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溶藻弧菌外膜蛋白OmpU的克隆、表达条件优化及多克隆抗体制备
被引量:
3
1
作者
刘祥
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2016年第3期699-705,共7页
Omp U蛋白为溶藻弧菌主要外膜蛋白,具有很好的免疫原性,在疫苗上有很好的应用前景。本试验通过分子克隆获得Omp U蛋白的表达菌株,利用切胶纯化获得Omp U蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体滴度为1∶3200倍,WesternBlottin...
Omp U蛋白为溶藻弧菌主要外膜蛋白,具有很好的免疫原性,在疫苗上有很好的应用前景。本试验通过分子克隆获得Omp U蛋白的表达菌株,利用切胶纯化获得Omp U蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体滴度为1∶3200倍,WesternBlotting法检测抗血清特异性较好。通过正交试验,获得Omp U菌株的最佳表达条件为:诱导时菌液OD600值1,加IPTG终浓度0.1mmol/L,诱导时间8 h,温度32℃;最佳培养条件为:葡萄糖浓度0.4%,转速230 r/min,装液量50 m L。为Omp U工业发酵、蛋白功能与疫苗开发研究奠定基础。
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关键词
溶藻弧菌
OmpU蛋白
多克隆抗体
正交试验
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职称材料
猪链球菌Lmb、Sao、ZnuA蛋白的抗原表位、二级结构分析及重组表位疫苗分子的设计
被引量:
3
2
作者
刘祥
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期181-187,204,共8页
[目的]利用生物信息学方法设计猪链球菌候选疫苗蛋白Lmb、Sao、Znu A的重组表位多肽分子。[方法]通过ABCpred和Bepi Pred方案,预测猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的B细胞表位。运用神经网络与量化矩阵法预测蛋白的CTL表位。使用MHC-Ⅱ类...
[目的]利用生物信息学方法设计猪链球菌候选疫苗蛋白Lmb、Sao、Znu A的重组表位多肽分子。[方法]通过ABCpred和Bepi Pred方案,预测猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的B细胞表位。运用神经网络与量化矩阵法预测蛋白的CTL表位。使用MHC-Ⅱ类分子结合肽预测蛋白的Th表位。采用DNASTAR软件与SOPMA服务器预测蛋白二级结构,进而验证获得的B/T细胞表位的准确性。通过DNASTAR Protean软件重组拼接获得的B/T细胞抗原表位,设计抗原性较好的猪链球菌重组表位多肽。[结果]猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的优势B细胞表位数分别为4个、4个和3个;CTL表位数各为1个;Th表位数分别为2个、1个和1个。二级结构预测显示这些表位大多处于蛋白易于产生表位的暴露表面、无规则卷曲与转角等位置。并设计获得抗原性较好的重组表位多肽。[结论]设计了抗原性较好的猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的重组表位多肽。
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关键词
猪链球菌
细胞表位
蛋白结构
重组表位多肽
原文传递
题名
溶藻弧菌外膜蛋白OmpU的克隆、表达条件优化及多克隆抗体制备
被引量:
3
1
作者
刘祥
机构
陕西理工学院中德天然产物研究与开发利用联合研究所
出处
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2016年第3期699-705,共7页
基金
陕西省教育厅科学研究计划项目(2013JK0723)
陕西理工学院人才启动项目(SLGQD13-15)
文摘
Omp U蛋白为溶藻弧菌主要外膜蛋白,具有很好的免疫原性,在疫苗上有很好的应用前景。本试验通过分子克隆获得Omp U蛋白的表达菌株,利用切胶纯化获得Omp U蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体滴度为1∶3200倍,WesternBlotting法检测抗血清特异性较好。通过正交试验,获得Omp U菌株的最佳表达条件为:诱导时菌液OD600值1,加IPTG终浓度0.1mmol/L,诱导时间8 h,温度32℃;最佳培养条件为:葡萄糖浓度0.4%,转速230 r/min,装液量50 m L。为Omp U工业发酵、蛋白功能与疫苗开发研究奠定基础。
关键词
溶藻弧菌
OmpU蛋白
多克隆抗体
正交试验
Keywords
Vibrio alginolyticus
OmpU protein
Polyclonal antibody
Orthogonal experiment
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
猪链球菌Lmb、Sao、ZnuA蛋白的抗原表位、二级结构分析及重组表位疫苗分子的设计
被引量:
3
2
作者
刘祥
机构
陕西理工学院中德天然产物研究与开发利用联合研究所
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期181-187,204,共8页
基金
国家
陕西省
+3 种基金
陕西理工学院大学生创新创业训练计划项目("奶牛乳房炎三联重组多肽表位疫苗的研制及其抗原性分析"
No.201510720556
No.1949
No.UIRP15006)
文摘
[目的]利用生物信息学方法设计猪链球菌候选疫苗蛋白Lmb、Sao、Znu A的重组表位多肽分子。[方法]通过ABCpred和Bepi Pred方案,预测猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的B细胞表位。运用神经网络与量化矩阵法预测蛋白的CTL表位。使用MHC-Ⅱ类分子结合肽预测蛋白的Th表位。采用DNASTAR软件与SOPMA服务器预测蛋白二级结构,进而验证获得的B/T细胞表位的准确性。通过DNASTAR Protean软件重组拼接获得的B/T细胞抗原表位,设计抗原性较好的猪链球菌重组表位多肽。[结果]猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的优势B细胞表位数分别为4个、4个和3个;CTL表位数各为1个;Th表位数分别为2个、1个和1个。二级结构预测显示这些表位大多处于蛋白易于产生表位的暴露表面、无规则卷曲与转角等位置。并设计获得抗原性较好的重组表位多肽。[结论]设计了抗原性较好的猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的重组表位多肽。
关键词
猪链球菌
细胞表位
蛋白结构
重组表位多肽
Keywords
Streptococcus suis
cell epitopes
protein structure
recombinant epitope polypeptide
分类号
S855.1 [农业科学—临床兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
溶藻弧菌外膜蛋白OmpU的克隆、表达条件优化及多克隆抗体制备
刘祥
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2016
3
下载PDF
职称材料
2
猪链球菌Lmb、Sao、ZnuA蛋白的抗原表位、二级结构分析及重组表位疫苗分子的设计
刘祥
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
原文传递
已选择
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参考文献
引证文献
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