体外负压培养对人BMSCs BMP-2、VEGF mRNA表达水平的影响

[目的]探讨体外负压培养对人骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived stroma cells,BMSCs)骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达水平的影响。[方法]取第3代BMSCs分为实验组和对照组,实验组进行间歇性负压培养,设置压力为17 kPa,30 min/次,4次/d,干预2周;对照组于普通CO2培养箱中常规培养。免疫组织化学染色检测BMP-2、VEGF的表达水平,RT-PCR检测2周后以及终止负压后1、2、3 d BMP-2、VEGF mRNA表达水平。[结果]诱导2周后,BMSCs呈现出显著的成骨细胞特性,与对照组比较,实验组细胞BMP-2、VEGF mRNA表达水平显著提高,且差异均有统计学意义(P<0.05),负压终止后3 d,两组细胞BMP-2 mRNA表达水平无明显差异(P>0.05),VEGF mRNA却在负压培养终止后的3 d内与对照组比较仍有显著差异(P<0.05)。[结论]体外负压培养可以提高BMSCs BMP-2、VEGF mRNA的表达水平。

体外负压培养对hBMSCs成骨活性影响的初步研究

[目的]探讨体外负压培养对hBMSCs成骨活性的影响。[方法]取第3代hBMSCs分为实验组和对照组,实验组进行间歇性负压培养,设置压力为17 kPa,30 m in/次,4次/d,干预2周;对照组于普通CO2培养箱中常规培养。倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡,检测ALP活性,茜素红染色观察钙节结形成,免疫组织化学检测Ⅰ型胶原和VEGF的表达。[结果]诱导2周,实验组细胞增殖能力下降,S期细胞百分比为(5.14±1.56)%,较对照组(13.45±3.51)%约下降62.4%,细胞凋亡增加。实验组ALP活性为(15.68±1.97)mU/mg,对照组为(6.34±1.21)mU/mg,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,实验组钙结节形成增多,VEGF表达较对照组显著提高;实验组Ⅰ型胶原表达呈阳性,对照组呈阴性反应。[结论]负压能抑制hBMSCs增殖,促进细胞凋亡,但可以提高细胞成骨活性。