金诺芬通过EGFR/p38MAPK信号通路抑制视网膜色素上皮细胞活力

目的探讨金诺芬(AF)抑制视网膜色素上皮(RPE)细胞活力的作用机制。方法体外培养人视网膜色素上皮细胞株(ARPE-19细胞),经2.0μM AF刺激ARPE-19细胞后,通过噻唑兰(MTT)试验检测AF对ARPE-19细胞活力的影响;通过Western blot检测AF对表皮生长因子受体(EGFR)和磷酸化p38分裂原激活蛋白激酶(MAPK)及其下游蛋白表达的影响;采用免疫荧光染色检测EGFR的表达及变化。结果经2.0μMAF刺激12 h后,ARPE-19细胞胞体出现明显收缩、变形、细胞间隙扩大;MTT试验结果显示,2.0μMAF刺激12 h可抑制ARPE-19的细胞活力。Western blot结果检测显示,AF刺激可诱导总EGFR和MAPKAPK-2蛋白表达下调,同时可诱导p-EGFR、p-p38MAPK、p-MAPKAPK-2及p-HSP27蛋白表达上调。免疫荧光及鬼笔环肽染色检查结果显示,2.0μMAF刺激ARPE-19细胞12 h,可诱导EGFR从细胞膜转移到细胞质,细胞体收缩,细胞骨架破坏,F-肌动蛋白纤维变形,细胞核显著收缩。结论 AF可通过EGFR/p38MAPK信号通路抑制ARPE-19细胞的活力,其可能对增殖性玻璃体视网膜病变的发生、发展过程中RPE细胞异常存活具有潜在的防治作用。