甲胎蛋白与肝癌免疫的研究进展

肝癌是常见的消化道恶性肿瘤,目前没有较好的治疗措施。甲胎蛋白在肝癌细胞中高表达,除了用于肝癌诊断外,其作为肿瘤相关抗原已成为肝癌免疫治疗的靶点。虽然甲胎蛋白免疫原性较弱,并通过抑制树突状细胞,自然杀伤细胞以及T淋巴细胞功能促进肝癌细胞免疫逃逸,但其在肝癌免疫治疗中的作用也日益受到重视,通过体外修饰增强其免疫原性促进免疫应答,从而提高杀伤肝癌细胞免疫效应。甲胎蛋白在肝癌发生、发展及免疫中的作用为研究其在肝癌中的免疫治疗奠定了良好的基础。

调衡方抗荷瘤小鼠Lewis肺癌转移的实验研究

探讨了调衡方对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移的作用及其机制.将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL小鼠右腋皮下建立Lewis肺癌模型,灌胃给药12d后观察肺表面转移率;常规石蜡切片HE染色,观察肺内转移灶的数量和大小;并采用免疫组化等方法检测肺组织中CD4^+、CD8^+T细胞量及血清中恶性肿瘤特异性生长因子(tumor specific growth factor,TSGF)的水平.结果显示调衡方在25、50g/kg剂量下,可增加荷瘤小鼠肺组织中CD4^+、CD8^+ T细胞量,对外周血中TSGF的水平及瘤块的增长有显著地抑制作用.研究结果显示调衡方通过抑制小鼠外周血TSGF的水平及增加CD4^+、CD8^+ T细胞量,从而抑制肿瘤细胞的侵袭转移.

参佛胃康对大鼠慢性萎缩性胃炎及胃癌前病变逆转作用的研究

目的:观察参佛胃康对大鼠慢性萎缩性胃炎及胃癌前病变的逆转作用,探讨其作用机制。方法:采用主动免疫、去氧胆酸钠、热水灌胃综合法连续造模90d,复制慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠模型,空白组自由饮水,模型组用等体积的蒸馏水灌胃,丽珠得乐组用丽珠得乐溶液0.018mg/kg灌胃,参佛胃康大剂量组、参佛胃康小剂量组分别用参佛胃康溶液2.44mg/kg和0.61mg/kg灌胃。肉眼观察胃黏膜的变化,光镜下观察胃黏膜的病理学改变,同时测定大鼠胃液pH值及胃蛋白酶活性的变化。结果:参佛胃康能保护大鼠慢性胃黏膜损伤,增加胃液酸度提高胃蛋白酶活性,且参佛胃康大剂量组效果显著。结论:参佛胃康对慢性胃萎缩性胃炎黏膜的各种病理变化具有明显的逆转作用。

热休克蛋白70-甲胎蛋白重组复合物抗瘤免疫的实验研究

目的:构建含有分子伴侣热休克蛋白70(HSP70)和甲胎蛋白(AFP)分子的蛋白复合物,研究此蛋白复合物是否具有针对AFP肿瘤诱导产生特异性CTL反应和保护性效应的能力。方法:戊二醛交联HSP70和AFP构建HSP70-AFP复合物。皮下注射免疫Balb/c纯系小鼠,同时设立单独AFP和HSP70免疫小鼠组作为对照。酶联免疫斑点实验(ELISPOT)和酶联免疫实验(ELISA)分别检测免疫后小鼠脾产生细胞因子IFN-γ的细胞数目和抗AFP抗体的水平。采用小鼠体内肿瘤负荷实验评价重组蛋白复合物的免疫效应。结果:经重组蛋白复合物免疫,ELISPOT和ELISA实验结果表明HSP70-AFP复合物免疫组分泌IFN-γ细胞因子的脾细胞数目和产生AFP的抗体水平显著高于AFP和HSP70免疫组(P<0.01)。HSP70-AFP复合物免疫组瘤体积也明显小于AFP和HSP70免疫组(P<0.01)。结论:研究证实了HSP70的免疫佐剂效应。实验结果表明重组HSP70-AFP复合物的连续免疫可以在小鼠体内产生有效的抗瘤免疫,HSP70-AFP重组蛋白复合物对于今后肿瘤疫苗的研究可能具有一定的意义。

兔骨折血肿细胞异种移植的免疫排斥反应研究

目的:探讨异种家兔骨折血肿细胞在骨折断端移植是否会导致明显的免疫排斥反应。方法:制作新西兰大白兔尺骨锯断模型,将体外培养的普通青紫蓝兔骨折血肿细胞移植到骨折断端,在移植后的不同时间处死新西兰兔,观察骨折断端单核吞噬细胞的浸润、脾脏淋巴滤泡增殖以及骨折断端异种家兔骨折血肿细胞存活的情况。结果:移植后的异种家兔骨折血肿细胞在骨折断端大量存活;与未接受细胞移植的对照组相比较,移植组并未发生明显的骨折断端单核吞噬细胞浸润和脾脏淋巴滤泡的大量增殖。结论:异种家兔骨折血肿细胞骨折断端移植未导致明显的免疫排斥反应。

人骨肉瘤中肾上腺髓质素和整合素α_vβ_3的表达及相关性研究

目的研究肾上腺髓质素(ADM)和整合素αvβ3在人骨肉瘤组织的不同临床分期、病理分级及组织学分型中的表达情况,并探讨二者之间的关系。方法应用免疫组化SABC法和图像分析技术的方法检测30例骨肉瘤组织中ADM和整合素αvβ3表达的阳性率、强度和平均光密度(ALD)。每张切片分别由两名病理医师在未知临床和病理资料的情况下独立观察切片,随机观察(至少5个具有代表性的高倍视野,计数100个细胞)判定肿瘤分期、分级及细胞染色程度。结果 ADM与整合素αvβ3表达的阳性率和表达强弱均随着骨肉瘤分期增加而上调(P<0.05),并在各期之间的差异有统计学意义(P<0.05)。ADM与整合素αvβ3的表达水平呈正相关。结论 ADM和整合素αvβ3在骨肉瘤中的表达强弱与骨肉瘤的恶性程度密切相关,且二者的表达变化呈正相关。

肿瘤细胞疫苗研究进展

随着对肿瘤逃避免疫监视机理研究的不断深入,细胞免疫已成为一种有希望治疗肿瘤的新方法。其中肿瘤疫苗作为肿瘤的特异性主动免疫治疗,近年来的研究取得可喜进展。本文介绍目前应用的细胞全瘤苗的处理方法、效果、优点、局限性及相应的改进方法,讨论该法作为肿瘤辅助治疗的研究前景及价值。

姜黄素抗肿瘤机制的研究进展

寻求一类低毒、高效的天然药物来提高癌症病人的生命质量一直是医学领域的研究热点。姜黄素(curcumin)作为一类植物源单体,有抗癌范围广、药理效应高、毒副作用低等优点,大量实验已证实姜黄素可以治疗癌症、控制感染、延缓衰老等。从4个方面概述姜黄素的抗肿瘤机制,希望为姜黄素在抗癌治疗中提供参考。

姜黄素逆转肿瘤多药耐药机制的研究进展

多药耐药是中晚期恶性肿瘤化疗失败及预后不良的主要原因之一。姜黄素是一种来源容易、用药安全、用途广泛的纯天然药物,大量研究证明,姜黄素能够有效的阻断转运蛋白、凋亡基因、酶系统等介导的MDR,从而增强癌细胞对化疗药物的敏感性,这对提高肿瘤的治疗效果及病情预后有着很重要的意义。

红景天苷抗肿瘤机制的研究概况

红景天苷(salidroside)作为一类天然植物源中药,有着治病范围广、低毒且高效等优点,大量研究已表明,红景天苷可以通过不同途径抑制肿瘤的增殖,从而达到治疗肿瘤的目的。通过对有关红景天苷抗肿瘤机制的研究,总结红景天苷可以阻滞癌细胞周期、诱导癌细胞向正常细胞分化、诱导癌细胞发生凋亡或自噬等多个方面在抗癌中发挥作用。

热休克蛋白72-甲胎蛋白抗原表位肽复合物抗小鼠肝癌Hepal-6细胞免疫的实验研究

目的:以热休克蛋白72(HSP72)-甲胎蛋白(AFP)抗原表位肽复合物免疫小鼠,研究该复合物针对AFP肿瘤是否具有特异性抗肿瘤免疫。方法:以HSP72-AFP多肽复合物皮下注射免疫昆明小鼠,并分别以AFP多肽和HSP72单独免疫小鼠为对照组。ELISA法检测免疫后小鼠血清IFN-γ水平、MTT法检测各免疫组小鼠淋巴细胞对肝癌Hepal-6细胞的杀伤作用、以小鼠体内瘤负荷实验评价蛋白复合物的免疫效应。结果:HSP72-AFP多肽复合物组小鼠血清IFN-γ水平、淋巴细胞对Hepal-6细胞的杀伤作用均显著高于AFP多肽和HSP72组(P<0.01)。HSP72-AFP多肽复合物组瘤体积也明显小于AFP多肽和HSP72免疫组(P<0.01)。结论:HSP72-AFP多肽复合物疫苗可诱导荷瘤小鼠产生针对AFP肿瘤的特异性细胞免疫,其对瘤细胞的杀伤效应明显优于两者单一的多肽纯化疫苗。表明HSP72-AFP多肽复合物可诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫。

热休克蛋白与肿瘤免疫

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是一类在生物进化中高度保守、广泛存在于原核及真核生物中的蛋白质。近年热休克蛋白在免疫中的作用已成为当前研究的热点之一。已证实其能与肿瘤细胞内多肽分子结合,通过抗原提呈细胞上的受体,将抗原肽传递给细胞毒T细胞诱导特异性抗肿瘤免疫应答。热休克蛋白肽复合物作为一种疫苗,在生物治疗方面拥有广阔的治疗前景,值得深入研究。

调衡方对S180荷瘤小鼠腹水癌细胞的作用及免疫功能的影响

目的探讨调衡方对S180荷瘤小鼠腹水癌细胞的作用及免疫功能的影响。方法将60只昆明种雄性小鼠随机分为模型组,调衡方大、中、小剂量组(按生药50、25、12.5g/kg),贞芪扶正胶囊组(0.83g/kg),热休克组,将传代培养的S180癌细胞接种于昆明种小鼠腹腔,灌胃给药12d后处死小鼠,分别抽取腹水制片,光镜下观察细胞形态,并采用免疫组织化学法检测腹水CD4、CD8表达及血清白细胞介素-10(IL-10)的活性。结果调衡方中剂量组可见腹水S180癌细胞大量坏死和凋亡,模型组对肿瘤细胞形态无明显影响;调衡方中、大剂量组腹水中CD4、CD8表达均增多(P<0.01),而热休克组则主要是CD8表达升高(P<0.05)。调衡方在25、50g/kg剂量下,对S180荷瘤小鼠外周血IL-10活性水平有抑制作用(P<0.05)。结论调衡方对小鼠腹水S180癌细胞荷瘤小鼠的抑瘤作用机制可能与抑制小鼠外周血IL-10的活性及增强CD4、CD8的表达水平有关,调衡方亦可致S180癌腹水癌细胞坏死和凋亡,机制可能与其提高细胞免疫功能,从而增强机体对肿瘤细胞的免疫杀伤能力有关,从而阻止了肿瘤细胞的侵袭转移。

Jak激酶抑制剂AG490对Lewis肺癌细胞增殖及Jak-Stat信号通路的影响

目的探讨Jak激酶抑制剂AG490对Lewis肺癌细胞增殖与凋亡的作用及其机制。方法 AG490作用于体外培养的Lewis肺癌细胞。MTT法检测细胞增殖,吖啶橙荧光染色观察细胞凋亡形态、流式细胞术检测细胞周期与凋亡,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Stat3、Stat5和Bcl-2、Bax mRNA表达。结果 100μmol.L-1AG490作用24和48h后,对Lewis肺癌细胞细胞增殖抑制率分别为37.95%和52.99%。流式细胞术显示,经50和100μmol.L-1AG490作用24h后,细胞凋亡率由处理前的0.76%分别提高到12.56%和16.76%(P<0.01)。荧光显微镜下可见到典型的细胞凋亡形态学改变。细胞Stat3、Stat5活化程度降低,促进Bcl-2基因表达下调,提升细胞中Bax mRNA表达。结论阻断Jak-Stat3信号通路可抑制Lewis肺癌细胞增殖,并可能通过下调凋亡抑制基因Bcl-2表达诱导细胞凋亡。

P16和HSP70在原发性肺癌中的表达及其临床意义

目的:研究原发性肺癌组织中P16及HSP70的表达及其临床意义。方法:采用SABC免疫组织化学技术检测72例原发性肺癌组织中P16和HSP70的表达。结果:随着肺癌组织学分级越高、临床分期越高,P16蛋白表达缺失率越高,而与肺癌的发病年龄、性别及组织学分型无相关性。HSP70在原发性肺癌组织表达率高达93.1%,与肺癌的发病年龄、性别、组织学分型、组织分化程度及临床分期没有相关性。结论:抑癌基因P16和HSP70均与肺癌的发生发展有密切关系故检测P16和HSP70有助于临床医师评估肺癌的生物学行为和预后。

热休克蛋白70与肝癌

热休克蛋白70(HSP70)广泛存在于细胞中,在应激刺激后过表达,可以参与蛋白质的合成及受损蛋白的修复。HSP70在肝癌治疗中的作用日益受到重视:利用其特异性和免疫原性,靶向治疗肝癌。并且可以利用其"分子伴侣"的特点,作为肝癌疫苗,诱发机体抗肝癌的免疫反应。HSP70在肝癌治疗中已初显成效,但也存在很多问题,需要更加深入的研究。总之,HSP70在肝癌治疗中有很大的应用前景。

调衡方对Lewis肺癌细胞凋亡标志物bax及bcl-2表达的影响

目的探讨调衡方含药血清诱导Lewis肺癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法采用细胞培养技术,用不同浓度的含药血清(无特定病原体雌性SD大鼠32只随机分为4组,每组8只,灌服给药,制备调衡方大、中、小剂量含药血清,正常血清。又将细胞分为5组,调衡方大、中、小剂量含药血清组,中剂量含药血清+AG490干预组,正常血清组)处理Lewis肺癌细胞,用溴化四唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;以流式细胞仪测定碘化丙啶染色细胞周期的变化;采用实时聚合酶链式反应(PCR)法检测bax和bcl-2的mRNA表达。结果调衡方含药血清处理Lewis肺癌细胞后,随着药物浓度增加,作用时间延长,细胞增殖速度减慢。流式细胞仪检测结果显示,调衡方含药血清使Lewis肺癌细胞阻滞于S期,随着药物浓度的增加,细胞凋亡逐渐增加,中、大剂与中剂量+AG490组尤为明显(P<0.01)。调衡方含药血清还能够促进细胞中bax mRNA表达,减少bcl-2 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),并呈浓度依赖性。结论调衡方含药血清能降低Lewis肺癌细胞内bcl-2含量及提高bax的表达,使bax/bcl-2比值升高,这可能是调衡方抗肿瘤诱导Lewis肺癌细胞凋亡的机制。

调衡方对Lewis肺癌细胞增殖及JAK-STAT信号通路的影响

目的:观察调衡方对Lewis肺癌细胞增殖凋亡及JAK-STAT通路的影响。方法:实验动物分为4组,灌服给药,制备调衡方小、中、大剂量含药血清,正常血清。又将细胞分为5组,即正常血清组(不含药血清),小、中、大剂量含药血清组,中剂量含药血清+AG490(JAK-STAT信号通路特异性抑制剂)干预组,分别孵育Lewis肺癌细胞株24 h后,MTT法检测对Lewis肺癌细胞增殖的影响,吖啶橙染色观察Lewis肺癌细胞凋亡状况,RT-PCR法检测其对Lewis肺癌细胞Stat3、Stat5 mRNA的影响。结果:Lewis肺癌细胞经调衡方中、大剂量含药血清作用后,与对照组比较,细胞内Stat3含量降低至0.622±0.004、0.62±0.007(P<0.01),Stat5表达分别降低至0.700±0.034、0.649±0.033(P<0.01)。结论:调衡方含药血清能显著抑制Lewis肺癌细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与下调stat3、stat5的基因表达,抑制细胞信号转导通路有关。

参佛胃康汤剂抑制荷胃癌小鼠肿瘤生长的作用机制

目的探讨参佛胃康汤剂对胃癌细胞的抗瘤作用及其机制。方法予昆明种小鼠皮下接种小鼠胃癌细胞MFC造模,将造模后的小鼠随机分为模型组和参佛胃康高、中、低剂量组;在肿瘤移植后的第1天ig给予实验组小鼠参佛胃康汤剂,在肿瘤移植后第61天处死各组小鼠。定期检测小鼠的生存状态、肿瘤大小及重量;采用TUNEL法和流式细胞仪测定肿瘤细胞的凋亡指数;采用免疫组化法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、STAT3、缺氧诱导因子-1α(HIF-1a)的表达。结果与模型组比较,参佛胃康组小鼠肿瘤的大小和重量明显受到抑制,其凋亡指数显著增加;肿瘤组织中VEGF、STAT3、HIF-1a的表达下调。结论参佛胃康汤剂可能通过诱导肿瘤细胞凋亡和下调VEGF、STAT3、HIF-1a等信号转导蛋白的表达来发挥其抗肿瘤作用。