高等职业院校药剂学在线精品课程建设与应用

结合药剂学课程特点,把在线精品课程建设内容重构为8个项目、39个任务。在教学资源建设方面,从课程实践技能案例建设和课程思政案例建设两个维度,在提升学生操作技能的同时,注重培养其思想政治素质。在课程平台应用方面,采取线上线下混合、校内校外并重的模式,充分发挥药剂学在线精品课程在人才培养、行业发展中的带动作用。

蟾毒它灵诱导急性早幼粒细胞白血病HL⁃60细胞铁死亡的机制研究

目的探究蟾毒它灵(Bufotalin)对急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞HL‐60铁死亡的作用及机制。方法用不同浓度(0.1、0.5、1.0、2.0、4.0μg·mL^(-1))蟾毒它灵分别作用于APL细胞HL‐60,使用光学显微镜观察细胞的形态学变化;采用CCK‐8法检测细胞的存活率情况;采用Western blot法检测细胞中铁死亡相关蛋白CD71、xCT、FTH1、GPX4的表达水平;采用谷胱甘肽(GSH/GSSG)检测试剂盒检测细胞内GSH和GSSG的含量变化;采用脂质氧化(MDA)检测试剂盒测定细胞内MDA的含量变化。将0.5μg·mL^(-1)蟾毒它灵、0.1μmol·L^(-1)Fer‐1和0.5μg·mL^(-1)蟾毒它灵+0.1μmol·L^(-1)Fer‐1分别作用于HL‐60细胞,使用光学显微镜观察细胞形态学变化,并用Western blot法检测铁死亡相关蛋白的表达水平。结果不同浓度蟾毒它灵处理HL‐60细胞后,细胞形态呈现出哑铃型、梭形等不规则形状,细胞的存活率降低,且呈时间‐剂量依赖关系。与对照组相比,蟾毒它灵可降低铁死亡相关蛋白GPX4、xCT、FTH1的表达水平和总谷胱甘肽的含量(均P<0.01),升高CD71蛋白的表达水平和MDA含量(均P<0.05)。蟾毒它灵与铁死亡抑制剂Fer‐1联合处理HL‐60细胞后,与对照组比较,HL‐60细胞的生长数量和形态学无明显变化,CD71、xCT、FTH1、GPX4蛋白表达水平的差异也无统计学意义(均P>0.05)。结论蟾毒它灵可抑制APL细胞HL‐60的增殖并诱导铁死亡,其可能通过GPX4介导的抗氧化途径和铁代谢途径实现。

浅谈微波技术在医药工业中的应用

微波是一种超高频电磁波,它具有热特性和非热特性。可用于医药工业中药品原料的干燥及成品的灭菌,同时它还具有干燥速度快,节约能源,不改变药性等优点。它在我国今后医药工业领域有着广阔的发展空间。

小桃儿七HPLC指纹图谱的建立及5个成分含量测定

目的:建立小桃儿七HPLC指纹图谱,并测定5个乙型强心苷类成分的含量。方法:采用Thermo HyPU-RITY C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;建立HPLC指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”软件进行相似度评价,SPSS 19.0软件进行聚类分析,同时测定5个成分的含量。结果:11批小桃儿七指纹图谱确定23个共有峰,相似度均>0.900,聚类分析与相似度评价结果基本一致。5个成分在其各自进样量范围内与峰面积的线性关系良好,精密度、重复性、稳定性试验的RSD<3.00%,平均加样回收率为98.65%~99.52%,RSD为0.63%~0.95%。结论:该研究建立的方法稳定可行,可为小桃儿七药材质量控制和评价提供参考。

乙酰紫草素诱导急性髓系白血病HL-60细胞发生铁死亡的作用及分子机制

目的:探究乙酰紫草素诱导急性髓系白血病HL-60细胞发生铁死亡的作用及分子机制。方法:采用1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL和8μg/mL的乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h和48 h,CCK-8实验检测乙酰紫草素对HL-60细胞增殖活力的影响;Western blot检测铁死亡相关蛋白[转录调节因子p53、胱氨酸/谷氨酸反向转运体(XCT)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、膜蛋白转铁蛋白受体1(TFR1/CD71)、铁蛋白重链1(FTH1)]的表达水平;采用GSH/GSSG检测试剂盒检测不同浓度乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h后细胞内GSH、GSSG的含量变化;采用4μg/mL的乙酰紫草素和0.1μmol/L细胞铁死亡抑制剂(Ferrostatin-1,Fer-1)共同干预HL-60细胞24 h,Western blot检测铁死亡相关蛋白p53、XCT、GPX4、CD71、FTH1的表达水平。结果:与对照组和DMSO组相比,不同浓度的乙酰紫草素对HL-60细胞的增殖均具有较强的抑制作用;乙酰紫草素显著升高p53和CD71的表达水平,显著降低XCT、GPX4和FTH1的表达水平,其中4μg/mL乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h,各蛋白表达水平变化最明显;乙酰紫草素显著减少GSH的含量(P<0.0001),显著提高GSSG/GSH的比值(P<0.0001);Fer-1将显著升高的p53和CD71以及显著降低的XCT、GPX4和FTH1的表达水平逆转。结论:乙酰紫草素一方面可能通过上调p53的表达,抑制XCT的表达,减少GSH含量,进而抑制GPX4的表达,促进HL-60细胞发生铁死亡;另一方面通过上调CD71(TFR1)的表达,下调FTH1的表达,从而影响HL-60细胞内铁稳态促进铁死亡的发生。

芪珠升白口服液大鼠长期毒性实验研究

目的评价芪珠升白口服液对大鼠的长期毒性研究,为临床用药安全提供理论依据。方法将SD大鼠随机分为空白对照组,高(26 g·kg^(-1))、中(13 g·kg^(-1))、低(6.5 g·kg^(-1))剂量组,连续灌胃60 d后,取腹主动脉血进行血常规检测和血液生化指标检查;每周测大鼠体重;解剖大鼠,观察脏器组织情况,取出心、肝、脾、肺、肾称重并求出脏器指数。结果连续给药60 d后,与对照组比较,低剂量雄性大鼠在给药一周体重显著性增加(P<0.05),低剂量和中剂量组雌性大鼠在给药一周体重显著增加(P<0.05);雌性大鼠的中、高剂量组的肾脏系数显著性升高(P<0.05);雄性低剂量组大鼠红细胞压积(Hematocrit,HCT)显著降低(P<0.05),雌性低剂量大鼠红细胞计数(Red blood cell count,RBC)显著性降低(P<0.05);SD大鼠的血液生化指标未见异常变化。病理组织学检查表明,各剂量组动物的脏器均无明显病理变化。结论芪珠升白口服液连续用药60 d后未出现明显的毒性反应,其临床用药为安全用量。

固肠止泻丸干燥工艺研究

目的:研究固肠止泻丸在螺旋震动干燥机作用下的干燥效果。方法:以水分、溶散时限、丸重、粒径、微生物限度、显微鉴别、薄层鉴别和指标性成分盐酸小檗碱的含量为指标,评价螺旋震动干燥机对于固肠止泻丸干燥效果的影响。结果:与传统的热风循环干燥箱相比,固肠止泻丸在螺旋震动干燥机的作用下,可缩短干燥和溶散时限,降低水分含量,且干燥后药物有效物质含量更稳定。结论:螺旋震动干燥机可用于固肠止泻丸干燥,干燥效果优于传统热风循环干燥箱。

基于CiteSpace软件对结肠炎与信号通路领域研究的可视化分析

目的借助CiteSpace软件的合作网络共现和关键词聚类等多项功能对结肠炎与信号通路领域进行可视化分析,阐述当前发展现状并尝试预测未来发展趋势和前沿热点。方法检索2000年1月至2022年9月中国知网、万方数据知识服务平台、维普网及Web of Science中有关结肠炎与信号通路相关文献,通过NoteExpress软件合并去重,运用CiteSpace软件对符合纳入标准的文献进行可视化分析。结果最终纳入中文文献425篇,英文文献628篇。研究热点涉及网络药理学、肠道菌群、氧化应激等,前沿趋势是分子对接、细胞因子、双盲、细胞增殖等。结论国内外学者可协同合作,加强中西医结合,共同探索结肠炎信号通路领域,明确发病机制,为深受其困扰的病患提供更好的服务。

止咳枇杷合剂干预新型冠状病毒肺炎的作用机制预测

目的通过网络药理学和分子对接技术初步预测止咳枇杷合剂干预新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制。方法采用网络药理学方法,根据口服利用度、类药性原则,对止咳枇杷合剂成分进行初步筛选,进一步构建"中药-成分-靶点-通路"网络,通过靶点的相互作用、生物信息学注释对止咳枇杷合剂参与的代谢通路进行分析,预测该复方干预COVID-19的潜在机制,然后通过分子对接技术,筛选对新型冠状病毒3CLpro水解酶有抑制作用的活性成分。结果 "中药-成分-靶点"网络分析结果显示,止咳枇杷合剂有34个成分与30个COVID-19疾病相关靶点互作。关联网络分析结果显示,止咳枇杷合剂中的活性成分可能通过作用于前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)、IL1B、IL6、IL10、白细胞介素8(CXCL8)、JUN等30个重要靶点,参与调控乙型肝炎、糖尿病并发症的AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等。枇杷叶和百部是作用的主要中药。分子对接结果显示,柚皮素、芦丁、芹菜素等8个化合物作为潜在的抗COVID-19的主要活性成分。结论止咳枇杷合剂中的活性化合物可能通过抗炎、抗病毒复制等过程发挥多靶点、多通路、多成分干预COVID-19的作用。

基于分子对接和网络药理学技术预测银翘解毒合剂防治新型冠状病毒肺炎的可行性

目的:利用分子对接和中药网络药理学技术预测银翘解毒合剂防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的可行性。方法:借助TCMSP、Pubchem等数据库检索银翘解毒合剂中金银花、连翘、桔梗、荆芥、薄荷、牛蒡子、淡豆豉、淡竹叶和甘草的化学成分。以银翘解毒合剂中成分为配体,利用分子对接技术探讨可能作用于人血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)的活性成分,进而运用Cytoscape软件构建活性成分-靶点(基因)网络,通过DAVID数据库对活性成分靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG,Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析。结果:获得银翘解毒合剂中化合物1060个,分子对接结果显示有301个化合物与ACE2具有较好的亲和作用(其中18个化合物优于参照药物洛匹那韦和瑞德西韦),进一步通过吸收、分布、代谢、排泄(ADME)参数从中优选出关键活性成分55个。关键成分靶点生物功能富集分析得到GO条目2080个(P<0.05),其中生物过程(BP)条目1862个,细胞组成(CC)条目88个,分子功能(MF)条目130个;KEGG通路富集分析得到152条信号通路(P<0.05),主要涉及与COVID-19感染源类似(病毒感染)的疾病,以及与肺炎和免疫、炎症反应相关的信号通路。结论:银翘解毒合剂中具有潜在作用于ACE2蛋白的活性物质,其有可能通过多靶点、多通路发挥防治COVID-19的作用。

维血宁对环磷酰胺致骨髓抑制模型小鼠的WBC、RBC、PLT和Hb的影响

目的观察维血宁对环磷酰胺致骨髓抑制模型小鼠的治疗作用。方法采用腹腔注射环磷酰胺引起小鼠骨髓抑制。将模型动物随机分组,各组分别给予维血宁41.3,20.6和10.3 g.kg-1,以及升血小板胶囊和白介素-11,连续14 d,末次给药后2 h,取血,进行血液学检查,测定出血、凝血时间。结果维血宁能不同程度地升高模型动物WBC、PLT、RBC和Hb,其中维血宁各剂量组动物WBC、PLT、Hb与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01);维血宁大、小剂量组动物RBC与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01);维血宁组动物的出血、凝血时间较模型组缩短(P<0.01或<0.05)。结论维血宁对环磷酰胺致骨髓抑制模型小鼠具有治疗作用,能升高外周血WBC、RBC、PLT和Hb。

基于网络药理学方法预测维血宁合剂防治新型冠状病毒肺炎的活性成分及潜在靶点

目的:利用中药网络药理学和分子对接技术探讨维血宁合剂防治新型冠状病毒肺炎(COVID⁃19)的潜在活性成分及其作用机制。方法:借助TCMSP数据库检索维血宁合剂中所含的主要化学成分及其作用靶点,并与冠状病毒感染相关的靶点进行叠加分析,筛选维血宁合剂潜防治COVID⁃19的靶点;通过Cytoscape软件构建药材⁃活性成分⁃靶点网络;通过DAVID数据库对活性成分靶点进行基因本体(GO)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析;最后运用分子对接技术虚拟筛选维血宁合剂中活性成分与2019⁃nCoV S蛋白、人ACE2蛋白及2019⁃nCoV 3CL水解酶(3CLpro)的作用,预测维血宁合剂潜在的抗2019⁃nCoV成分。结果:从维血宁合剂中共梳理得到326个成分及555个相关靶点,其中101个成分对应的35个靶点与COVID⁃19密切相关;靶点通路富集分析表明,维血宁合剂主要作用于感染性疾病、炎症反应及免疫调节等过程。分子对接结果显示16个成分与S蛋白、ACE2及3CLpro均显示了较好的结合作用,成分类型主要为甾体、脂肪酸和酚类。结论:维血宁合剂可能主要通过调节机体免疫和炎症反应等,从而对COVID⁃19发挥潜在的防治作用。

基于网络药理学和分子对接分析探讨消炎退热合剂干预新型冠状病毒肺炎的可行性

目的:运用网络药理学和分子对接法分析消炎退热合剂干预新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的可行性。方法:借助中药系统药理学分析平台(TCMSP)和Pubchem数据库检索消炎退热合剂中大青叶、蒲公英、紫花地丁、甘草的化学成分和作用靶点。通过UniProt、GeneCards等数据库查询靶点对应的基因,进而运用Cytoscape3.7.2构建化合物-靶点(基因)网络,采用R软件包(3.6.2)的Cluster profiler包对交集靶点进行GO(Gene Ontology)生物信息学富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,预测其作用机制,采用ChemOffice软件将筛选出的18个核心化学成分与血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)进行分子对接。结果:化合物-靶点网络包含4种药材,117个化合物和相应靶点498个,与疾病靶点144个交集后,筛选出关键的核心化合物18个,对应的疾病靶点27个,关键靶点涉及肾上腺素能受体β2抗体(ADRB2)、前列腺素过氧化物合酶1(PTGS1)、凝血酶原(F2)、肿瘤坏死因子(TNF)、肾素(REN)及血管紧张素转化酶(ACE2)等。GO功能分析得到GO条目910个(P<0.05)。其中生物过程(BP)条目867个,细胞组成(CC)条目6个,分子功能(MF)条目37个。KEGG通路富集筛选到10条信号通路(P<0.05),主要涉及cAMP信号通路、病毒蛋白与细胞因子受体间相互作用、肿瘤坏死因子信号通路、细胞因子相互作用受体通路、肾素-血管紧张素系统等。分子对接结果显示靛蓝、β-谷甾醇、γ-谷甾醇、十八碳二烯酸、亚油酸甲酯及高丽槐素6个核心化合物与ACE2结合力和临床推荐用药氯喹的相近。结论:消炎退热合剂中的活性化合物靛蓝、β-谷甾醇、γ-谷甾醇、十八碳二烯酸、亚油酸甲酯及高丽槐素可能通过与ACE2结合,且可能通过作用于ADRB2、PTGS1、F2、TNF、REN等靶点调节多条信号通路,通过以上结果预测该复方对COVID-19具有潜在的干预作用。

固肠止泻丸质量标准研究

目的：提高固肠止泻丸质量控制标准。方法：在原标准基础上，新增处方中木香、延胡索、干姜、罂粟壳、乌梅的薄层鉴别；采用HPLC法测定黄连中盐酸小檗碱的含量。结果：木香、延胡索、干姜、罂粟壳、乌梅薄层鉴别方法灵敏度高，阴性对照无干扰；盐酸小檗碱在0．0248～1．240μg（r＝0．9998）范围内呈良好的线性关系，平均回收率为98．90％，RSD为1．38％（n＝6）。结论：该方法简便，重复性好，可全面控制固肠止泻丸的质量。

维血宁的HPLC指纹图谱研究

目的建立维血宁的高效液相色谱指纹图谱。方法采用HPLC法,以虎杖苷、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D葡萄糖、大黄素和大黄素甲醚为内参照物,色谱柱为Accurasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-1mL·L-1磷酸水(梯度洗脱),检测波长为280nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,分析时间为90min。结果在HPLC指纹图谱中确定了5个主要共有峰,建立了维血宁的对照图谱。相似度比较结果显示,10批维血宁的对照图谱相似度均大于0.900。结论采用HPLC方法建立维血宁指纹图谱,方法稳定、可靠、简便,色谱图展现的各峰分离度较好,特征明显,可作为维血宁真伪鉴别标准,为维血宁的质量评价提供参考依据。

环磷酰胺、紫杉醇致小鼠血小板、白细胞减少模型的复制研究

目的建立环磷酰胺、紫杉醇致小鼠血小板、白细胞减少的动物模型。方法采用不同用法用量的环磷酰胺、紫杉醇给予小鼠,在不同时间进行血液学检查,确定环磷酰胺、紫杉醇能够引起小鼠血小板、白细胞减少的合适剂量和成模时间。结果腹腔注射环磷酰胺首剂量为200 mg/kg,100 mg/kg维持量为30 mg/kg外周血WBC和PLT均可显著降低,与空白组比较差异有显著性意义(P<0.01或P<0.05)。紫杉醇经过多次摸索,剂量较大时动物出现腹胀发青,精神不振和死亡现象,剂量较小时PLT未能有显著降低。结论环磷酰胺在上述剂量下复制出的小鼠白细胞、血小板减少动物模型成功率较高,动物死亡率低,可作为复制该模型的有效药物。紫杉醇则不适合作为此类模型的有效药物。

排便灵治疗便秘型肠易激综合征48例

目的 :观察补气、疏肝、解郁类中药配伍治疗便秘型肠易激综合征的临床疗效。方法 :将 96例随机分为治疗、对照两组各 48例 ,治疗组应用排便灵 (白术、枳壳、佛手、柴胡、厚朴、莱菔子、槟榔、木香等 ) ,对照组服用西沙必利。两组均以 1个月为 1疗程。结果 :治疗组总有效率 89.58% ,对照组总有效率 83 .75% ,P<0 .0 5。提示 :该方具有调理脾胃气机 ,增强胃肠系统运动功能的功效。

天麻眩晕宁片的薄层色谱鉴别研究

目的建立天麻眩晕宁片的薄层色谱鉴别方法,为提高制剂的质量提供依据。方法采用薄层色谱法,对处方中制天麻、白芍、钩藤、泽泻等12味药进行鉴别。结果在供试品色谱中,与对照品或对照药材色谱相对应的位置上,显示出相同颜色的斑点,因此阴性对照无干扰。结论所建立的方法简便、灵敏、专属性强,可用于天麻眩晕宁片的质量控制。

固肠止泻丸质量标准的研究

目的:研究出固肠止泻丸新的质量控制标准。将原标准黄连薄层色谱鉴别方法的含苯展开剂更换为新的展开剂,增加了处方中延胡索和木香的薄层色谱鉴别方法以及黄连中盐酸小檗碱的HPLC含量测定方法[C18柱(4.6×250mm,5μm),流动相:乙腈-0.05m ol/L三乙胺溶液(35:65),检测波长:347nm。结果:平均加样回收率为97.5%,RSD=1.25%,n=6]。结论:方法简便、灵敏、专属性强、分离效果好,可用于固肠止泻丸的质量控制。