低氧条件下急性肺损伤小鼠肺血管通透性变化

目的:观察低氧环境下急性肺损伤(ALI)小鼠肺水含量、组织病理学及血管通透性变化,探讨低氧环境下ALI致死的可能机制。方法:280只昆明白小鼠,分为常氧+PBS组(CK组,n=35)、低氧+PBS组(HP组,n=35)、常氧+内毒素(LPS)组(NL组,n=60)和低氧+LPS组(HL组,n=150)。NL组和HL组采用LPS诱导致ALI模型,CK组和HP组给予等量PBS,随后按分组要求分别于常氧条件和低压氧仓中饲养,于造模后第1、3、7天观察各组小鼠肺水含量、肺组织病理学评分、肺血管通透性等指标变化,同时观察各组小鼠7天内的存活率,并比较分析各组差异。结果:与其它三组比较,HL组小鼠实验7天后死亡率明显增加(P<0.05);在LPS所致ALI后,HL组肺水含量显著高于NL组(P<0.05);肺组织HE染色结果显示,HL组出现较为严重的肺间质水肿、肺泡腔缩小、血管肥大、肺间质增厚等病理变化,且肺组织中伊文思蓝含量在第7天显著高于NL组(P<0.01)。结论:低氧条件下ALI死亡率增加可能与肺间质屏障功能受损及肺血管通透性增加有关。

胍丁胺通过AMPK途径诱导间充质干细胞的凋亡

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有强大的组织再生修复及免疫调节功能,广泛应用于损伤性和免疫相关性疾病的治疗,但其过早凋亡会降低临床疗效,且机制不明。研究发现,胍丁胺(agmatine,AGM)可通过抑制一氧化氮(nitric oxide,NO)生成发挥抗炎功能,对脓毒症小鼠具有保护效应。移植MSCs治疗脓毒症也是一种有效的治疗方式,但二者是否存在相互作用及AGM是否影响MSCs生存却未见报道。该研究旨在探讨AGM对MSCs生存的影响及其分子机制。研究MSCs之前,该研究通过检测细胞表面marker(CD29、CD34、CD44、CD45、CD90和CD105)及三系分化(成脂、成骨、成软骨)对其进行了鉴定。为了深入探究AGM对MSCs的作用,使用流式细胞术检测AGM处理后MSCs的凋亡率(Annexin V)以及Western blot检测经AGM处理后MSCs的凋亡相关信号通路蛋白p-AMPK、p-mTOR、p-S6K1、Cl-Caspase3的表达水平。之后进一步添加AMPK siRNA检测AGM诱导MSCs凋亡的分子机制。结果显示,AGM在体外以剂量依赖性的方式,通过抑制mTOR信号通路诱导AMP活化蛋白激酶(AMPK)活化,导致凋亡相关蛋白表达上调,从而介导MSCs凋亡。而AMPK siRNA处理能明显恢复mTOR通路,并抑制AMPK活化,使凋亡相关蛋白表达降低,进而减弱AGM诱导的凋亡效应。该文揭示了AGM可通过AMPK途径诱导MSCs的凋亡。