响,探讨Notch3在骨肉瘤细胞生物学功能中的作用。方法体外培养人骨肉瘤细胞MG63、Saos2、U2OS,采用Real-time PCR和Western blot检测3种骨肉瘤细胞系中Notch3的mRNA和蛋白表达水平;利用siRNA敲低Notch3在骨肉瘤U2OS细胞中的表达,并将细胞分为siNotch3组和阴性对照组,检测下调Notch3的表达后骨肉瘤细胞增殖、凋亡及侵袭、迁移等生物学特性的变化。结果Notch3在骨肉瘤细胞MG63、Saos2、U2OS中均呈阳性表达,并且在低级别骨肉瘤细胞系MG63中的表达明显低于高级别细胞系Saos2和U2OS(P<0.05),下调Notch3的U2OS细胞(siNotch3组)增殖、侵袭、迁移能力较阴性对照组减弱,凋亡率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在骨肉瘤细胞U2OS中下调Notch3的表达可明显抑制细胞的增殖、侵袭、迁移能力,促进凋亡。Notch3可能是Notch通路在骨肉瘤中的关键受体之一,并参与了骨肉瘤的发生、发展。

叶酸受体阳性CTC检测在恶性肺部结节辅助诊断中的应用

目的评价靶向叶酸受体(folate receptor,FR)阳性循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)检测方法在临床肺部结节良恶性诊断中的实用价值。方法选取2017年5月至2018年4月本院收治的肺部结节筛查患者288例,采用靶向FR CTC技术检测外周血中CTC含量;结合患者术后的病理检查结果,分析靶向FR CTC检测在肺部恶性肿瘤辅助诊断中的准确性、可行性。结果以8.7 Folate Units/3 mL为cut-off值,136例肺部恶性肿瘤的CTC水平显著高于152例肺部良性疾病患者(P<0.05)。136例肺部恶性肿瘤FR阳性CTC 107例,152例良性病变结节FR假阳性CTC 44例,总体上靶向FR CTC检测技术对肺部恶性肿瘤的检测灵敏度为78.7%,特异性为71.1%。特别是在Ⅰ期肺癌灵敏度达到76.9%,9例原位肺癌CTC检测均呈阳性,与肿瘤标志物、CT检查等比较,CTC检测对早期肺癌具有较高的辅助诊断价值。结论靶向FR CTC检测可以应用于肺部结节良恶性的筛查,对肺部恶性肿瘤的早发现有较好的辅助诊断价值。

印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响

目的通过体内外实验观察印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响。方法利用慢病毒建立稳定过表达TSSC3的骨肉瘤MTH细胞株,收集骨肉瘤细胞上清制备条件培养基(conditional medium,CM);通过划痕实验、Transwell实验及小管形成实验观察CM对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的迁移和小管形成能力的影响;RT-PCR、Western blot及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨肉瘤细胞中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)mRNA及蛋白水平变化;建立裸鼠移植瘤模型,免疫组化检测肿瘤组织中VEGFA蛋白及微血管密度(microvessel density,MVD)的表达情况。结果过表达TSSC3(over TSSC3)组CM抑制内皮细胞迁移和小管形成,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR、Western blot及ELISA检测结果显示,overTSSC3组细胞较对照组VEGFA mRNA和蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);裸鼠移植瘤免疫组化检测结果显示,overTSSC3组肿瘤中VEGFA蛋白表达量及MVD明显低于对照组。结论印记基因TSSC3可能通过下调VEGFA的表达进而抑制骨肉瘤血管生成。

肠道非B细胞淋巴瘤与克罗恩病的鉴别诊断

目的探讨克罗恩病(Crohn’s disease, CD)和肠道非B细胞淋巴瘤的临床鉴别诊断特点。方法回顾性分析我院2012年1月至2018年8月收治的肠道非B细胞淋巴瘤(n=27)和CD病(n=30)患者的临床资料,寻找具有统计学意义的指标,并进一步分析其在鉴别诊断中的意义。结果腹腔脓肿、瘘管、肛周病变、肠外表现、阑尾切除病史在CD组中更常见,差异有统计学意义(P<0.05);B症状和急性肠穿孔在肠道非B细胞淋巴瘤组中更常见(P<0.05)。血小板在CD组明显升高(P<0.001)。内镜及小肠CT中,节段性病变、回盲部受累、肠腔狭窄、铺路石样改变,以及梳样征、息肉样凸起、系膜血管增生在CD组中更常见(P<0.05),腹腔淋巴结融合增大在肠道非B细胞淋巴瘤组中更为常见(P<0.05)。结论临床需结合小肠CT、检验及内镜寻找CD和肠道非B细胞淋巴瘤的鉴别诊断点,从而提高确诊率。疑诊肠道非B细胞淋巴瘤者需多次内镜并多块深挖活检明确病理诊断。

内皮细胞通过抑制LGI4表达激活NOTCH4信号通路促进骨肉瘤细胞转移

目的筛选参与内皮细胞调控骨肉瘤转移的关键分子——富亮氨酸胶质瘤失活蛋白4(leucine-rich glioma inactivated proteins 4,LGI4),并分析LGI4参与骨肉瘤转移的功能及分子机制。方法建立人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)-骨肉瘤细胞共培养模型,利用全转录组测序方法并结合相关文献筛选表达差异倍数显著的基因,采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和Western blot验证候选基因LGI4的表达变化。转染LGI4过表达质粒建立LGI4过表达骨肉瘤稳定细胞系143B和MTF;实验分为阴性对照组(正常培养的骨肉瘤细胞)、共培养组(HUVECs与骨肉瘤细胞共培养)、共培养基组(HUVECs培养基与骨肉瘤细胞共培养)、载体对照组(转染过表达对照载体)和LGI4组(转染过表达LGI4载体),采用Transwell和划痕实验检测骨肉瘤细胞的迁移、侵袭能力。利用裸鼠体内转移模型验证LGI4对骨肉瘤细胞远处转移的影响;采用生物信息学分析LGI4的下游潜在靶信号通路,并利用相关抑制剂进行回复实验,明确靶信号通路在LGI4调控骨肉瘤转移中的作用。结果人骨肉瘤细胞系143B及MTF与HUVECs共培养后LGI4表达降低(P<0.05);与阴性对照组相比,共培养组和共培养基组的迁移侵袭能力明显增加,而LGI4组的迁移侵袭能力较载体对照组比较明显减弱(P<0.05)。裸鼠体内实验证明LGI4组的转移能力受到抑制;进一步分析发现NOTCH4信号通路是LGI4的下游靶信号通路,功能回复实验证实LGI4通过抑制NOTCH4信号通路参与骨肉瘤转移(P<0.05)。结论内皮细胞通过抑制骨肉瘤细胞LGI4表达激活NOTCH4信号通路促进肿瘤转移。

RanBP9激活线粒体途径诱导骨肉瘤细胞凋亡

目的探讨过表达RanBP9对骨肉瘤细胞凋亡的作用及其机制。方法采用Real-time PCR、Western blot检测成骨细胞及不同骨肉瘤细胞株(SaOS2、MG63、U2OS和HOS)中RanBP9的mRNA和蛋白表达水平。使用慢病毒建立稳定过表达RanBP9的SaOS2骨肉瘤细胞模型,并利用流式细胞仪及TUNEL染色法检测过表达RanBP9组及对照组骨肉瘤细胞凋亡率,使用线粒体膜电位检测过表达RanBP9组及对照组细胞凋亡过程中发生的线粒体膜电位变化。结果RanBP9在成骨细胞和骨肉瘤细胞株中均呈阳性表达,在成骨细胞中的表达显著高于骨肉瘤细胞(P<0.05),并且在恶性程度较低的骨肉瘤细胞株MG63和HOS中的表达要高于恶性程度较高的细胞株SaOS2和U2OS(P<0.05)。过表达RanBP9降低骨肉瘤细胞的增殖能力,促进凋亡率上升(P<0.05)。过表达RanBP9明显增加Caspase-3和Cytc的表达水平,并同时上调Bax/Bcl-2的比率(P<0.05);过表达RanBP9破坏线粒体膜电位,诱导内源性线粒体凋亡信号转导途径。结论RanBP9通过上调内源性线粒体通路发挥诱导骨肉瘤细胞凋亡的作用。

IBP与p53蛋白在胃腺癌中的表达及临床意义

目的探讨干扰素调节因子4结合蛋白(IRF-4 binding protein,IBP)在胃腺癌细胞及临床病理组织中的表达、与p53蛋白表达的相关性及临床意义。方法通过免疫荧光、Real-time PCR和Western blot检测胃腺癌细胞株MKN-45、SGC-7901中IBP的表达情况;收集2015-2016年在本科确诊的胃腺癌HE切片对应存档蜡块150例,采用免疫组化EnVision法检测并标记IBP在150例胃腺癌标本中的表达,并检测突变型p53蛋白的表达,分析IBP在胃腺癌组织中的表达及其与胃腺癌各临床病理资料因子相应的关系,采用Spearman等级相关分析IBP与p53蛋白表达的相关性。结果免疫荧光检测显示IBP主要表达在胃腺癌细胞株MKN-45的胞质和胞膜中,主要以胞膜表达为主。Western blot及Real-time PCR均证实胃腺癌细胞株MKN-45、SGC-7901中均有IBP的表达,且在MKN-45细胞中的表达高于SGC-7901细胞(P <0. 05)。在胃腺癌组织中,IBP的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织(P <0. 01);p53蛋白的阳性表达率也显著高于正常胃黏膜组织(P <0. 01); IBP阳性表达与病理分级呈正相关(P <0. 05),与患者年龄、性别、胃壁浸润深度、TNM分期、Lauren分型及肿瘤部位无相关性(P> 0. 05); p53蛋白的阳性表达与患者的年龄、性别、病理分级、Lauren分型具有相关性(P <0. 05),与患者胃壁浸润深度、TNM分期及肿瘤部位无相关性(P> 0. 05);在胃腺癌中IBP与p53蛋白表达没有显著的相关关系(r=0. 013,P> 0. 05)。结论 IBP在胃腺癌细胞株及临床病理组织中高表达,主要表达于胞膜、胞质;p53蛋白在胃腺癌临床病理组织中高表达,主要表达于胞核; IBP在胃腺癌组织中高表达与患者病理分级正相关,在胃腺癌组织中IBP与p53蛋白没有明显的相关关系。

以垂体瘤首诊的多发性内分泌腺瘤病1型4例报告并文献复习

目的总结4例以垂体瘤首诊的多发性内分泌腺瘤病1型(multiple endocrine neoplasia type 1,MEN1)患者的临床特点及诊治过程。方法回顾性分析2016年10月至2020年12月因垂体瘤或垂体瘤术后至陆军军医大学第二附属医院就诊的4例MEN1患者的临床表现、生化指标、影像学资料、术后免疫组化染色及基因检测结果,并对相关文献进行复习。结果4例患者,其中男性1例,女性3例,年龄23~64岁。①3例为垂体大腺瘤(直径≥10 mm),术后免疫组化染色证实生长激素(growth hormone,GH)+催乳素(prolactin,PRL)混合型瘤2例,GH瘤1例;1例为垂体微腺瘤(直径<10 mm),临床诊断为无功能瘤;②4例患者均合并甲状旁腺功能亢进,其中1例合并胰腺神经内分泌肿瘤(G1期),1例同时合并胰腺神经内分泌肿瘤(G1期)和双侧肾上腺占位,1例合并胰头占位;③2例患者接受全外显子测序,分别检测到c.249_252delGTCT和c.1277delG 2个MEN1基因杂合突变,后者为首次发现的基因突变位点。结论以垂体瘤首诊的MEN1患者,功能型大腺瘤多见,应常规完善相关内分泌激素、生化及影像学检查,并合理进行基因检测辅以多学科诊疗。

TBL教学法在呼吸系统病理教学实践中的应用

病理学是研究人体疾病发生的原因、发生机制、发展规律以及疾病过程中机体的形态结构、功能代谢变化和病变转归的一门基础医学科学。疾病的发生于进展是一个极其复杂的过程:在致病因子与机体反应功能的相互制约与平衡之的作用下,患病机体内部相应的形态结构、代谢及功能均会发生各种变化,这些都是研究和认识疾病的重要依据,而病理学的任务就是运用各种方法研究疾病的原因(病因学)、在病因作用下疾病发生发展的过程(发病学)以及机体在疾病过程中的功能、代谢和形态结构的改变,阐明其本质,从而为认识和掌握疾病发生发展的规律,为防治疾病,提供必要的理论基础。病理学既是医学基础学科,同时又是一门实践性很强的具有临床性质的学科(诊断病理学或外科病理学),它被认为是联系临床医学与基础医学的桥梁学科,既关注机体在疾病发生、发展及转归过程中大体形态及细微结构的改变,也担负着为日常临床诊疗提供明确病理诊断的重任。这一学科特点要求病理教员在课程设计及授课过程中,尤其要注重对学生批判思维、见微知著等观念的培养,以期为后续顺利开展临床课程及造就优秀病理医师、临床医师打下坚实基础。

潜在癌基因TC2N在胶质瘤中的表达、临床意义及下游信号通路的综合分析

目的 探究TC2N表达在胶质瘤中的临床病理意义及其下游可能的信号通路,并分析TC2N成为抗癌治疗的潜在治疗靶点的可能性。方法基于两个公共数据库,Oncomine和The Cancer Genome Atlas(TCGA)对TC2N在胶质瘤中的表达进行了分析;单因素和多因素回归分析TC2N表达与胶质瘤患者预后的关系。利用基因集合富集分析(GSEA)和共表达网络用于探究TC2N下游可能的信号通路。结果 发现TC2N在肿瘤组织中表达显著高于非肿瘤组织。对TC2N表达与临床病理参数进行分析发现,TC2N表达与放疗史(n=530,P=0.010)和组织学类型(n=530,P<0.001)显著相关。TC2N高表达与胶质瘤患者预后呈负相关,尤其是对于有放疗史的胶质瘤患者,但与无放疗史的胶质瘤患者预后没有相关性,TC2N表达与TLR4信号通路呈正相关。结论 TC2N在胶质瘤中高表达,是胶质瘤患者生存预后的一个独立预后标志物。