Nrf2表达与顺铂诱导食管癌细胞凋亡关系的实验研究

目的探讨干扰核因子E2相关因子2(Nrf2)表达与顺铂诱导食管癌细胞凋亡的关系。方法食管癌Eca-109细胞转染干扰质粒Nrf2-si RNA为干扰组,转染si-NC为阴性对照组,不作任何处理为空白对照组,MTT法测定各组Eca-109细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC_(50)),流式细胞仪检测Eca-109细胞顺铂作用后的凋亡情况;Western blotting检测Eca-109细胞顺铂作用后caspase-3蛋白表达的变化。结果干扰组Nrf2表达量为0.14±0.02,低于阴性对照组和空白对照组的0.61±0.07和0.57±0.04,差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法显示空白对照组、阴性对照组和干扰组的IC_(50)分别为15.29、14.02和8.87 mg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。顺铂(10 mg/L)作用24 h后,空白对照组、阴性对照组和干扰组的细胞凋亡率分别为(18.12±2.36)%、(17.04±2.21)%和(28.07±2.44)%,caspase-3蛋白表达量分别为0.72±0.03、0.73±0.05和1.02±0.17,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Nrf2表达降低增加了顺铂诱导Eca-109细胞凋亡的能力,可能作为食管癌顺铂化疗增敏的一个靶点。

Nrf2在EGCG诱导食管癌细胞凋亡中的作用

目的:探索核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)是否影响表没食子儿茶素没食子酸酯(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对食管癌细胞ECA-109的凋亡。方法:应用MTT方法在ECA-109的Nrf2干扰细胞(siRNA)与阴性对照细胞(si-NC)和空白对照细胞(control)中计算EGCG的半数致死量(IC_50)。使用流式细胞仪分析EGCG对3组细胞凋亡的影响。使用Western blot分析EGCG对3组细胞Nrf2与cleaved-Caspase-3蛋白表达的影响。结果:在食管癌ECA-109细胞中,EGCG能够诱导Nrf2的表达,而Nrf2的缺失明显降低了EGCG的IC_50、增加了凋亡率、上调了其对cleaved Caspase-3蛋白的影响。结论:EGCG对Nrf2的诱导减弱了其对食管癌细胞凋亡的影响。

EGFR突变阳性非小细胞肺癌中上皮间质转化对EGCG逆转吉非替尼耐药的作用

目的探索表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)在EGFR突变阳性非小细胞肺癌中逆转吉非替尼耐药与上皮间质转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用。方法首先构建吉非替尼耐药的PC9细胞。将实验分为5组,分别为PC9耐药组、EGCG处理PC9耐药细胞的EGCG组、吉非替尼处理PC9耐药细胞的吉非替尼组、吉非替尼联合EGCG处理PC9耐药细胞的吉非替尼+EGCG组以及PC9组。MTT法检测细胞半数致死量(IC 50)。流式细胞仪检测细胞周期及凋亡变化。Western blot检测细胞Caspase-3、Bcl-2、E-cadherin与N-cadherin蛋白表达。结果与吉非替尼组比较,吉非替尼+EGCG组IC 50明显降低(P<0.05)。与PC9耐药组、吉非替尼组及EGCG组比较,吉非替尼+EGCG组细胞G2/M期增多(P<0.05),凋亡百分数增多(P<0.05)、Caspase-3表达增多(P<0.05),Bcl-2表达减少(P<0.05)。与PC9组比较,PC9耐药组细胞E-cadherin表达减少(P<0.05),N-cadhrein表达增多(P<0.05);与PC9耐药组比较,EGCG组细胞E-cadherin表达增多,N-cadhrein表达减少(P<0.05)。结论EGCG能够逆转吉非替尼耐药,其中对EMT抑制发挥了一定作用。

NGR与iso DGR对抗菌肽在CD13-/αvβ3+乳腺癌中抗瘤活性影响

目的比较携带NGR结构抗菌肽(CNAK)与携带isoDGR结构抗菌肽(CDAK)在CD13^-/αvβ3^+乳腺癌细胞(MDA-MB-231)中靶向识别与和诱导凋亡能力。方法MTT法计算不同浓度CDAK与CNAK作用MDA-MB-231细胞24h的细胞存活率与半抑制浓度(IC50)。CRLK(随机肽)、CDAK与CNAK作用MDA-MB-231和HFF细胞12h,荧光显微镜观察识别能力,流式细胞仪分析结合能力。CRLK、CDAK与CNAK作用MDA-MB-231细胞24h,流式细胞仪与Western-blot分析凋亡与Caspase-3蛋白表达。结果CDAK与CNAK对MDA-MB-231细胞生长抑制呈剂量依赖性,IC50分别为227μg/ml与210μg/ml。CDAK与CNAK仅进入MDA-MB-231细胞,CRLK未进入细胞内。CDAK与CNAK细胞结合能力分别为22±2.16与28±2.98(P<0.05)。CDAK组与CNAK组细胞凋亡率分别为23.56%±2.16%与25.33%±2.77%,Caspase-3相对蛋白表达量分别为1.6±0.14与1.87±0.21,差异均无统计学意义(P>0.05)。各指标中,CRLK与CDAK和CNAK之间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NGR较isoDGR能够促进更多抗菌肽与CD13^-/αvβ3^+乳腺癌细胞结合,但抑制细胞生长与诱导凋亡能力无明显差异。

深圳市异地就职护士组织承诺在职场孤独感与离职意愿间的中介作用

目的探讨深圳市异地就职护士职场孤独感、组织承诺与离职意愿的关系,为降低深圳市护士离职意愿水平提供依据。方法采用便利抽样的方法于2021年3—8月抽取深圳市4所三级综合性医院468名异地就职工作的护士为研究对象,选用自编一般人口学资料调查问卷、离职意愿量表、职场孤独感量表、组织承诺量表进行问卷调查,并对数据进行分析。结果深圳市异地就职工作护士离职意愿得分为(1.98±0.62)分,离职意愿发生率为45.1%,职场孤独感得分为(24.41±6.03)分,组织承诺得分为(51.48±14.14)分。职场孤独感、离职意愿与组织承诺均呈显著负相关(r=-0.326、-0.163,均P<0.01),职场孤独感与离职意愿呈显著正相关(r=0.315,P<0.01);组织承诺在职场孤独感与离职意愿之间起部分中介作用,中介效应值为0.035,占总效应的13.15%。结论深圳市异地就职护士群体离职意愿水平较高,医院管理部门可以通过降低来深就职护士职场孤独感以提升其组织承诺,从而降低异地就职护士离职意愿水平,保障护理队伍稳定性。