干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织的表达及其对5637细胞生物学特性调节

目的研究干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织中的表达及对5 637细胞生物学的影响,为临床治疗提供依据。方法选取2015年1月至2016年1月74例膀胱癌组织、32例癌旁组织以及24例正常膀胱癌组织病理标本。采用免疫组化法检测标本中的Oct4表达;体外培养膀胱肿瘤细胞,采用MTT法检测siRNA敲除Oct4后对与细胞增殖作用的影响;采用细胞划痕及Transwell试验测定细胞迁移、侵袭能力的影响;分析干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织中的表达及对5 637细胞生物学的影响。结果人膀胱癌组织中12例Oct4蛋白检测阴性,62例Oct4蛋白检测阳性,阳性率为83.78%,显著高于膀胱癌组织的21.87%(P<0.05);正常组织中Oct4蛋白阳性率为16.67%,三种不同细胞组织Oct4蛋白阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。膀胱癌组织Oct4蛋白表达在不同临床分期中无统计学意义(P>0.05);膀胱癌组织Oct4蛋白表达在不同病理分级、淋巴结转移中差异具有统计学意义(P<0.05);病理分级越高、淋巴结转移,Oct4蛋白表达越高;免疫组化结果显示:膀胱癌组织中Oct4蛋白表达阳性率为83.78%,膀胱癌旁组织Oct4蛋白表达阳性率为21.87%;正常组织Oct4蛋白表达阳性率为16.67%。三种不同的细胞进行划痕试验2 h后进行观察:结果显示:Oct4-siRNA转染后细胞迁移显著减弱,而其他细胞大量迁入划痕区域。结论 Oct4的表达与人膀胱癌的分级、淋巴结转移关系密切,但是不同临床分期差异不具有统计学意义;Oct4高表达在膀胱癌的发生、发生中发挥重要作用,能抑制膀胱癌细胞系Oct4基因表达,抑制肿瘤细胞增殖,细胞细胞凋亡,具有较高的临床应用价值。

mRNA介导表达肿瘤坏死因子相关的凋亡在肾癌细胞抑制中的机制

目的观察mRNA介导表达肿瘤坏死因子相关的凋亡在肾癌细胞抑制中的作用机制。方法选取2014年1月至2016年6月医院诊治的经病理确诊肾癌患者12例,通过实时定量PCR比较肾细胞癌(RCC)细胞系与正常细胞系在miR-138和miR-199表达水平,并且在miR-138和miR-199控制下RCC细胞外基因的表达,根据Western blot和G0/G1细胞分析Ad-TRAIL-3MREs诱导人肾癌细胞(ACHN细胞)和L-02细胞凋亡的机制,利用MTT检测不同种重组腺病毒感染下RCC细胞和正常细胞活性。结果细胞PCR反应结束后标准曲线斜率为0.984,标准曲线线性关系良好。根据样本及标准品的PCR反应循环数计算样本的mRNA含量。利用mastercycler ep realplex sample anylysis软件获得miR-138、miR-199含量。12例肾细胞癌组织miR-138、miR-199含量,显著低于正常肾组织(P<0.05)。在Ad-TRAIL-3MREs诱导ACHN细胞和L-02细胞中处理的ACHN细胞活化的caspase 3和PARP蛋白水平表达相对较高;与此相反,采用Ad-TRAIL-3MREs转染的L-02细胞caspase 3和PARP蛋白水平并没有活化。ATRAIL在降低癌细胞和正常细胞的生存率差异无统计学意义(P>0.05);相反,在RCC细胞中AD-TRAIL-3MREs能诱导细胞毒性。结论在RCC细胞中miR-138和miR-199水平相对较低,且能抑制正常细胞外源基因表达,TRAIL通过选择性表达能诱导RCC凋亡,且mRNA反应元件(MRE)对正常细胞无毒性。