链霉亲和素-人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白的制备与活性鉴定

目的:制备链霉亲和素(SA)连接的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)融合蛋白(SA-hGM-CSF),并对其生物学活性进行鉴定。方法:在NCBI数据库中查找SA和hGM-CSF序列,将序列合成后连接入Pet28表达载体中,构建SA-hGM-CSF-Pet28重组表达载体,在BL21(DE3)表达感受态中利用IPTG诱导剂诱导表达,经His镍柱纯化,尿素梯度复性,聚丙烯酰胺凝胶电泳法和蛋白质印迹法(WB)鉴定融合蛋白,通过TF-1细胞检测融合蛋白的生物学活性。结果:SA-hGM-CSF融合蛋白可在BL21(DE3)中高效诱导表达,经His镍柱纯化后该融合蛋白纯度较高。经尿素梯度复性后,细胞学实验验证该融合蛋白具有生物学活性。结论:成功表达具有生物活性的融合蛋白SA-hGM-CSF,该结果为SA-hGM-CSF表面锚定修饰的肿瘤细胞疫苗的研究提供了实验基础。

三阴性乳腺癌的耐药机制及与DLG5的研究进展

三阴性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer, TNBC)是乳腺癌的一种特定亚型,因其不表达雌激素受体 (Estrogen Receptor, ER)、孕酮受体(Progesterone Receptor, PR)或人表皮生长因子受体-2 (Epi-dermal Growth Factor Receptor, HER-2)具有高侵袭能力,预后较其他类型乳腺癌差,在治疗上往往因为出现耐药性导致癌症进展和复发。早期应用化疗药物对三阴性乳腺癌有明显治疗效果,但随着化疗药物的应用,患者可逐渐出现耐药,导致总体生存率低下。因此,研究三阴性乳腺癌的化疗耐药性是目前乳腺癌的关注热点。本文回顾了三阴性乳腺癌耐药的研究进展,特别是极性蛋白DLG5在三阴性乳腺癌耐药中的作用以及影响,以期为临床治疗提供参考。

甲型流感病毒血凝素HA蛋白保守抗原表位的鉴定

流感大流行对人类健康危害严重,流感病毒型别多,易变异,现有疫苗不能诱导机体产生不同亚型间的交叉保护力,造成预防困难,因此,精细定位甲型流感病毒保守抗原表位是研究重点。本研究通过使用单克隆抗体和计算机模拟预测两种技术,采用免疫学方法和生物信息学方法,获得了4株识别血凝素(HA)保守抗原表位的单克隆抗体,以这4株单抗为研究工具,最终明确HA茎部区域多肽STQNAID(409~415 aa)是甲型流感病毒HA保守区抗原表位,为开发甲型流感通用疫苗提供理论和实验基础。

PD-1、PD-L1抑制剂联合治疗在三阴性乳腺癌中的研究进展

乳腺癌位居女性恶性肿瘤之首, 而三阴性乳腺癌(TNBC)又因其高度异质性和相关受体不表达, 缺乏针对性的治疗手段, 治疗现状不满意。随着近年来对肿瘤免疫疗法的研究, 以程序性细胞死亡蛋白1/程序性细胞死亡配体1(PD-1/PD-L1)作为治疗靶点的药物正越来越多地应用于TNBC患者, 且其联合化疗、靶向治疗、放疗、溶瘤病毒等可进一步提高疗效, 为TNBC患者提供了新的治疗策略。本文就目前在TNBC患者中以PD-1、PD-L1抑制剂为基础的联合治疗进行总结, 以期为TNBC患者临床治疗提供参考。

优化硫酸铵法纯化单克隆抗体

改进硫酸铵法纯化单克隆抗体,优化硫酸铵的饱和度,让最终饱和度达45%,通过两次沉淀,使单克隆抗体的纯度进一步提升,再利用醋酸缓冲液去除杂蛋白,最终得到便于保存的单克隆抗体。优化后的硫酸铵法提取出蛋白质的纯度大大提高,且浓度和效价都高于传统方法,能纯化出与亲和层析纯度相媲美的单克隆抗体。优化后的硫酸铵沉淀法简单便捷,易于操作且纯化抗体纯度高,也便于抗体保存。