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脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化 被引量:6
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作者 潘宁 章蔼然 侯颖春 《生物技术》 CAS CSCD 2008年第6期47-50,共4页
目的:研究优化影响脂质体转染效率的因素,以提高脂质体转染效率,为相关研究和应用提供参考。方法:以绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,采用脂质体Lipofectamine2000包裹pU6H1-GFP-FAK重组质粒转染Caco-2细胞,研究了细胞接种密度、... 目的:研究优化影响脂质体转染效率的因素,以提高脂质体转染效率,为相关研究和应用提供参考。方法:以绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,采用脂质体Lipofectamine2000包裹pU6H1-GFP-FAK重组质粒转染Caco-2细胞,研究了细胞接种密度、DNA用量、脂质体与DNA的比例、脂质体-DNA复合物的形成时间、细胞与脂质体复合物的孵育时间、血清的有元及细胞的传代次数等因素对脂质体转染效率的影响。结果:2—5次细胞传代,2×10^5接种密度、4μgDNA用量、2.5:1的脂质体与DNA比例、30min脂质体-DNA复合物形成时间以及6h细胞与复合物孵育时间,转染效率最高。血清在本实验室条件下并不影响转染效率。结论:实验获得的优化条件可以明显提高脂质体对肿瘤细胞的转染效率,可作为有关研究或应用的参考。 展开更多
关键词 脂质体 细胞转染 转染效率 肿瘤细胞
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FAK基因表达对人结直肠癌细胞增殖及运动的影响 被引量:6
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作者 潘宁 章蔼然 +1 位作者 牟茂森 侯颖春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期783-786,共4页
目的:探讨黏着斑激酶(FAK)表达水平对结直肠癌细胞增殖及运动的影响。方法:针对FAK基因不同靶点设计siRNA序列,构建siRNA重组子,转染Caco-2细胞,以RT-PCR和免疫细胞化学方法检测FAK mRNA和蛋白表达变化及时间效应,同时检测FAK基因敲低对... 目的:探讨黏着斑激酶(FAK)表达水平对结直肠癌细胞增殖及运动的影响。方法:针对FAK基因不同靶点设计siRNA序列,构建siRNA重组子,转染Caco-2细胞,以RT-PCR和免疫细胞化学方法检测FAK mRNA和蛋白表达变化及时间效应,同时检测FAK基因敲低对Caco-2细胞的凋亡、增殖及迁移的影响。结果:FAK siRNA导入Caco-2细胞后,FAK mRNA和蛋白表达水平明显下调,细胞增殖及迁移能力受抑,呈时间依赖关系,FAK mRNA水平下调在转染后48h达到最大。结论:FAK siRNA可有效抑制靶基因表达,FAK表达水平下调后Caco-2细胞的增殖及运动明显受抑制。 展开更多
关键词 小干扰RNA 结直肠癌 FAK 细胞增殖 细胞运动
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黏着斑激酶活化与肿瘤进程研究进展 被引量:1
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作者 潘宁 章蔼然 侯颖春 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第12期2222-2227,共6页
细胞质非受体型酪氨酸激酶黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK),作为信号转导的关键分子,传递由胞外基质到细胞质的信号,在许多高度恶化肿瘤中表达升高,并促进细胞形态学变化、形成伪足小体和侵袭伪足,进而导致入侵表型的出现。因此... 细胞质非受体型酪氨酸激酶黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK),作为信号转导的关键分子,传递由胞外基质到细胞质的信号,在许多高度恶化肿瘤中表达升高,并促进细胞形态学变化、形成伪足小体和侵袭伪足,进而导致入侵表型的出现。因此,研究FAK的结构、功能以及在细胞运动、细胞存活、肿瘤发生过程中的作用意义重大。本文就FAK的活化以及在肿瘤发生过程中的作用作一综述。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 肿瘤发生 磷酸化 细胞转移 血管发生
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黏着斑激酶与肿瘤侵袭转移 被引量:4
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作者 张楠楠 魏丽丽 +1 位作者 强荣兵(综述) 侯颖春(审阅) 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期269-273,共5页
黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是一种非受体型蛋白酪氨酸激酶,在肿瘤细胞的侵袭和转移中起着重要的作用。FAK是整合素介导的或生长因子受体诱导的调节细胞迁移的信号通路的关键组分。FAK通过与相关分子作用可以调节细胞骨... 黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是一种非受体型蛋白酪氨酸激酶,在肿瘤细胞的侵袭和转移中起着重要的作用。FAK是整合素介导的或生长因子受体诱导的调节细胞迁移的信号通路的关键组分。FAK通过与相关分子作用可以调节细胞骨架重构、胞外基质降解、细胞黏附更新以及质膜突出,进而参与肿瘤细胞的运动等多个过程,所以FAK与肿瘤发展的关系已经越来越受到重视。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 肿瘤 侵袭转移
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