2015～2017年陕西省人民医院临床血流感染病原菌的分布及耐药性分析

目的分析陕西省人民医院2015~2017年血培养病原菌的分布及耐药性变迁,为临床诊断和治疗提供数据依据。方法收集2015~2017年住院患者血培养阳性标本2 599份,依据美国临床实验室标准化协会(CLSI) 2016年标准,采用WHONET 5.6和SPSS17.0软件进行数据分析。结果 2 599株病原菌中革兰阳性菌1 141株(43.9%);革兰阴性菌1 282株(49.3%)和真菌176株(6.8%)。临床科室以重症医学科(425株,16.4%)、新生儿科(188株,7.2%)、急诊外科(216株,8.3%)、呼吸内科(199株,7.7%)和肝胆外科(185株,7.1%)等为主。血培养阳性菌存在季节分布,夏季高于其他季节。革兰阳性菌以表皮葡萄球菌(260株,10%)和金黄色葡萄球菌(177株,6.8%)为主,其对克林霉素、红霉素、苯唑西林的耐药率均>50%。革兰阴性菌中以大肠埃希菌(572株,22%)和肺炎克雷伯菌(238株,9.2%)最为常见,对头孢呋辛、哌拉西林及复方新诺明耐药率>52%;对碳青霉烯类抗生素耐药率<2.4%。结论血培养分离出的病原菌以革兰阴性为主,临床应加强血流感染的耐药监测,合理用药。

陕西省临床基因扩增检验实验室技术人员上岗培训

为规范陕西省医学检验人员的临床基因扩增检验操作,不断提升本省的核酸检测能力和效率,陕西省卫生健康委委托陕西省临床检验中心举办“全省临床基因扩增检验实验室技术人员上岗培训班”。截止目前,陕西省临床检验中心举办八期培训班,通过丰富全面的理论知识和实验技能操作培训,累计九千多名学员培训合格,取得临床基因扩增检验上岗证书,为陕西省的医学检验事业做出贡献。

常规凝血检验项目对异位妊娠大出血输血治疗不良反应监测的应用价值

目的探究常规凝血检验项目对异位妊娠大出血输血治疗不良反应监测的应用价值。方法以2018年2月至2020年12月的100例异位妊娠大出血输血治疗患者为研究对象,根据是否出现输血不良反应将其分为试验组(22例,存在输血不良反应)和对照组(78例,不存在输血不良反应)。比较两组输血前、后的凝血功能指标、血常规指标。结果输血前,两组的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);输血后,试验组的PT、APTT、TT长于对照组,FIB水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。输血后,两组的红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(Hb)水平高于输血前(P<0.05);输血后,试验组的RBC、PLT、HCT、Hb水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论常规凝血检验项目应用于异位妊娠大出血输血治疗患者中,可较好判断其输血后的相关不良反应情况,更好改善预后。

非编码RNAUCA1基因的细胞定位和组织表达谱分析

目的对UCA1基因进行细胞定位和组织表达谱分析,证实它与膀胱肿瘤的相关性,为进一步研究该基因在膀胱肿瘤中的作用提供实验依据。方法采用电镜原位杂交方法对基因进行细胞定位,RT-PCR分析基因在组织中的表达情况。结果透射电镜观察细胞膜上可见散在胶体金颗粒,胞浆有大量的胶体金均匀分布,没有特异性聚集现象,核内有散在的金颗粒。组织表达谱分析UCA1基因在绒毛组织、胎盘组织和胎儿的膀胱均有明显表达;在成人心脏和脾脏有表达外,其余组织均无表达;在8种常见癌中均有差异表达,且大多数癌比相应的癌旁组织表达量高;在膀胱正常粘膜、前列腺增生、肾癌及相应的癌旁组织中均不表达,而在膀胱肿瘤中均有不同程度的表达。结论UCA1基因定位于细胞浆,该基因可能与膀胱肿瘤密切相关,有望成为膀胱肿瘤分子标记物。

急性心肌梗死患者纤溶活性变化及药物干预效果评价

目的讨论急性心肌梗死(AMI)患者凝血与纤溶指标变化及其药物的干预作用。方法用酶联免疫法(ELISA)及免疫法等定量分析47例AMI患者入院即刻及治疗14 d后血浆vWF,FIB,DD,t-PA,PAI等相关指标变化,并观察治疗14d后AMI患者中氯吡格雷组与常规治疗组血浆vWF,FIB,DD,t-PA,PAI水平变化。结果AMI患者急性发作期血液处于高凝状态,血浆vWF,FIB水平明显高于健康对照组(P<0.01),纤溶活性指标t-PA较健康组明显降低(P<0.01),PAI,DD水平升高(P<0.01)。治疗14 d后血浆vWF,FIB,t-PA水平接近健康对照组(P>0.05);治疗14 d后氯吡格雷组与常规治疗组血浆t-PA,FIB,PAI有显著性差异(P<0.05)。结论AMI患者有明显凝血、纤溶功能异常,氯吡格雷与阿司匹林联用能明显改善凝血、纤溶功能异常。

长链非编码RNA UCA1与miRNA-99b在膀胱癌细胞株和膀胱癌组织表达的相关性分析

目的:验证LncRNA UCA1与miRNA-99b的相关性。方法:采用荧光定量PCR法检测UCA1和miRNA-99b在过表达和敲低表达UCA1的膀胱癌细胞、膀胱癌组织中的表达。结果:在敲低UCA1表达的膀胱癌细胞5637中,UCA1表达下调60%,而miRNA-99b的表达上调250%;在过表达UCA1的膀胱癌细胞UMUC2中,UCA1表达上调410%,而miRNA-99b的表达下调60%;UCA1在膀胱癌中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),而miRNA-99b在膀胱癌中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05);UCA1与miRNA-99b在膀胱癌组织中的表达呈负相关(R=-0.502,P<0.05)。结论:UCA1负向调节miRNA-99b的表达,但是它对miRNA-99b的调节在膀胱癌发生发展中的作用机制还需深入研究。

LncRNA UCA1对卵巢癌细胞侵袭及迁移的影响及机制

目的:探讨长链非编码RNA UCA1对卵巢癌细胞SKOV3侵袭及迁移能力的影响及可能的作用机制。方法:用脂质体2000将pc DNA/UCA1表达载体及pc DNA3.1空载体转染卵巢癌细胞SKOV3细胞。用G418筛选,建立稳定表达UCA1 RNA的SKOV3/pc DNA-UCA1细胞及转染空载体的SKOV3/pc DNA3.1细胞。RT-PCR方法检测两株细胞中UCA1的表达,鉴定阳性细胞株。Millicell小室检测两株细胞侵袭及迁移能力的变化,蛋白印迹法检测两株细胞MMP2及MMP9蛋白表达的变化。结果:成功构建稳定表达UCA1的SKOV3细胞,表达UCA1 RNA后,SKOV3细胞的侵袭及迁移能力均增加,MMP2及MMP9蛋白表达增加。结论:UCA1 RNA可能通过增加SKOV3细胞中MMP2及MMP9的表达来增强其侵袭及迁移能力,在卵巢癌侵袭及进展中发挥作用。

梗阻性黄疸患者糖耐量及胰岛素释放功能的临床研究

本文测定48例梗阻性黄疸患者馒头餐糖耐量及胰岛素释放试验,显示餐后1小时、2小时和3小时血糖显著高于对照组,且高峰后移(P<0.05或P<0.01),餐后1小时胰岛索浓度和胰岛素释放指数显著低于对照组(P<0.05),胰岛素高峰后移,而餐后3小时胰岛素和IGI又显著高于对照组(P<0.05),血清胆红质与餐后2、3小时血糖呈显著正相关(均为P<0.05)。本文对梗阻性黄疸糖代谢障碍特点及临床意义进行了讨论。

239株金黄色葡萄球菌的分布及耐药性分析

目的了解金黄色葡萄球菌（SA）的临床分布及耐药情况，为临床合理使用抗生素提供可靠的依据。方法采用API鉴定系统进行菌种鉴定；K—B纸片扩散法进行药敏试验，按NCCLS2009年版标准判断结果；用WHONET软件对239株SA的耐药情况进行回顾性分析。结果239株sA重症监护室分布最多，其次为老年病科和神经外科，分别占35．6％，20．9％，13．8％；标本来源以痰液及脓液为主，分别为65．7％和23．4％；SA对阿奇霉素的耐药率最高为86．5％，其次为青霉素及红霉素，分别为86．2％和86．28％，该茵对替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺的耐药率都为0％，其次是阿米卡星，但耐药率高达60．1％。结论SA对抗生素耐药率高且呈现出多重耐药现象，应引起临床高度重视。

非编码RNA—UCA1对膀胱癌细胞耐药及转化能力的影响

目的:构建长链非编码RNA-UCA1的真核表达载体pcDNA/UCA1,探讨UCA1对膀胱癌细胞BLS-211耐药及转化能力的影响。方法:构建UCA1的真核表达载体pcDNA/UCA1,用脂质体2000将pcDNA/UCA1表达载体及空载体pcDNA3.1转染入膀胱癌细胞BLS-211细胞,用G418筛选,建立稳定表达UCA1RNA的BLS-211/UCA1细胞及转染空载体的BLS-211/pcDNA3.1细胞,用RT-PCR方法检测两株细胞中UCA1及neo基因的表达,鉴定阳性细胞株,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测两株细胞对顺铂及丝裂霉素耐药的变化,软琼脂克隆形成实验检测两株细胞克隆形成率的变化。结果:成功构建pcDNA/UCA1真核表达载体,并建立起稳定表达UCA1的BLS-211/UCA1细胞,表达UCA1 RNA后,BLS-211/UCA1细胞对顺铂及丝裂霉素C的耐药性增加,软琼脂克隆形成能力增强。结论:UCA1 RNA增强了膀胱癌细胞BLS-211的耐药能力及转化能力,可能在膀胱癌复发及进展中发挥作用。

基于HCA587的HLA-A2限制性表位肽的体内免疫原性研究

目的检测来源于HCA587的HLA-A2限制性表位肽免疫HLA-A2转基因小鼠后产生细胞应答的水平,筛选出体内具有免疫原性的HLA-A2限制性表位肽。方法将来源于HCA587的候选HLA-A2限制性肽与MHC-Ⅱ类限制性肽HBV-core128-140、不完全弗氏佐剂、Cp G ODN1826联合应用皮下免疫HLA-A2转基因小鼠,用酶联免疫斑点实验(ELISpot)检测小鼠脾细胞表位肽特异性细胞免疫应答的水平,流式细胞术检测表位肽特异性的CD8+T细胞比例。结果在检测的4个表位肽中,p248-256诱导HLA-A2转基因小鼠产生的细胞免疫应答最强,HLA-A2-H-2Kb-p248-256四聚体染色进一步表明p248-256免疫后可产生p248-256特异性的CD8+T细胞。结论来源于HCA587的HLA-A2限制性表位肽中,p248-256具有较强的体内免疫原性。

低频交变电磁场对去势大鼠血液骨转换的调控效应研究

目的： 明确低频正弦波交变电磁场对骨质疏松大鼠血液中骨转换相关重要标志物的影响，为进一步揭示交变电磁场大鼠骨代谢的调控效应提供依据。方法：36只4月龄雄性SD大鼠，随机等分成3组，分别为空白对照、及＋交变电磁场刺激组。对及＋交变电磁场刺激组大鼠行以构建骨质疏松动物模型，空白对照组打开腹腔但不摘除卵巢。对＋交变电磁场刺激组大鼠施加频率15 Hz、强度20 Gs的全身性正弦波交变磁场刺激，每天刺激2小时，空白对照和组大鼠置于未通电流线圈中作为假暴露。连续刺激12周后，大鼠处死提取血液样本，使用全自动生化分析仪检测血钙和血磷，使用ELISA试剂盒检测血清骨钙素（OCN）、1型前胶原氨基末端肽（P1NP）、抗酒石酸磷酸酶5b（TRACP5b）和1型胶原交联C-末端肽（CTX）含量。结果：交变电磁场显著上调了大鼠骨形成标志物血清0CN和P1NP的表达（P〈0.05），下调了骨吸收标志物TRACP5b和CTX的表达（P〈0.05），显著了去势大鼠血钙和血磷的表达（P〈0.05）。结论：交变电磁场能够提升大鼠骨形成速率且抑制其骨吸收速率，血钙和血磷含量，本研究为揭示交变电磁场对缺乏诱发的的调控机制提供了重要依据。

现场技术审核对PCR实验室质量管理的影响分析

目的总结临床PCR实验室参加室间质量评价活动的PT结果,探讨现场审核与否对室间质评结果的影响,进而分析实验室现场审核对其质量管理的影响。方法统计分析2008~2019年陕西省临床检验中心PCR(HBV-DNA,HCV-RNA)参评实验室室间质评活动结果。结果①2008~2019年累计参评HBV-DNA的实验室次数为617次,其中通过现场审核的实验室累计数450次,合格单位累计数437次,平均能力比对96.4%,合格率97.1%;未通过现场审核的实验室累计数167次,合格单位累计数149次,平均能力比对88.3%,合格率89.2%;②2008~2019年累计参评HCV-RNA的实验室数为526次,其中通过现场审核的实验室累计数425次,合格单位累计数414次,平均能力比对96.6%,合格率97.4%;未通过现场审核的实验室累计数101次,合格单位累计数96次,平均能力比对92.9%,合格率95.0%;③HBV-DNA 2008~2019年累计合格率经χ^2检验,二者比较差异有统计学意义(χ^2=15.888,P<0.001)。结论通过现场审核的PCR实验室能严格进行规范操作,有助于做好室间质评工作,有效提高临床检测的水平和质量。

自制HLA—B27基因检测试剂盒的应用

目的检验自制HLA-B27基因检测试剂盒的可靠性。方法根据序列特异性引物聚合酶链反应（SSP—PCR）原理，通过对HLA数据库上HLA—B位点基因序列的比对，分析选择出B27特异序列合成引物，进而对PCR反应体系和条件进行摸索优化，自制HLA-B27基因检测试剂盒，同时以北京思而成B27基因检测试剂盒为对照试剂盒，对254例疑似强直性脊椎炎、急性葡萄膜炎等患者EDTA抗凝血的B27基因进行检测，结果和对照试剂盒进行比较，分析其一致性。结果自制试剂盒疑似患者的HLA-B27阳性检出率为35．8％，对照试剂盒的检出率36．6％，经配对x^2检验，x^2=0．125，P=0．727〉0．05，两试剂盒阳性检出率差异无统计学意义。结论自制试剂盒的成本低，具有一定的实验室研究应用价值。

SSP-PCR方法检测HLA-B27基因在AS早期诊断中的临床应用

目的 验证分子学方法序列特异引物聚合酶链反应（SSP-PCR）在强制性脊柱炎（AS）早期诊断中的临床应用.方法 收集陕西省人民医院2013年1月～12月疑似强直性脊柱炎患者135例,分别采用SSP PCR方法检测全血人类白细胞抗原B27位点（HLA-B27）和进行影像学骨盆、骶髂关节的X线、CT或者MRI检查,比较SSP PCR方法和影像学方法诊断的一致性及差异性.结果 疑似患者用SSP PCR方法检测HLA-B27的阳性检出率为37.0％,而影像学方法的诊断异常率为23.7％,SSP-PCR方法的阳性率较影像学方法高出13.3％.经配对X2检验,X2=9.529,P=0.003,＜0.01,两种方法阳性检出率差异具有统计学意义.结论 分子学方法检测HLA-B27基因能够用于早期预测AS的发生.

五项肝酶学指标在肝癌诊断上的意义

目的:了解а-岩藻糖苷酶(AFU)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)五项肝酶学指标在肝癌诊断中的意义。方法:使用全自动生化分析仪对156例肝病患者和30例正常人血清中五项肝酶学指标进行检测,对检测结果进行统计学分析。结果:原发性肝癌组AFU、ALT、AST、ALP、GGT五项指标均明显增高,其中AFU的血清含量为(39.5±1.76),与转移性肝癌组有差异,与良性肝占位性病变(肝血管瘤、肝囊肿等)有明显的差异P<0.05;原发性肝癌组和转移性肝癌组ALP、GGT均显著增高,与良性肝占位性病变有明显的差异P<0.05;转移性肝癌组血清ALT活性为(132.0±190.7),与原发性肝癌组血清ALT活性(64.0±25.4)相比,明显的增高P<0.05。结论:AFU、ALP、GGT在肝癌的诊断中有较好的应用价值;AFU、ALT在原发性肝癌与转移性肝癌以及良性肝占位性病变的鉴别诊断中有较好的应用价值。