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Gpr124对高糖环境下视网膜微血管内皮细胞增殖、迁移和血管形成的调控作用
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作者 王玉雯 李芙蓉 袁容娣 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期2101-2109,共9页
目的研究高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cell,HRMEC)中G蛋白偶联受体124(Gpr124)表达的变化,以及干扰Gpr124对HRMEC的调控作用。方法免疫荧光观察Gpr124在HRMEC中的表达;高糖刺激HRMEC,将... 目的研究高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cell,HRMEC)中G蛋白偶联受体124(Gpr124)表达的变化,以及干扰Gpr124对HRMEC的调控作用。方法免疫荧光观察Gpr124在HRMEC中的表达;高糖刺激HRMEC,将细胞分为空白组和高糖组,CCK-8、EdU检测细胞活力与增殖情况;病毒抑制Gpr124表达后,将细胞分为空白对照组、高糖对照组、高糖+shRNA组以及高糖+Gpr124 shRNA组,划痕实验评估细胞迁移,基质凝胶评估细胞小管形成能力。Western blot检测Gpr124、VEGFA、MMP9和β-catenin相对蛋白表达水平。结果相较于空白组,HRMEC在高糖组中显示出显著提升的细胞活力和增殖细胞数(P<0.01)。高糖环境下,Gpr124、VEGFA以及MMP9的表达水平也显著增加(P<0.01)。同时,在各个时间点,高糖对照组的迁移面积以及体外血管形成面积和管径长度均显著高于空白对照组(P<0.01)。然而,在敲低Gpr124的表达后,高糖+Gpr124 shRNA组的HRMEC在迁移和体外血管形成能力上相较于高糖+shRNA组有显著的降低(P<0.01),并且高糖+Gpr124 shRNA组相比于高糖+shRNA组VEGFA、MMP9以及β-catenin蛋白表达减少(P<0.01)。结论Gpr124能够调控高糖环境下HRMEC的增殖、迁移以及管形成能力,并且还可以抑制VEGFA和MMP9的过度表达,这一影响可能是通过调节Wnt/β-catenin经典通路来实现的。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 G蛋白偶联受体124 血管内皮细胞 细胞迁移实验 血管形成
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Angptl2通过PirB激活视网膜Müller细胞参与眼内炎症 被引量:2
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作者 黄瑶 范围 +1 位作者 杨梅 袁容娣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期39-44,共6页
目的探讨血管生成素样蛋白2(angiopoietin-like protein 2,Angptl2)在眼内促进炎症的作用和机制。方法实验组大鼠玻璃体腔注射0.2 mg LPS,对照组加入等量PBS,RT-PCR检测两组大鼠视网膜Angptl2的表达。以原代培养的SD大鼠视网膜Mül... 目的探讨血管生成素样蛋白2(angiopoietin-like protein 2,Angptl2)在眼内促进炎症的作用和机制。方法实验组大鼠玻璃体腔注射0.2 mg LPS,对照组加入等量PBS,RT-PCR检测两组大鼠视网膜Angptl2的表达。以原代培养的SD大鼠视网膜Müller细胞为研究对象,加入外源性Angptl2后,细胞计数观察Müller细胞增殖变化,免疫荧光观察Müller细胞GFAP的表达以及RT-PCR检测促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达变化。免疫荧光观察配对免疫球蛋白样受体B(paired immunoglobulin-like receptorB,PirB)在Müller细胞上的表达;Müller细胞外源性加入Angptl2后,再分别转染Ad-PirB-siRNA腺病毒载体和腺病毒对照Ad-C,分为PBS对照组、Angptl2组、Ad-C+Angptl2组、Ad-PirB-siRNA+Angptl2组,RT-PCR观察炎症因子的表达变化。结果 LPS组Angptl2 mRNA表达较对照组明显增加(P<0.05);Angptl2组较PBS对照组Müller细胞增殖增多,GFAP表达增加,IL-1β、IL-6、TNF-α表达也增加,差异具有统计学意义(P<0.05);Müller细胞表达Angptl2的配体PirB,Ad-PirB-siRNA干扰Müller细胞PirB表达后,Ad-PirB-siRNA+Angptl2组较Angptl2组和Ad-C+Angptl2组炎症因子IL-6、TNF-α降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Angptl2通过PirB激活Müller细胞分泌促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α参与眼内炎症。 展开更多
关键词 血管生成素样蛋白2 配对免疫球蛋白样受体B 视网膜 MÜLLER细胞 炎症
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