碱提工艺对茶树菇多糖形貌特征和构象及其生物活性的影响

利用传统水提及碱提的方法得到茶树菇粗多糖S-ACP和J-ACP,经CTAB法和Sephadex G-150凝胶层析法对其分离纯化,分别得到S-ACP2-1和S-ACP2-2以及J-ACP2-1和J-ACP2-2两组主要组分,用扫描电子显微镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)对多糖的形貌进行表征并测定其体外抗氧化活性和抗肿瘤活性;对多糖S-ACP2-2、J-ACP2-2进行刚果红实验测定及圆二色谱仪(CD)分析。SEM观测结果:S-ACP2-1为较粗的表面光滑的丝状,J-ACP2-1呈较细的有少量碎屑的丝状;S-ACP2-2为较大的片状,J-ACP2-2在大的片状周围有很多细小的碎屑。AFM观测结果:碱液可以使多糖分子部分断裂成小片段。刚果红实验:S-ACP2-2、J-ACP2-2在水溶液中为自由卷曲构型。CD分析:S-ACP2-2的空间构型中有序结构较少,J-ACP2-2在水溶液中为无序构型。对比4种多糖的活性,碱液作用的多糖J-ACP2-2活性高于S-ACP2-2。

利用傅立叶红外光谱和原子力显微镜研究超声提取对鸡腿菇多糖结构的影响

利用沸水浴法和超声辅助提取法提取鸡腿菇粗多糖,分别得到对应的多糖水浴提取的多糖(WCP)和超声提取的多糖(UCP)。采用苯酚硫酸法测得WCP和UCP中的总糖质量分数分别为87.997%和72.937%。用季铵盐沉淀法和Sephadex G 200凝胶层析法对WCP和UCP进行分离纯化,得WCP3 1、UCP3 1 2个主要组分,用傅立叶红外光谱(FTIR)和原子力显微镜(AFM)对提取多糖的结构进行表征。结果显示:WCP3 1和UCP3 1均具有一般多糖类物质的特征吸收峰,WCP3 1和UCP3 1的单糖残基均以β吡喃环存在,但超声波可导致部分C O双键断裂形成C—O链接;WCP3 1呈现大量的近似螺旋聚集体和少量球状聚集体,但是UCP3 1是较小的分散球状聚集体,说明超声波可断裂多糖的分子链间或链内氢键,导致近似螺旋聚集体的降解。

超声提取功率对麦冬多糖体外清除羟基自由基作用影响的研究

分别用五种不同的超声功率从麦冬中提取多糖,并用苯酚-硫酸法检测了这五种功率提取麦冬多糖的提取率,用邻二氮菲-金属铁离子-H2O2体系检测了其对羟基自由基的清除作用。结果表明,超声提取麦冬多糖的提取率随超声功率的增大先减小后增大,而且均具有清除羟自由基的作用,此清除作用随着浓度的增大而增大,随着超声提取功率的增大先增大后减小,当超声功率为560W时,清除率最高。

卵黄低密度脂蛋白结构的红外光谱和激光拉曼光谱分析

低密度脂蛋白是把胆固醇运输到肝脏合成胆酸一种重要的脂蛋白。低密度脂蛋白结构的研究对弄清动脉硬化发病机理有着非常重要的意义。用硫酸铵分离法快速分离鸡蛋黄中各种蛋白成分,用Sephadex G-200柱层析分离、纯化获得纯度很高的低密度脂蛋白,对其进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测,结果显示低密度脂蛋白主要包含5种脱辅基蛋白。激光拉曼和红外光谱测定,检测出低密度脂蛋白中对称CH2以及不对称CH2的伸缩振动。红外光谱还检测到脂蛋白肽键中C=O伸缩振动、脂链中P=O的伸缩振动和磷脂中胆碱聚集体的N+(CH3)3的不对称振动。两种光谱分析为研究低密度脂蛋白的结构提供了有效信息。

茶树菇多糖的提取、气相色谱分析和AFM观测以及活性研究

利用水提得到茶树菇水提多糖S-ACP,并对水提残渣进行碱提得多糖J-ACP。分别用考马斯亮蓝G-250法及苯酚硫酸法测定蛋白含量及总糖含量,气相色谱(GC)分析多糖组分,原子力显微镜(AFM)观测结构形貌,并进行了体外抗氧化活性测定。结果表明,S-ACP的单糖组成为木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩尔比为2.527:0.140:1.284:1.738;J-ACP的单糖组成为鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩尔比为1.327:2.525:0.140:3.641:1.765;AFM观测表明S-ACP为多侧支的雪花状结构,J-ACP为少侧支的简单环状结构,且二者均非单链存在;抗氧化活性结果表明S-ACP活性高于J-ACP。

滑菇多糖wPNP-a1的制备及结构分析

利用传统热水浸提法提取滑菇粗多糖(wPNP),进而用季铵盐沉淀法和Sephadex G-150凝胶色谱柱层析对wPNP进行纯化,得滑菇多糖wPNP-a1。以高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、气相色谱(GC)、核磁共振(NMR)、环境扫描电子显微镜(ESEM)和原子力显微镜(AMF)等方法分析wPNP-a1的结构,结果表明,滑菇多糖wPNP-a1的分子量为419310 Da,具有一般类多糖的特征吸收峰,糖苷键为β-型,不含乙酰基,由木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,其摩尔比为3.91∶2.77∶1.91∶1;wPNP-a1的分子间排斥力较大,分子间吸引力较小,在云母表面呈直链状分布,链宽23 nm左右,链高0.7～0.8 nm。

胆固醇对磷脂酰乙醇胺单分子层影响的研究

利用LB膜技术对表面压力—面积(π-A)曲线进行了测量及原子力显微镜(AFM)观测,研究了胆固醇对磷脂酰乙醇胺单分子层的影响.π-A曲线分析表明,随着胆固醇的增加,加速了相变的发生,促进膜稳定状态的形成.AFM观察结果表明,随着胆固醇比例的增加,混合膜呈现从点状结构向较大的片状与网状共存结构的转化,最终纯胆固醇形成高度紧密的膜结构.

麦冬多糖POJ-U1a的结构研究及原子力显微镜观测

用功率超声从麦冬中提取麦冬多糖POJ-U1,通过DEAE-52 cellulose色谱柱和Sephadex G-150凝胶色谱柱进行分离纯化得到POJ-U1a,采用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量,采用红外光谱法、气相色谱法对其化学结构进行研究,原子力显微镜观察其微观形貌。结果表明,麦冬多糖POJ-U1a的平均分子量为4.02×103D,是一种由均一葡萄糖组成的葡聚糖,具有糖类物质的特征吸收峰,同时存在呋喃环,是具有高度分枝的化学结构的多糖。

质膜微囊的分离及原子力显微镜研究

采用非去污剂在OptiPrep梯度中漂浮超声处理质膜的方法,从鼠肺中分离质膜微囊,在原子力显微镜下以不同条件进行了观察.该非去污剂法能分离出完整的质膜微囊,在去离子水稀释500倍的条件下得到了清晰的质膜微囊的原子力显微镜图片,建立了一种新的快速分离完整质膜微囊的方法和用原子力显微镜观测质膜微囊结构的新方法.

两种苦瓜多糖对人白血病细胞体外增殖的影响

采用热水浸提法提取苦瓜粗多糖,经DEAE-52纤维素层析柱对其进行分离纯化,以蒸馏水和0.1mol/L NaCl进行洗脱,分别得到水洗苦瓜多糖(W-MCP)和盐洗苦瓜多糖(S-MCP).采用MTT法对这两种苦瓜多糖对人白血病系细胞K562体外增殖抑制作用进行研究,并对其抗氧化(O2-.、DPPH和脂质过氧化)活性进行测定.结果显示:W-MCP和S-MCP对K562细胞的抑制作用随着时间延长而增强,48h时抑制率趋于稳定,在72h、400μg/mL下W-MCP和S-MCP的最大抑制率分别为30.46%和28.61%;W-MCP和S-MCP对O2-.的最高清除率分别为58.52%和44.71%,对DPPH自由基的清除作用随浓度的升高而降低,最高清除率分别为19.01%和30.11%,对脂质过氧化反应的抑制作用都较小,可见苦瓜多糖具有一定的抗氧化和抑制癌细胞增殖作用.

超声提取对鸡腿菇多糖AP1结构的影响

对传统热水浸提取和超声辅助提取得到的鸡腿菇多糖AP1和CAP1的结构进行分析比较,研究了超声辅助提取对鸡腿菇多糖AP1结构的影响.结果表明：AP1由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,CAP1由木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成.红外光谱表明多糖AP1和CAP1在4 000~650 cm-1具有多糖类物质的特征吸收峰;不同的是,AP1的红外光谱中在865、764 cm-1处有吸收峰,而CAP1在903、8267、56 cm-1处有吸收峰.原子力显微图中均显示多糖线形并具有分支结构.超声对其影响可能是引起了单糖之间连接的方式变化,进而更易散开形成较均匀的网状.

磷脂酰胆碱与硬脂酸二元混合系统在空气/水界面上的相行为和形态学特征研究

本文通过LB膜仪表面压力-面积(π-A)曲线测量和原子力显微镜(AFM)观测,研究了磷脂酰胆碱(PC)与硬脂酸(SA)二元混合系统在空气/水界面上的物理特性和形态学特征。-πA曲线分析表明,当温度保持在30℃,SA的摩尔分数(XSA)不变时,随着表面压力(π)的增加,二元混合系统的面积(A)不断减小;当表面压力(π)不变时,随着SA的摩尔分数(XSA)的增大,二元混合系统的面积(A)出现非线性周期性减小;表明二元系统从液态扩张相向液态有序相转变。通过吉布斯能量分析,从理论上给出了该系统凝聚程度随π和XSA变化的特征,原子力显微镜观测给出了凝聚程度变化的直观证据,对进一步了解生物膜液晶态的变化具有重要的生物学意义。

GM1/DPPC单层膜中分子间相互作用机理初探

单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)是生物膜重要的组分之一,在神经系统病变治疗中起到重要的作用。本文通过分析GM1/二棕榈酰基磷脂酰胆碱(DPPC)混合脂单层膜等温线数据研究了脂膜分子间的相互作用机理,并利用原子力显微镜(AFM)对其形态进行了观测。实验结果表明:DPPC在混合脂中的比例含量XDPPC=0.2时,GM1与DPPC分子间的相互作用力为吸引力,膜较稳定;其它比例混合时分子间的相互作用力为排斥力,且在XDPPC=0.6时,分子间相互排斥力最大,单层膜出现了明显的富含DPPC的微区和GM1网状共存的结构。AFM形态观测与理论分析结果相一致。该研究为了解GM1在不同的膜脂系统中形态和功能的变化提供了重要的实验依据和理论支持。

Triton X-100在磷脂酰丝氨酸-胆固醇分子层的嵌入量的计算与分析

运用热力学吉布斯吸附方程和表面张力公式,计算了不同膜压下磷脂酰丝氨酸-胆固醇形成分子层中非离子去污剂Triton X-100嵌入量、Triton X-100"过剩量"以及体系中对应的自由能的变化.结果表明:随着膜压的不断增大,磷脂酰丝氨酸-胆固醇分子层中Triton X-100的嵌入量逐渐增大.单位面积内Triton X-100"过剩量"和体系自由能变化量均与分子层膜压成正比.

热水提取与超声提取的麦冬多糖结构与构象特征的比较研究

利用热水与超声提取麦冬粗多糖,DEAE-cellulose52纤维素与Sephacryl S-300凝胶柱层析对其进行分离纯化,得到热水提取的麦冬多糖均一组分WPOJ-DS与超声提取的麦冬多糖均一组分UPOJ-DS。采用高效液相色谱法、气相色谱法、红外光谱法、部分酸水解、甲基化分析及核磁共振对WPOJ-DS与UPOJDS的结构进行表征;利用刚果红实验、圆二色谱实验及原子力显微镜对其溶液构象进行了比较研究。结果表明,超声提取对麦冬多糖的分子量、单糖组成摩尔比及构型会产生影响,WPOJ-DS与UPOJ-DS的主链均主要由→6)-D-Glcp(1→和→3,6)-D-Glcf(1→组成,但WPOJ-DS中存在→6)-β-D-Glcp(1→,而UPOJDS中没有;刚果红实验、圆二色谱实验与原子力显微镜结果显示UPOJ-DS存在螺旋结构,而WPOJ-DS没有;且在不同溶液环境中,WPOJ-DS与UPOJ-DS的溶液构象不同。

枸杞多糖分离纯化及其结构光谱分析与显微学观察

目的提取枸杞多糖并分析其结构性质和显微学形态,为枸杞的进一步开发利用提供参考。方法采用水提醇沉法得到枸杞多糖,Sephadex G-150凝胶色谱柱纯化得LBP3-I,应用傅里叶变换光谱、气相色谱对LBP3-I进行组成结构分析,通过环境扫描电镜和原子力显微镜观察该组分的显微学形态。结果 LBP3-I是一种含有结合蛋白的多糖复合物。其单糖组成为鼠李糖基、阿拉伯糖基、木糖基、甘露糖基、葡萄糖基、半乳糖基,且摩尔比率为2.07∶2.38∶3.11∶1.00∶1.12∶2.86。红外光谱结果显示LBP3-I具有明显的糖类物质特征吸收峰且含有吡喃环;环境扫描电镜下LBP3-I呈现高分支结构,主要呈链状,且糖链间多相互缠绕聚集成环状。结论 LBP3-I是一种含有结合蛋白的多糖复合物,具有分支结构,主要成链状。

胆固醇与磷脂酰乙醇胺/磷脂酰胆碱混合膜的热力学特性及其单层膜形态的AFM观察

研究了不同比例下胆固醇(Chol)对磷脂酰乙醇胺/磷脂酰胆碱(PE/PC,1∶1物质的量比)混合膜的影响,并在表面压力-平均分子面积(π-A曲线)等温线基础上,通过对过量平均分子面积(ΔAex)和过量吉布斯自由能(ΔGex)的计算分析,研究了不同比例Chol与PE/PC(1∶1物质的量比)三元混合膜的热力学特性.实验结果表明:Chol在一定程度上加速了混合膜的相变,增强了膜的凝聚性;当XChol=0.2,0.6,0.8时,过量平均分子面积和过量吉布斯自由能在所研究的表面压力下都为负值,分子之间相互作用力表现为引力,促使混合膜的凝聚,而在XChol=0.4时,过量平均分子面积和过量吉布斯自由能在15,20,25,30 mN/m下为正值,分子之间相互作用力表现为斥力,促使熵的增加,并且在20 mN/m压力下出现极值.实验中利用LB膜技术制备了不同比例Chol与PE/PC(1∶1物质的量比)混合膜,并在原子力显微镜下对其结构形态进行了观测.