多丝电离室系统对加速器剂量学影响的研究

目的:分析多丝电离室系统对ELEKTA Synergy加速器射野剂量学的影响,为进一步开展临床应用提供支持。方法:应用三维水箱分别测量加速器有无多丝电离室系统时不同射野下的百分深度剂量(percentage depth dose,PDD)及不同射野、不同深度的枪靶(G-T)方向、左右(L-R)方向的离轴比(off-axis ratio,OAR),并测量加速器有无多丝电离室系统时的吸收剂量。结果:各射野PDD、OAR不受多丝电离室系统影响;吸收剂量受其影响,使射线衰减达到7%。结论:在使用多丝电离室系统时不需修改计划系统的射野参数,但需要依据射线传输因子对患者计划进行剂量修正。

抑制LITAF基因对人脑胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡和放疗敏感度的影响

目的分析人脑胶质母细胞瘤组织中LITAF基因mRNA表达情况,并通过抑制人脑胶质母细胞瘤U251细胞中LITAF基因表达,观察其对U251细胞增殖、凋亡和放疗敏感度的影响。方法分析TCGA数据库中人脑胶质母细胞瘤组织中LITAF基因mRNA表达;通过RNAi抑制U251细胞中LITAF基因表达,采用胸腺嘧啶核苷类似物(EDU)检测U251细胞增殖变化,流式细胞仪分析U251细胞凋亡的变化,克隆形成实验和流式细胞分析U251细胞放疗敏感度的变化。结果 TCGA数据库分析结果显示人脑胶质母细胞瘤组织LITAF表达显著高于正常脑组织;抑制LITAF表达后,U251细胞的增殖和凋亡未见明显变化,但在电离辐射后,LITAF抑制组U251细胞凋亡显著低于对照组,克隆形成显著高于对照组,对放疗敏感度减弱。结论 LITAF基因高表达于人脑胶质母细胞瘤组织,抑制人脑胶质母细胞瘤U251细胞中LITAF基因表达不影响细胞的增殖和凋亡,但显著降低细胞的放疗敏感度。

造血干细胞S100A8特异性敲除鼠表型分析及对红系前体细胞发育的影响

目的通过构建造血干细胞S100A8基因特异性敲除鼠,对其表型进行初步研究,并分析其对红系前体细胞发育的影响。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建造血干细胞S100A8基因特异性敲除鼠;观察分析子代鼠大小便、毛发、体质量、性别比例及细胞形态等生长发育情况;构建荷瘤和贫血模型,分析红系前体细胞变化发育情况。结果成功构建了造血干细胞S100A8基因敲除鼠,该鼠可生长发育繁殖,小鼠偶会现脱毛现象,8周龄前体质量低于野生型鼠;荷瘤及贫血模型中,红系前体细胞比例变化趋势相似;白细胞及其亚群数量未见明显统计学差异。结论首次成功构建了造血干细胞S100A8基因敲除鼠,为研究其功能提供了新的模型;该基因特异性敲除会影响小鼠早期表型,但不会对红系前体细胞发育产生影响。

E2F1上调CCNA2表达影响卵巢癌增殖能力

目的探讨转录因子E2F1上调细胞周期蛋白A2 (CCNA2)表达对卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响。方法利用TCGA网站分析卵巢癌组织与卵巢正常组织中E2F1与CCNA2的mRNA表达情况,利用TCGA卵巢癌RNA-seq数据分析E2F1基因与CCNA2基因表达相关性,利用小RNA敲低E2F1表达,利用q PCR检测E2F1、CCNA2 mRNA表达水平,利用western blot检测E2F1、CCNA2蛋白表达水平,EDU流式检测法检测SKOV3细胞增殖情况,利用网站预测CCNA2启动子区域E2F1结合位点。结果卵巢癌组织中E2F1及CCNA2的表达明显高于正常卵巢组织,卵巢癌中E2F1表达与CCNA2表达具有相关性,敲低E2F1表达会减少CCNA2的表达,敲低E2F1的表达会抑制SKOV3细胞增殖,CCNA2转录起始位点附近存在E2F1转录因子的结合位点。结论 E2F1上调CCNA2表达促进卵巢癌细胞系SKOV3细胞的增殖。