陕西理工学院维生素D生理与应用研究所介绍

陕西理工学院维生素D生理与应用研究所成立于2012年2月，是以国际学术交流合作为背景，以陕西省“百人计划”创新人才引进项目为平台，整合陕西理工学院相关研究资源而成立的。目前，它是我国唯一一个从事维生素D理论研究和药物开发的科研机构。研究所的定位是打造一支具有国际水准和战略视野的科技创新团队，

维生素D的代谢及调控研究新进展

维生素D是前激素(prohormone),它的发现及其在临床上的成功应用,为治愈佝偻病和成人软骨症开辟了有效途径。维生素D的主要作用是参与调节人体内钙、磷代谢及骨的形成,并有抑制细胞生长、调节免疫作用的功能,尤其对骨质疏松症、自身免疫疾病、肿瘤等多种疾病有防治的功效。正因如此,人们对维生素D的健康效能有着广泛的期待,可是摄入维生素D的同时又担心因过量而引起毒副作用。本文从维生素D的代谢和调控两方面来讨论维生素D激素系统的作用及自我保护功能。

肺癌中维生素D系统的研究进展

肺癌是全球病死率最高的肿瘤[1],分小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）两大类,分别约占肺癌发病率的15%和85%。NSCLC分大细胞癌、鳞癌和腺癌,其中腺癌占NSCLC发病率的绝大多数。肺癌的发病率逐年增高,造成了巨大的经济和社会负担,因此社会对肺癌发生、发展及防治研究的需求已经越来越迫切。

维生素D受体检测方法的研究进展

维生素D不仅能够调节钙磷代谢,影响骨的生长,还能调节机体的免疫活性和细胞生长与分化。维生素D的功能是通过激活细胞核内的维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)来实现的,因此,VDR是靶细胞响应维生素D反应的决定因素。VDR高表达的组织,如肠、肾脏、骨和甲状旁腺等,是维生素D的主要靶组织。过去40年中,为了测定VDR在机体各个组织中的分布,建立了多种检测方法。然而,这些测定方法的应用也产生了一些具有争议的结果,这可能是由检测方法的特异性不同导致的。近年来,本研究团队建立了一套特异性强、灵敏性高的免疫测定方法,并将其成功应用于测定组织中VDR。本文将对这些检测方法的的优点和各自的局限性进行讨论,并指出测定方法的选择是成功鉴定靶组织中VDR的关键。

3种天然抗氧化剂对维生素D_2稳定性的保护作用

应用超高效液相色谱,分别测定白藜芦醇、茶多酚及大豆异黄酮与维生素D_2在1∶1、1∶10、10∶1这3种质量比例混合下,放置10、26、36 d后样品中维生素D_2稳定性变化。结果表明,以1∶1、1∶10、10∶1质量比例添加的3种天然抗氧化剂均对维生素D_2稳定性具有一定的保护作用,且随着放置时间的延长,对维生素D_2的稳定性保护作用愈明显。其中以1∶10质量比例添加对维生素D_2的稳定性保护作用最佳,添加3种天然抗氧化剂36 d后维生素D_2的存留率均在84%以上,与空白对照相比分别增加72.72%、68.08%、75.32%。茶多酚、大豆异黄酮及白藜芦醇3种天然抗氧化剂均对维生素D_2具有较好的稳定性保护作用,其中以1∶10质量比例混合时效果较佳。

维生素D功能的再认识

维生素D(vitamin D)发现于20世纪20年代,它在临床上的成功应用彻底解决了少儿的佝偻病(rickets)和成年人的软骨症(osteomalacia)。对其结构解析发现,它属于脂溶性甾醇化合物。研究显示,维生素D不仅能调节机体内钙磷代谢的平衡,影响骨骼生长,而且还能调节机体的免疫功能及细胞增殖分化。由于维生素D具有多种生理功能,因此它的缺乏与多种人类疾病的产生和发展有关。在维生素D经典功能的基础上集中讨论了维生素D的新功能,尤其是在甲状旁腺激素合成、糖尿病以及癌症方面的作用。

维生素D_3与雄性生殖

维生素D3的经典作用是调节体内钙、磷的代谢平衡和维持骨的健康,有证据显示维生素D3也可调节动物生殖。维生素D代谢酶可合成和降解活性维生素D3及其代谢中间产物,活性维生素D3通过结合至目标组织的维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)以发挥其生物学作用。VDR和维生素D代谢酶在雄性生殖系统中表达,表明维生素D3在雄性生殖生物学中起关键作用。本文对维生素D3与雄性生殖的研究进展作一综述,以期为推进维生素D3影响雄性生殖的分子机制和临床治疗男性不育的研究提供理论依据。

维生素D受体免疫组织荧光染色方法建立

建立维生素D受体(Vitamin D Receptor,VDR)特异性免疫荧光染色方法,对人十二指肠组织中VDR进行测定。采用石蜡包埋的方法对组织进行永久性固定、并制作组织石蜡切片,利用苏木精-伊红(Hematoxylin&Eosin,H&E)方法鉴定组织形态结构的完整性,利用免疫荧光(Immunofluorescence,IF)染色方法对组织中VDR进行免疫荧光染色,确定抗体使用最佳浓度范围并优化实验条件。结果表明:人十二指肠VDR在绒毛上皮细胞的胞质中高表达,一抗D-6的最佳稀释比率为1∶100,二抗A594的最佳稀释比率为1∶250,抗原最佳复性条件为0.01 mol/L p H 6.0柠檬酸缓冲液中850 W功率微波煮沸20 min。按照此方法制作的石蜡切片组织形态结构完整,VDR染色特异性高,重复性好。

牛蛙与斑马鱼中维生素D受体的免疫印迹体系的建立

选用牛蛙与斑马鱼作为两栖类和鱼类的代表,以牛蛙十二指肠、牛蛙肾、斑马鱼肠作为VDR检测的潜在组织器官,通过对选择的组织进行蛋白质提取,应用免疫印迹技术检测了VDR的组织分布,并在实验过程中对实验条件进行了优化。实验结果为两栖类、鱼类中的VDR研究提供技术支撑并推动相关领域的研究。

大豆食心虫性信息素的研究及应用进展

大豆食心虫Leguminivora glycinivorella(Matsumura)是我国北方大豆产区的主要农业害虫,严重影响大豆的产量和品质。以昆虫性信息素为主要成分的性引诱剂诱集技术在大豆食心虫防控中的应用,是绿色化学生态防治技术的较佳选择。综述了大豆食心虫性信息素的主要成分及鉴定结果、人工合成方法、田间应用技术、拟信息素及性信息素与植物挥发物质协同作用的研究进展,指出了当前运用性信息素防治大豆食心虫存在的问题及应用前景。

二化螟性诱剂田间应用技术研究

探讨二化螟性诱剂田间应用中的相关技术问题，为二化螟性信息素的科学合理应用提供依据。采用2种市售二化螟诱芯，比较了诱捕器的类型、颜色及悬挂高度对二化螟诱捕效果的影响。结果表明中科院动物所二化螟诱芯B引诱效果较好，粘胶板式（三角板）和水盆式2种类型诱捕器的引诱活性无显著差异；诱捕器颜色对引诱效果有较大影响，其中白色效果优于绿色、蓝色、黄色、黑色、红色、棕色；三角板诱捕器悬挂在1．4m和1．2m处的效果优于1．0m和0．8m。田间应用时建议选用中科院动物所二化螟诱芯B，采用白色三角板诱捕器，悬挂高度以1．2～1．4m为宜。

紫外光影响食用菌中VD_2含量的研究进展

维生素D(vitamin D,VD)对人体健康至关重要,它主要由VD原经紫外光照射转化而来。VD家族中最重要的成员是VD2、VD3。食用菌中含有丰富的VD2原——麦角固醇,经紫外光照射可转化为VD2。本文从VD2的光合成机理出发,介绍不同生长方式的食用菌中麦角固醇和VD2的含量以及紫外光影响食用菌中麦角固醇向VD2转化的主要因素,包括食用菌种类、紫外光的波长、照射剂量和时间、食用菌的照射部位和生长期及食用菌的含水量和温度等,以期为提高食用菌的VD2产率提供一定参考。

不同性诱剂对亚洲玉米螟的引诱效果及田间应用初探

亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis（Guenée）是危害我国玉米的重要害虫,为了探索其生物防治方法,测试了不同来源的3种诱芯（诱芯A、诱芯B和诱芯C）对陕西关中灌区玉米螟的引诱活性,并比较了水盆式和三角形两种诱捕器类型及诱捕器不同悬挂高度（1.0、1.5、1.8和2.0 m）的诱捕效果。结果表明：诱芯A（北京中捷玉米螟诱芯）和诱芯B（中国科学院动物研究所玉米螟诱芯）均对亚洲玉米螟成虫具有一定的引诱活性,以诱芯B效果更佳;两种类型诱捕器对玉米螟诱虫总数差异显著;三角形诱捕器悬挂在2.0 m处的效果优于悬挂在1.5 m处。诱芯B较适合陕西关中灌区玉米螟的预测预报及生物防控,建议在田间应用中使用三角形诱捕器,悬挂高度以1.8-2.0 m为宜。

葛根异黄酮联合VitD_3对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织构造的影响

目的观察葛根异黄酮(TIP)联合VitD_3对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织构造的影响,探讨其联合作用是否产生协同效应。方法将3月龄健康雌性SD大鼠随机分为OVX组和Sham组,运用去除大鼠双侧卵巢的方法构建绝经后骨质疏松动物模型,手术后3个月进行重新分组,分别为:Sham组、OVX组、OVX+TIP组、OVX+TIP+VitD_3组,每组6只,连续给药2个月。给药结束后采集动物血清以及胫骨、股骨组织标本,检测血清E_2,同时运用病理图像分析系统对骨组织构造进行观察和检测。结果 OVX大鼠血清E_2较Sham组显著降低,给药TIP后大鼠血清E_2回升,但OVX+TIP组、OVX+TIP+VitD_3组血清E_2差异不显著(P>0.05)。OVX大鼠胫骨、股骨骨小梁体积百分率、骨小梁厚度较Sham组显著降低(P<0.01),骨小梁间距较Sham组显著增大(P<0.01)。OVX+TIP组胫骨、股骨骨小梁体积百分率、骨小梁厚度较OVX组显著升高(P<0.05),骨小梁间距较OVX组显著减小(P<0.05),但是OVX+TIP组胫骨、股骨形态计量学静态指标与Sham组差异显著(P<0.05),OVX+TIP+Vit D3组胫骨、股骨形态计量学静态指标与Sham组无显著差异(P>0.05)。结论葛根异黄酮与Vit D3联合给药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织的修复作用优于葛根异黄酮单独给药。

去卵巢法建立SD大鼠绝经后骨质疏松模型手术探讨

以维生素D类药物防治SD大鼠绝经后骨质疏松症的研究是近年来医学领域的一个热点。本研究探讨了建立绝经后骨质疏松模型的一种手术方法。试验对21只3月龄雌性SD大鼠进行了去除卵巢的手术,手术均采用腹正中切口,以利于卵巢的摘除。试验结果表明,该卵巢去除方法具有切口小,操作简便,成功率高的特点。文中归纳了卵巢去除手术的操作程序、术后护理,以及注意事项等,讨论了利用大鼠卵巢切除术建立绝经后骨质疏松模型的关键技术环节,为建立绝经后骨质疏松症动物模型的工作提供技术资料。

SD大鼠绝经后骨质疏松疾病动物模型的构建

目的构建绝经后骨质疏松疾病动物模型,探讨该疾病的发病机制与防治措施。方法将3个月龄健康雌性SD大鼠40只,随机分为2组,分别为去卵巢组和假手术组。去卵巢组切除大鼠双侧卵巢,手术后3个月通过检测体重、阴道涂片、血钙、子宫湿重、骨组织病理学、骨组织形态计量参数等对模型进行评价。结果手术后3个月,去卵巢组大鼠体重较假手术组明显增加(P<0.05),子宫湿重、血钙含量较假手术组量明显下降(P<0.05),阴道涂片显示去卵巢组大鼠均无发情表现,骨组织病理学观察显示去卵巢大鼠胫骨骨小梁断裂,小梁间距变宽,结构紊乱,骨形态计量学数据显示去卵巢大鼠胫骨、股骨干骺端骨小梁面积百分率、骨小梁平均厚度均较假手术组减少(P<0.05)。结论 3个月龄SD大鼠去卵巢后3个月可成功复制出绝经后骨质疏松模型。

肠道SIgA及其调节机制研究进展

黏膜免疫系统（Mucosal immune system，MIS）是指广泛分布于胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜以及一些分布于外分泌腺体处的淋巴组织，它们是执行局部特异性免疫功能的主要场所。肠道黏膜面积巨大，肠黏膜与细菌、毒素等病原广泛接触，是机体抵御感染最重要的屏障之一，同时也是机体受威胁最大的部位，机体95％以上的感染均发生于黏膜或者是从黏膜入侵”。

活性维生素D_3类似物的合成及构效关系研究

1α,25-二羟基维生素D_3(1α,25-(OH)_2-D_3,125D)是维生素D中最具生理活性的代谢产物,但因高钙血症副反应而限制其临床应用。从对构效关系的研究出发,迄今已合成三千多种类似物。本文综述了近年来对某些A环修饰(C2位修饰、C3位修饰、芳香A环类似物、A环开环类似物)、侧链修饰、CD环修饰、seco-B环修饰和非开环甾体的活性维生素D_3类似物的设计、合成以及构效关系的研究,旨在为新型较佳活性维生素D_3类似物的合成及临床开发提供参考。

牦牛肠源Lactobacillus acidophilus L3对其肠道分泌型免疫球蛋白A及免疫相关因子的影响

为了研究牦牛肠源Lactobacillus acidophilus L3（嗜酸乳杆菌）对其肠道分泌型免疫球蛋白A（SIg A）及免疫相关因子的影响,将10头健康牦牛（2～2.5岁）随机分为2组,分别为益生菌组和空白对照组,益生菌组在饲料中添加2×109CFU·kg-1L.acidophilus L3,饲喂28 d后取其小肠样品,ELISA检测试验组和对照组十二指肠、空肠、回肠中SIg A、白细胞介素-2（IL-2）、IL-4、IL-6、干扰素γ（IFN-γ）的含量。研究结果表明,L.acidophilus L3可有效增加试验组牦牛肠道SIg A的分泌量（P〈0.05）,组内比较发现SIg A在回肠含量最高,其次为空肠和十二指肠。IL-2、IL-4、IL-6在试验组小肠中的表达量较对照组显著增加（P〈0.05）,试验组小肠IFN-γ的表达量较对照组降低（P〈0.05）。证实L.acidophilus L3可提高牦牛肠道的黏膜免疫功能。

铜绿假单胞菌外膜蛋白F原核载体构建、表达条件优化及免疫保护作用研究

目的构建并鉴定铜绿假单胞菌(PA)外膜蛋白F(Opr F)原核表达载体,分析Opr F蛋白免疫保护作用,优化Opr F蛋白诱导表达条件。方法通过分子克隆获得Opr F蛋白的表达菌株。利用切胶纯化获得Opr F蛋白,免疫小鼠,通过PA攻毒实验分析Opr F蛋白免疫保护作用。采用正交试验,获得Opr F菌株的最佳表达条件与培养条件。结果 Opr F重组载体双酶切、DNA测序鉴定结果与预测一致。Western blot检测表明抗体能与Opr F蛋白结合。Opr F蛋白对小鼠保护率达64.29%。Opr F菌株最佳诱导表达条件为:加IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时菌液OD600值1.0,温度32℃,诱导时间8 h;最佳培养条件为:转速230 r/min,葡萄糖浓度为0%,装液量50 ml。结论获得Opr F表达菌株最佳的表达条件与培养条件;验证Opr F蛋白对小鼠PA感染有免疫保护作用。