军医大学本科学员创新能力现状与评价

目的调查陆军军医大学在校本科学员的创新能力现状，探讨军医大学本科学员创新能力培养与教育中可能存在的问题，并提出相关建议。方法采用自制的“军医大学本科学员创新能力现状问卷”对不同年级、不同专业和不同学制的部分在校本科学员225名进行调查，共收回有效问卷210份。问卷项目主要包括学员基本信息及创新意识、创新思维、创新技能、知识基础等5个方面内容。采用SPSS19．0统计学软件对不同年级、不同专业和不同学制本科学员的创新能力评分行t检验或单因素方差分析，检验水准为α=0．05。结果本科学员的创新能力总体评分为（70．5±8．2），其中≥70分的学员占总体的50．5％，≥85分的学员占总体的3．3％。不同年级本科学员之间的总体创新能力无统计学意义（P=0．435），四年级学员的创新思维能力明显高于二年级学员[（77．0±10．7）VS．（72．6±10．9），P=0．030）]，一年级学员的知识基础得分明显高于四年级学员[（76．2±6．0）VS．（69．3±8．7），P=0．014）]。不同专业中临床医学本科学员的创新能力总体评分最高，明显高于预防医学及其他专业本科学员[（72．5±8．8）VS．（69．9±7．5），P=0．035；（72．5±8．8）VS．（66．7±7．9），P=0．004]；预防医学八年制与五年制本科学员的创新能力总体评分及各一级指标评分之间均无统计学意义（P〉0．05）。结论军医大学本科学员的总体创新能力较强，不同年级、专业和年制学员之间在创新意识、创新思维、创新技能及基础知识等方面各具优势，需进一步探索适应于军医大学本科学员自身特点的创新能力教育和培训体制研究。、

单分子技术研究T7解旋酶的解旋与换链

单分子荧光共振能量转移(smFRET)和磁镊(MT)技术目前广泛应用于研究分子马达.相较于常规技术,其具有高精度及动态观测的优点.本文研究对象为T7解旋酶,是六聚体解旋酶的典型代表.研究表明,这种解旋酶主要消耗脱氧胸苷三磷酸(dTTP)提供能量,且仅能沿着5′-3′单向进行行走和解旋工作.目前对于六聚体解旋酶的解旋和换链机制的认知仍然存在着诸多问题,因此本文主要以此作为切入点开展研究.首先通过运用smFRET技术研究T7解旋酶在不同DNA底物上的解旋现象,发现其需要3′-尾链参与到解旋工作中,但其为单链或双链结构并无明显区别;通过改变脱氧核糖核酸(DNA)序列中的GC含量,发现T7解旋酶随着序列中GC含量的升高会更容易在解旋过程中发生回退现象,导致解旋长度明显缩短;通过进一步分析发生回退先的实验数据,发现T7解旋酶除了可以瞬时回退到叉形DNA岔口或脱落外,还可以缓慢回退到叉形DNA岔口;运用MT技术研究该解旋酶,同样发现这种缓慢回退现象的存在.根据T7解旋酶解旋DNA遵循的单向性和极性,其只能沿着5′到3′方向进行行走和解旋.因此,本文推测这种缓慢回退的现象可能是解旋酶从5′-链转移至3′-链上,即发生换链过程;最后,本文提出了T7解旋酶在解旋过程中进行换链的模型,将有助于进一步理解环状六聚体解旋酶行使其功能的分子机制.

WFDC1基因在肝癌中的表达及其诊断和预后价值

目的:研究WFDC1基因在肝癌组织和细胞中的表达变化,探讨其与肝癌临床病理指标及生存预后之间的关系,为肝癌的诊断以及预后判断提供参考依据。方法:采用q PCR法分别检测肝癌患者的肿瘤组织和癌旁组织、MC-LR诱导的人肝细胞L02恶性转化细胞和肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2、Hep3B、Huh-7中WFDC1 mRNA的表达水平。基于TCGA数据库,分析WFDC1基因在肝癌患者肿瘤组织(331例)和癌旁组织(50例)中的表达及其与临床病理指标和生存预后的关系。结果:qPCR检测结果表明,与癌旁组织比较,WFDC1 mRNA在肝癌组织、MC-LR诱导的L02恶性转化细胞以及肝癌细胞中的表达均显著下调(P<0.05)。TCGA数据库中WFDC1 mRNA表达分析也表明,肝癌组织的表达显著低于癌旁组织(P<0.01),且WFDC1 mRNA的表达下调与肿瘤分级和临床分期高度相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析表明,WFDC1 mRNA高表达患者生存时间高于低表达患者(Log-rank=4.80,P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,WFDC1 mRNA是一个特异度和灵敏度较好的肝癌诊断指标(AUC=0.829)。结论:WFDC1基因可能是一个抑癌基因,检测该基因的表达水平对肝癌患者的诊断和预后判断具有参考价值。

基于NR3C2相关免疫调节基因的乳腺癌预后模型构建与验证

目的通过生物信息学方法分析NR3C2基因在乳腺癌中的免疫作用并构建预后模型.方法(1)分别以癌症基因组图谱(TCGA)数据库中的乳腺癌队列和基因综合表达(GEO)数据库中的GSE42568队列作为训练集(113例癌旁样本和1019例乳腺癌样本)和测试集(17例癌旁样本和104例乳腺癌样本),比较上述2个队列中NR3C2在癌旁样本和乳腺癌样本中的mRNA表达;通过TCGA队列、Kaplan-Meier plotter队列(4929例乳腺癌样本)分析NR3C2表达对无复发生存期(RFS)的影响.(2)利用基因集富集分析(GSEA)探讨NR3C2潜在的生物学功能,通过单样本基因集富集分析(ssGSEA)定量评估24种免疫细胞,以皮尔森系数计算NR3C2和24种免疫细胞及70个免疫调节基因的相关性.(3)通过多元逐步Cox回归的方法在TCGA队列中构建NR3C2相关免疫调节基因的预后模型,按照中位风险值将TCGA队列分为高、低风险组,比较2组的无复发生存率,采用受试者操作特征曲线(ROC)计算模型的敏感度和特异度,并在GSE42568队列中进行验证;结合其他临床参数,通过多因素Cox回归分析该模型的独立预后性能.(4)在TCGA队列中,基于临床分期和风险值构建列线图,利用校准曲线对其准确性进行评价,通过时间相关曲线下面积(tAUC)比较不同指标预测的准确度.(5)为了验证NR3C2基因在mRNA和蛋白水平上的表达是否一致,本研究另外收集了2021年9月于陆军特色医学中心乳腺甲状腺外科进行手术切除的3例乳腺癌患者的临床组织样本,通过Western blot实验检测其癌旁组织和癌组织中NR3C2的蛋白表达量.结果(1)TCGA样本分析结果显示:与癌旁组织相比,NR3C2的mRNA表达量在乳腺癌组织中显著下降(2.59±0.43比0.98±0.62,t=35.990,P<0.001).在GSE42568队列中,乳腺癌组织中NR3C2的mRNA表达量比癌旁组织显著下降(5.35±1.47比3.32±1.12,t=7.096,P<0.001).生存分析结果显示:在TCGA队列、Kaplan-Meier plotter队列中,NR3C2表达和乳腺癌患者的RFS呈正相关(HR=0.667、0.725,95%CI:0.458~0.972、0.653~0.804,P均<0.050).(2)GSEA结果提示:NR3C2主要参与JAK-STAT和TGF-β等免疫相关信号通路.相关性分析发现:NR3C2的mRNA表达和19种免疫细胞的浸润程度及43个免疫调节基因的表达均显著相关(P均<0.050).(3)将上述43个NR3C2相关的免疫调节基因纳入Cox回归分析,构建了13个免疫调节基因组成的预后模型,风险截断值为0.988.生存分析提示在TCGA队列及GSE42568队列中,高风险组的RFS明显低于低风险组(HR=2.682、2.389,95%CI:1.839~3.910、1.343~4.248,P均<0.010);AUC为0.758、0.618(95%CI:0.662~0.857、0.545~0.758,敏感度:0.833、0.538,特异度:0.614、0.714,P均<0.010).多因素Cox回归分析发现该模型的风险值可作为乳腺癌独立的预后因子(HR=1.259、1.163,95%CI:1.187~1.336、1.068~1.266,P均<0.001).(4)基于临床分期和风险值构建的列线图可以预测乳腺癌患者3年、5年和8年的RFS,校准曲线提示其具有较好的预测准确性,tAUC提示其优于临床分期和预后模型.(5)Western blot实验结果显示:NR3C2的蛋白表达量在乳腺癌组织中显著降低.结论NR3C2是乳腺癌患者潜在的免疫治疗靶点和预后生物标志物.