N-乙酰半胱氨酸酰胺对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症的保护作用及机制研究

目的研究N-乙酰半胱氨酸酰胺(NACA)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症的保护作用及作用机制,为NACA治疗脓毒症提供理论依据。方法CCΚ-8法检测NACA和N-乙酰半胱氨酸(NAC)对RAW264.7细胞活力的影响;采用ELISA检测NACA和NAC对LPS诱导的RAW264.7细胞上清中TNF-α和IL-6水平;qRT-PCR检测NACA对LPS诱导的RAW264.7细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β、ATF4、CHOP的mRNA表达的影响;Western blot检测NACA对LPS诱导的RAW264.7细胞中TLR4/NF-κB及PERΚ/ATF4/CHOP信号通路中关键蛋白表达的影响。结果0.1~5 mmol/L的NACA和NAC对RAW264.7细胞活力无明显的影响(P>0.05)。1 mmol/L和5 mmol/L的NACA和NAC可显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞上清中TNF-α和IL-6的水平(P<0.01),且NACA的降低效果优于统计量的NAC。1 mmol/L和5 mmol/L的NACA也可显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β、ATF4、CHOP mRNA的表达(P<0.05、P<0.01)。Western blot结果表明,1 mmol/L和5 mmol/L的NACA可显著降低TLR4、p-IκB、p-65、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、Bip和CHOP蛋白的表达(P<0.05、P<0.01)。结论NACA可能通过TLR4/NF-κB及PERΚ/ATF4/CHOP信号通路抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞的炎症反应,为NACA治疗脓毒症的抗炎性药物筛选提供了实验依据。

重视谷氨酰胺在烧伤临床的规范应用

谷氨酰胺(glutamine)作为一种具有多种生理功能的营养类药物已广泛应用于临床治疗,在维护肠黏膜屏障、减轻骨骼肌消耗、维持机体酸碱平衡和免疫稳态等方面发挥了重要作用。尽管谷氨酰胺已在烧伤临床应用多年,多个临床营养与烧伤的指南/共识也予以明确推荐[1-5],但在具体使用过程中还存在适应症把握不准确、药物剂量设计不合理以及给药途径和疗程选择不恰当等问题,有必要规范谷氨酰胺在烧伤临床的应用,以提升用药的安全性与有效性。

沉默PRR14基因抑制结肠癌HCT116细胞增殖

已有报道显示,富脯氨酸蛋白14(proline-rich protein 14,PRR14)促进肿瘤的发生发展,但具体作用机制仍不清楚。本文以结肠癌细胞为模型,探索其对细胞增殖和细胞周期进程的影响。qPCR和Western印迹检测发现,PRR14在4个结肠癌细胞系中呈现高水平表达。合成特异靶向PRR14基因的siRNA,转染结肠癌HCT116细胞。检测发现,PRR14基因表达下调约70%。CCK8结果显示,沉默PRR14后各时间点细胞增殖能力均显著降低,克隆形成实验细胞克隆数减少约40%;流式细胞仪结果显示,沉默PRR14后,G1期细胞比例升高约10%,S期细胞比例降低约14%;BrdU标记免疫荧光检测结果显示,BrdU阳性细胞比例减少约50%,表明细胞DNA合成速率显著降低。机制分析表明:促G1/S期转换基因周期蛋白依赖性激酶2(cyclin dependent kinase 2,CDK2)mRNA水平降低约85%,对应的蛋白质水平也明显降低,G1/S期转换抑制因子周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(cyclin dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A/P21)和周期蛋白依赖性激酶抑制因子1B(cyclin dependent kinase inhibitor 1B,CDKN1B/P27)mRNA水平分别升高约1.8倍和5倍,对应的蛋白质水平也明显升高。沉默PRR14表达,G1/S期相关基因表达紊乱,导致细胞G1期阻滞并抑制细胞增殖。结肠癌细胞中PRR14高表达可促进癌细胞恶性增殖。

重视烧伤创面愈合中的蛋白质营养问题

创面愈合是指因多种致伤因素造成组织缺损后,局部组织通过再生、修复与重建以恢复组织结构和功能完整性的过程。创面一旦形成,全身和局部的代谢将迅速发生改变,尤其是创面局部的合成代谢明显增强,以满足创面修复所需。此时机体对营养物质的需求增加,营养成为创面修复的关键因素之一。

脓毒症肝损伤中的裂解性细胞死亡

脓毒症是危重症患者死亡的首要因素。肝脏损伤和功能障碍是脓毒症患者的主要并发症和预警死亡的独立危险因素,研究其发生机制并以此寻找相应的干预措施对降低脓毒症患者的死亡率具有重要意义。感染和炎症等多种因素所致的肝脏细胞死亡是脓毒症患者并发肝损伤的基础事件和核心机制。近年来,有关裂解性细胞死亡介导包括脓毒症在内的各类疾病所致肝损伤的作用已成为该领域的热点研究方向。该文拟围绕裂解性细胞死亡的主要类型、调控机制及其参与脓毒症肝损伤的作用与潜在干预效应进行综述,以期为深入理解脓毒症肝损伤的发病机制和寻找新的防治靶点提供可能的思路与方向。

重视烧伤创面愈合中的葡萄糖代谢以优化营养治疗策略

皮肤烧伤后,机体通过炎症反应、细胞增殖和组织重塑对受损组织进行修复,恢复组织结构和功能的完整性,从而实现创面愈合。在此过程中,蛋白质合成代谢的作用一直备受关注,而葡萄糖的作用往往被忽视,甚至一度被认为是影响创面愈合的危险因素。因此,应重视对烧伤创面愈合不同阶段葡萄糖代谢特点、葡萄糖代谢对创面修复调控作用和烧伤患者葡萄糖供给策略的研究,以正确认识葡萄糖在烧伤创面修复中的作用,指导临床合理使用葡萄糖。