基于“优势成分导向”策略的甘草抗心悸作用质量标志物的快速筛选

目的基于“以效论质”的中药质量控制研究思路,联合网络药理学方法与蛋白亲和实验,建立快速筛选甘草抗心悸质量标志物和特异性蛋白的方法。方法首先使用UPLC-TOF/MS技术对甘草的化学成分进行表征,其次基于网络药理学和分子对接探讨甘草抗心悸的主要有效成分及作用机制,最后通过蛋白亲和实验验证不同产地甘草提取物对关键蛋白的亲和力,筛选出与甘草抗心悸质量相关的特异性蛋白。结果共鉴定出甘草30个化学成分,网络药理学分析得到甘草素、甘草苷、异甘草苷、异甘草素、甘草酸等7个核心成分和AKT1、ESR1、MAPK3等6个关键靶点。生物信息富集分析得到PI3K-Akt信号通路、雌激素信号通路、松弛素信号通路等关键通路。分子对接结果表明甘草素、甘草苷、异甘草素、异甘草苷和刺甘草查尔酮与关键靶点有良好的结合能力且结合主要以氢键为主。蛋白亲和力实验表明,PTGS2蛋白可作为甘草抗心悸质量评价的特异性蛋白,且野生甘草的抗心悸作用强于种植甘草。结论建立了甘草抗心悸质量标志物的筛选方法,并筛选出了与甘草抗心悸质量相关的特异性蛋白,为提升其质量控制标准奠定了基础。

逆境胁迫和植物生长调节剂对甘草种子萌发的影响

以野生乌拉尔甘草种子为材料,研究不同温度、覆土厚度、干旱胁迫、pH值、盐胁迫、干旱和盐双重胁迫下种子发芽与萘乙酸、3-吲哚乙酸、褪黑素浸种对种子发芽特性的影响。结果表明,(1)乌拉尔甘草种子最适发芽温度为20~25℃,发芽率≥90%,发芽时滞显著低于其他温度;(2)乌拉尔甘草种子对pH适应范围较宽,pH值在4~8发芽率较高;(3)覆土厚度在0~0.5 cm时发芽率显著高于其他覆土厚度;(4)盐碱、干旱或盐碱和干旱双重胁迫下乌拉尔甘草种子发芽势和发芽率显著降低;(5)100~300μmol/L褪黑素预处理可显著提高盐胁迫处理下乌拉尔甘草种子的发芽率和发芽势;(6)萘乙酸对乌拉尔甘草种子发芽无促进作用,但当浓度>50 mg/L时,乌拉尔甘草种子发芽势和发芽率显著降低;(7)吲哚乙酸浓度为50 mg/L时,乌拉尔甘草种子发芽势和发芽率最高。综上所述,乌拉尔甘草种子发芽具有一定的抗非生物胁迫能力,且适宜的外源植物激素浓度预处理可促进种子发芽。