陕西省第四次全国中药资源普查对秦药产业高质量发展的启示

通过对第四次全国中药资源普查陕西省相关工作成果进行梳理,明确了陕西省中药资源种类与构成情况,根据区域生境特点和生态适宜性提出秦药的适宜生产区划;总结了中药资源普查成果在陕西省乡村振兴和富民强省、中药产业合理布局和生产规划、中医药事业高质量可持续发展等方面的作用;最终,从加强种子种苗标准化研究、培育优良秦药品种,积极发展林下经济、构建中药材生态种植体系,引导秦药生产向绿色高效方向发展、促进秦药提质增效3个方面展望了秦药产业未来发展面临的挑战,为进一步聚焦秦药大品种、打造秦药全产业链、促进秦药产业绿色可持续发展提供科学参考。

秦药品牌内在属性和产业价值研究

秦药是三秦大地孕育的承载着厚重秦文化的重要战略资源,是陕西省中医药产业发展的重要资源保障。打造秦药品牌对推动陕西省中医药产业发展、提升产业链水平具有重要意义。从秦药品牌遴选、文化价值、战略需求、资源保障和产业发展5个方面论述了秦药品牌内在属性和产业价值。以发展秦药产业、树立秦药品牌为引领,破解陕西省中药产业长期存在的基础能力薄弱和产业链水平较低的问题,探索形成绿色产业发展模式,提升产业发展水平,更好地服务于生态保护、健康中国等国家战略。

秦药产业发展模式及高质量发展路径思考

秦药产业是根植于三秦大地的中药产业,具有深厚而独特的文化内涵,复兴秦药文化、振兴秦药产业已成为区域产业发展的战略任务之一。因此“聚焦秦药品牌,培育全产业链”的发展模式是实现秦药产业全面转型升级的有效路径与战略举措。按照“育企业、建基地、创品牌、强产业、富民生”的思路,以促进农业耕作优势转化为秦药资源生产优势、秦药资源优势转化为秦药产业优势、区位地理优势转化为秦药流通优势、科教人才优势转化为驱动发展优势为目标,实施以提质增效为核心的秦药资源种植、加工、制造、物流、大健康和“一带一路”品牌工程,培育药材大基地、秦药大品种、秦药大物流、健康大产业,提升秦药产业规模、核心竞争力、市场占有率、国内外知名度,从而构建完整的秦药产业发展模式,为推动落实秦药高质量发展提供决策参考。

秦药形成的源流

道地药材是特定地域内品质优良且具有较高知名度的中药材,是我国传统优质药材的代表。秦药作为我国道地药材的重要组成部分,为保障人民健康、促进中医药事业发展作出了积极贡献。然而,目前有关秦药的概念、内涵、起源及其发展历程等尚不清晰。通过对相关文献资料进行系统梳理,厘清秦药的起源及发展脉络,并从广义和狭义两方面对秦药的概念进行探讨与界定,以期促进秦药资源的开发利用。

三秦文化与秦医药

作为中国优秀传统文化的代表,中医药因时间维度的演进而具有时代性,又因空间维度的展开而具有地域性。为全面认识中医药文化的地域差异、深刻理解其与中国文化的互动关系,以三秦大地区域内生成发展的三秦文化和秦医药为研究对象,系统分析两者的关系,并重点梳理三秦文化在“道”“术”2个层面对秦医药形成发展的作用,同时探讨了三秦文化对当前秦医药高质量发展的潜在影响。结果表明,秦医药与三秦文化同根同源、一脉相承,共同植根于三秦大地,三秦文化深刻影响着秦医药核心观念、价值体系、思维模式、临床技法等方面,同时三秦文化可能会对秦医药事业高质量发展带来潜在负面影响。初步探讨了三秦文化与秦医药的互动关系,为厘清秦医药文化渊源及特征、充分激活秦医药文化基因、促进秦医药事业持续高质量发展提供参考;同时也为分区考析传统文化与医药的相互影响关系提供示范。

正源方对过氧化氢诱导的血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用研究

目的探索正源方对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人脐静脉血管内皮细胞氧化损伤的作用及其作用机制。方法MTT法检测正源方对H_(2)O_(2)诱导的细胞活力减少的影响;采用罗丹明123染色法检测正源方对H_(2)O_(2)诱导的细胞线粒体膜电位的影响;采用流式细胞术检测正源方对H_(2)O_(2)诱导的细胞中活性氧(ROS)的影响;通过Western blot检测正源方对H_(2)O_(2)诱导的细胞中促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路关键蛋白表达的影响。结果正源方可抑制H_(2)O_(2)诱导的细胞活力减少,提高细胞线粒体膜电位,抑制H_(2)O_(2)诱导的细胞中ROS的产生及p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK蛋白的表达。结论正源方可能通过调控MAPK通路对H_(2)O_(2)诱导的血管内皮细胞损伤起保护作用。

基于网络药理学的秦七风湿方干预骨性关节炎活性成分及作用机制预测

目的:应用网络药理学方法分析预测秦七风湿方(QRF)干预骨性关节炎(OA)的活性成分及作用机制,并结合分子对接及体外实验对结果进行验证。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SymMap、中医药百科全书数据库(ETCM)检索QRF中的活性成分及成分靶点;借助GeneCards、Therapeutic Target Database及DrugBank数据库检索收集OA疾病靶点;对QRF干预OA的靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用分析、基因本体(GO)生物学功能分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)代谢通路富集分析;运用Cytoscape 3.7.2构建药物-成分-靶点-通路网络,并结合分子对接和体外抗炎实验对结果进行验证。结果:由QRF干预OA的药物-成分-靶点-通路网络预测,珠子参中人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1,山茱萸中熊果酸、獐牙菜苷元、山茱萸苷,秦艽中马钱苷酸、龙胆碱等为QRF干预OA的主要成分,可能通过肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)等核心靶点,调控IL-17信号通路、TNF信号通路、类风湿性关节炎、Toll样受体信号通路等实现。体外实验表明,QRF水提液可抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症因子TNF-α的释放。结论:QRF中的活性成分可能通过抗炎、免疫调节等过程,发挥多靶点、多通路干预OA的作用。

基于网络药理学、分子对接、体外细胞实验预测珠子参保肝机制

目的借助网络药理学、分子对接、体外细胞实验预测珠子参保肝的主要成分及作用机制。方法通过ETCM、SwissTargetPrediction、SymMap、Melacards数据库以及文献查阅,搜索整理珠子参的活性成分以及与疾病的作用靶点,利用STRING数据库构建蛋白互作网络以及GO和KEGG富集分析,并采用Cytoscape3.7.2构建“成分-靶点通路”图,预测其可能的保肝作用机制,进一步采用分子对接和细胞实验检测珠子参对肝细胞损伤模型的保护作用。结果获得珠子参活性成分43种,作用靶点247个,与309个疾病靶点相交后,得到TNF、CASP3、IL6、IL1B、JUN等27个靶点及竹节参皂苷Ⅳa、人参皂苷Re、人参皂苷Ro、越南皂苷R4和三七皂苷R1等37种对应成分。GO富集分析共得到条目616条(P<0.05),KEGG富集共得到通路122条,主要涉及乙型肝炎、Th17细胞分化、TNF信号通路和IL17信号通路等。分子对接结果显示,预测的珠子参保肝的重要活性化合物与关键靶点具有较好的结合活性。体外结果显示,珠子参皂苷对LPS诱导L02细胞的炎性损伤模型具有一定的保护作用。结论本研究通过网络药理学、分子对接技术和体外细胞实验表明,珠子参具有一定的保肝作用。

基于环磷酰胺致小鼠损伤保护作用研究正源方前处理工艺

目的以环磷酰胺(CTX)致小鼠损伤模型的保护作用为主导,研究正源方适宜的前处理工艺。方法针对正源方采用不同的前处理工艺技术,制备制剂前体药物。工艺Ⅰ:正源方全方各味药材采用水煎提取;工艺Ⅱ:正源方采用部分药材超微粉碎+水醇双提。将小鼠分为空白组,模型组,地榆升白片组,工艺Ⅰ组,工艺Ⅱ低、中、高剂量组。空白组和模型组灌胃给予蒸馏水,其余各组灌胃给予相应剂量药液,连续给药14 d。除空白组外,其余各组小鼠于第4日腹腔注射CTX进行造模,连续4 d,观察小鼠的一般状态及体质量变化,实验结束后测定小鼠外周血常规,检测小鼠血清中的超氧化物歧化酶和丙二醛含量的变化,计算小鼠的脏器指数,在显微镜下观察HE染色的小鼠肝脏和股骨切片的病理变化。结果与模型组相比,两种工艺获得的制剂前体药物,均可以有效缓解小鼠体质量降低,降低小鼠脾脏指数,保护肝脏和骨组织,并抑制小鼠血清的氧化应激反应,工艺Ⅱ组能提高小鼠的白细胞数,工艺Ⅰ组无显著性差异。结论两种工艺获得的制剂前体药物均对CTX小鼠损伤模型有一定的保护作用。

宫颈癌中医分期辨治研究进展

运用中医学理论,结合现代医学,从中医分期辨证的角度出发,对宫颈癌前病变期、围手术期、放化疗期3个阶段进行概述。根据宫颈癌形成、发展的不同时期,治疗上第一阶段应侧重祛邪为主,佐以补虚;第二阶段应补虚与祛邪并重,同时注重术后并发症的预防与治疗;第三阶段着重扶助正气,兼顾他症。倡导中医药使用不同的治法进行分期论治,提高人们对中医分期辨证论治的认知度,运用中西医的优势互补,为临床治疗开拓新的思路。

大枣叶水提醇沉物的抗氧化活性研究

目的:对大枣叶水提醇沉物的抗氧化活性进行研究,筛选抗氧化活性良好的醇沉方式和醇沉浓度。方法:分别用不同浓度的乙醇直接醇沉、分级醇沉得到大枣叶醇沉物,以ABTS自由基清除率、DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率、还原力为考察指标,筛选抗氧化活性高的醇沉工艺。结果:大枣叶分级醇沉物总体上抗氧化活性强于直接醇沉,大枣叶水提物直接醇沉使含醇量达80%的醇沉物抗氧化活性较佳,分级醇沉物在4种不同抗氧化考察方法下呈现不同规律。结论:优选的醇沉方式和醇沉浓度,可为大枣叶健康产品的开发提供依据。

基于网络药理学和细胞实验探讨栀子豉汤干预心肌梗死的作用

目的基于网络药理学、分子对接技术及体外细胞实验探究栀子豉汤干预心肌梗死(MI)的潜在分子机制。方法根据TCMSP、SwissTargetPrediction和GeneCards等数据库以及相关文献,筛选栀子豉汤主要成分靶点和心肌梗死相关靶点。利用STRING 11.5数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建蛋白互作网络,拓扑分析筛选核心靶点,对其进行GO和KEGG富集分析并构建“药物-成分-靶点-通路”网络。运用AutoDock Vina进行关键成分与核心靶点的分子对接。通过MTT法、DAPI染色法、罗丹明123染色法和蛋白免疫印迹法验证栀子豉汤对H9c2细胞的作用。结果筛选得到栀子豉汤中槲皮素、藏花酸、藏红花素等51种活性成分调控IL10、Akt1、TNF、HIF1A等29个核心靶点,作用机制涉及信号转导过程、刺激反应和蛋白结合等基因功能以及肿瘤坏死因子、AGE-RAGE和PI3K-Akt等信号通路。分子对接显示,栀子豉汤中重要的活性成分槲皮素、青蒿素、黄豆苷和染料木素与Akt1靶点紧密结合。细胞实验证实,栀子豉汤能够恢复H8/R12诱导的H9c2细胞活力,升高线粒体膜电位,改善细胞氧化应激水平,以及调控p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2和caspase-3蛋白表达。结论通过网络药理学与体外细胞实验验证了栀子豉汤可能通过调控PI3K/Akt信号通路,发挥保护心肌损伤的作用。

基于代谢组学研究中药固肠止泻丸治疗小鼠溃疡性结肠炎的机制

目的:固肠止泻丸为溃疡性结肠炎患者的临床专家推荐用药。课题组前期研究发现固肠止泻丸对结肠炎的临床效果与肠道微生物密切相关,但固肠止泻丸在治疗溃疡性结肠炎方面的作用机制仍不明确。方法:采用2.5%葡聚糖硫酸钠建立溃疡性结肠炎小鼠模型,探讨固肠止泻丸对溃疡性结肠组织病理变化、疾病活动指数、炎症细胞因子的影响。同时采用液相色谱串联质谱技术检测小鼠血清样本中代谢物水平,并结合主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析筛选出差异代谢物,采用MetaboAnalyst 5.0确定与差异代谢物有关的代谢通路。结果:固肠止泻丸降低小鼠疾病活动指数评分,改善结肠组织形态,降低小鼠血清中的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β含量,升高白细胞介素-4、白细胞介素-10含量。代谢组学结果显示,与固肠止泻丸调控相关的潜在差异代谢物共18个,主要涉及甘油磷脂代谢、不饱和脂肪酸的合成、亚麻酸代谢、α-亚麻酸代谢、嘌呤代谢。结论:固肠止泻丸对溃疡性结肠炎有一定的防治作用,其机制可能与调节甘油磷脂代谢、不饱和脂肪酸的合成、亚麻酸代谢、α-亚麻酸代谢、嘌呤代谢有关。

基于网络药理学和分子对接分析探讨消炎退热合剂干预新型冠状病毒肺炎的可行性

目的:运用网络药理学和分子对接法分析消炎退热合剂干预新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的可行性。方法:借助中药系统药理学分析平台(TCMSP)和Pubchem数据库检索消炎退热合剂中大青叶、蒲公英、紫花地丁、甘草的化学成分和作用靶点。通过UniProt、GeneCards等数据库查询靶点对应的基因,进而运用Cytoscape3.7.2构建化合物-靶点(基因)网络,采用R软件包(3.6.2)的Cluster profiler包对交集靶点进行GO(Gene Ontology)生物信息学富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,预测其作用机制,采用ChemOffice软件将筛选出的18个核心化学成分与血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)进行分子对接。结果:化合物-靶点网络包含4种药材,117个化合物和相应靶点498个,与疾病靶点144个交集后,筛选出关键的核心化合物18个,对应的疾病靶点27个,关键靶点涉及肾上腺素能受体β2抗体(ADRB2)、前列腺素过氧化物合酶1(PTGS1)、凝血酶原(F2)、肿瘤坏死因子(TNF)、肾素(REN)及血管紧张素转化酶(ACE2)等。GO功能分析得到GO条目910个(P<0.05)。其中生物过程(BP)条目867个,细胞组成(CC)条目6个,分子功能(MF)条目37个。KEGG通路富集筛选到10条信号通路(P<0.05),主要涉及cAMP信号通路、病毒蛋白与细胞因子受体间相互作用、肿瘤坏死因子信号通路、细胞因子相互作用受体通路、肾素-血管紧张素系统等。分子对接结果显示靛蓝、β-谷甾醇、γ-谷甾醇、十八碳二烯酸、亚油酸甲酯及高丽槐素6个核心化合物与ACE2结合力和临床推荐用药氯喹的相近。结论:消炎退热合剂中的活性化合物靛蓝、β-谷甾醇、γ-谷甾醇、十八碳二烯酸、亚油酸甲酯及高丽槐素可能通过与ACE2结合,且可能通过作用于ADRB2、PTGS1、F2、TNF、REN等靶点调节多条信号通路,通过以上结果预测该复方对COVID-19具有潜在的干预作用。

基于分子对接和网络药理学技术预测银翘解毒合剂防治新型冠状病毒肺炎的可行性

目的:利用分子对接和中药网络药理学技术预测银翘解毒合剂防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的可行性。方法:借助TCMSP、Pubchem等数据库检索银翘解毒合剂中金银花、连翘、桔梗、荆芥、薄荷、牛蒡子、淡豆豉、淡竹叶和甘草的化学成分。以银翘解毒合剂中成分为配体,利用分子对接技术探讨可能作用于人血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)的活性成分,进而运用Cytoscape软件构建活性成分-靶点(基因)网络,通过DAVID数据库对活性成分靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG,Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析。结果:获得银翘解毒合剂中化合物1060个,分子对接结果显示有301个化合物与ACE2具有较好的亲和作用(其中18个化合物优于参照药物洛匹那韦和瑞德西韦),进一步通过吸收、分布、代谢、排泄(ADME)参数从中优选出关键活性成分55个。关键成分靶点生物功能富集分析得到GO条目2080个(P<0.05),其中生物过程(BP)条目1862个,细胞组成(CC)条目88个,分子功能(MF)条目130个;KEGG通路富集分析得到152条信号通路(P<0.05),主要涉及与COVID-19感染源类似(病毒感染)的疾病,以及与肺炎和免疫、炎症反应相关的信号通路。结论:银翘解毒合剂中具有潜在作用于ACE2蛋白的活性物质,其有可能通过多靶点、多通路发挥防治COVID-19的作用。

基于网络药理学方法预测维血宁合剂防治新型冠状病毒肺炎的活性成分及潜在靶点

目的:利用中药网络药理学和分子对接技术探讨维血宁合剂防治新型冠状病毒肺炎(COVID⁃19)的潜在活性成分及其作用机制。方法:借助TCMSP数据库检索维血宁合剂中所含的主要化学成分及其作用靶点,并与冠状病毒感染相关的靶点进行叠加分析,筛选维血宁合剂潜防治COVID⁃19的靶点;通过Cytoscape软件构建药材⁃活性成分⁃靶点网络;通过DAVID数据库对活性成分靶点进行基因本体(GO)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析;最后运用分子对接技术虚拟筛选维血宁合剂中活性成分与2019⁃nCoV S蛋白、人ACE2蛋白及2019⁃nCoV 3CL水解酶(3CLpro)的作用,预测维血宁合剂潜在的抗2019⁃nCoV成分。结果:从维血宁合剂中共梳理得到326个成分及555个相关靶点,其中101个成分对应的35个靶点与COVID⁃19密切相关;靶点通路富集分析表明,维血宁合剂主要作用于感染性疾病、炎症反应及免疫调节等过程。分子对接结果显示16个成分与S蛋白、ACE2及3CLpro均显示了较好的结合作用,成分类型主要为甾体、脂肪酸和酚类。结论:维血宁合剂可能主要通过调节机体免疫和炎症反应等,从而对COVID⁃19发挥潜在的防治作用。

秦皮乙素纳米结晶的制备与抗炎活性评价

目的优化秦皮乙素纳米结晶的制备工艺并对所得纳米结晶进行初步评价。方法将适量秦皮乙素溶于乙醇(良溶剂)并超声助溶,均匀加入到搅拌条件下的水溶液(不良溶剂)中,使之过饱和而析出结晶。考察良溶剂与不良溶剂比例、稳定剂种类、稳定剂浓度、药物浓度、冻干保护剂种类对纳米结晶粒径的影响;比较秦皮乙素纳米结晶和秦皮乙素的体外溶出度;利用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7分析秦皮乙素纳米结晶的抗炎活性。结果最优制备工艺为:以4 mg·mL-1聚乙烯吡咯烷酮作为单一稳定剂;良溶剂与不良溶剂比例为1∶20,药物质量浓度为7 mg·mL-1,超声120 min,得到的秦皮乙素纳米结晶粒径为(18.68±0.56)nm,多分散系数为(0.357±0.008)。冻干保护剂选择D-山梨醇制得的ES-NC冻干粉效果好,粒径为(30.74±3.00)nm。体外抗炎实验表明秦皮乙素纳米结晶可以抑制脂多糖诱导M1型巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮,下调促炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α、白介素-8水平,上调抑炎性细胞因子白介素-4水平。结论秦皮乙素纳米结晶制备工艺简便,可显著提高秦皮乙素的溶解度和体外溶出度,并具有很好的体外抗炎活性,为其新剂型开发提供理论依据。

白花蛇舌草三大类成分的分离纯化及抗肿瘤活性测定

目的从白花蛇舌草中分离纯化总三萜、总多糖、总黄酮,并检测其抗肿瘤活性。方法将白花蛇舌草置于乙醇溶液中冷浸,对其中的三萜类、多糖和黄酮类化合物进行粗提;再通过大孔吸附树脂对粗提物进行处理,获得纯化后的总三萜、总多糖、总黄酮。通过CCK-8法检测白花蛇舌草总三萜、总多糖、总黄酮对A549细胞增殖的影响。结果三萜类化合物浸膏得率为20.60%,精制后总三萜纯度为82.73%;粗多糖得率为41.17%,精制后总多糖纯度为71.11%;黄酮类化合物浸膏得率为0.49%,精制后总黄酮纯度为38.14%。纯化后的白花蛇舌草总三萜、总黄酮和总多糖对A549细胞增殖均有抑制作用,白花蛇舌草总三萜和总黄酮对肺癌细胞A549的抑制作用明显。结论白花蛇舌草总三萜、总黄酮、总多糖均抑制肺癌A549细胞的增殖,为白花蛇舌草总黄酮、总多糖、总三萜的抗肿瘤作用研究提供了一定的参考。

中医药辅助放疗与化疗减毒增效研究进展

放疗与化疗是临床治疗肿瘤的主要手段,在有效抑制肿瘤生长的同时,所引起的不良反应不容忽视,包括心脏毒性、肾毒性、骨髓抑制和黏膜炎等,严重影响肿瘤患者的生活质量。中医药辅助放疗与化疗在肿瘤治疗过程中有着独特的优势,不但可以减少放疗与化疗产生的不良反应,还可以增强放疗与化疗的治疗效果。文章综述了近年来中医药辅助放疗与化疗减毒增效的研究进展,从中医药缓解放疗与化疗诱导的炎症反应、氧化应激、骨髓和免疫系统损伤几个方面进行阐述,为后续中医药辅助放疗与化疗减毒增效的研究提供参考。

银翘解毒合剂药渣还原制备纳米银及抗氧化和抑菌活性研究

目的使用银翘解毒合剂药渣水提液制备纳米银,评价生物合成参数对还原反应及生成纳米银的影响,并研究其抗氧化和抑菌活性。方法超声法制备纳米银,紫外可见光谱监测纳米银生成和生长,激光粒度仪和透射电镜表征纳米银粒径、分散性、表面性质和形貌,DPPH法评价抗氧化活性,酶标仪测600nm处的A值(A600)研究抑菌活性。结果在使用银翘解毒合剂药渣水提液制备纳米银时,生物合成参数对纳米银的粒径和分散性有很大影响,平均粒径分布在14.2~94.8 nm,pH 6.0时分散性最好;在pH 10.0,料液比3∶1,超声反应2 h可高效制得近球形纳米银,平均粒径(24.0±0.3)nm,60 d内保持稳定,表面带负电(-23.1±0.2)mV;制得的纳米银对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有很好的抑制作用,最小抑菌浓度分别为50.0、25.0μg/mL;对DPPH有很好的清除作用,当纳米银质量浓度为100μg/mL时清除率可达71.1%。结论银翘解毒合剂药渣水提液可在室温条件下制备不同粒径和分散性质的纳米银,生物合成参数对纳米银的平均粒径和分散性有较大影响,制得的纳米银具有很强的抗氧化和抗菌活性,可作为潜在的抗氧化和抗菌试剂。