基于文献挖掘的阿娜尔妇洁液组方实践与临床应用研究进展

近年来,妇科炎症性疾病的发病风险持续上升,阿娜尔妇洁液作为该领域治疗药物,在组方与剂型上具有独特优势,疗效发挥显著。现从阿娜尔妇洁液组方基础、临床应用、药理作用、质量控制等方面进行综述,以期为阿娜尔妇洁液的进一步深入研究提供理论参考。

不同产地款冬花中主要活性成分的研究现状与分析

款冬花为菊科植物款冬Tussilago farfara L.的干燥花蕾,系中国常用大宗中药材之一,具有润肺下气、化痰止咳之功效。款冬花化学成分丰富,药用价值高,临床疗效好。然而,不同产地款冬花受环境、栽培条件等因素的影响,它们在生长状态、理化性质、药材性状及次生代谢产物积累等方面均存在不同程度的差异,尤其是各地款冬花药材中主要化学成分参差不齐,导致药材品质参差不齐。基于此,通过本草考证探明款冬花历代产区沿革,结合课题组多年对中国主产区款冬花的研究成果,并整理款冬花中主要化学成分的研究文献资料,对倍半萜类、酚酸类、黄酮类、生物碱类化学成分进行数据收集和横向归纳比较,总结不同产地款冬花成分的研究现状,从款冬花标志性成分角度窥视其成分差异,为开展不同产地款冬花的共性和个性特征研究提供数据支撑。

基于Apriori算法与网络关联的含桃仁方剂应用规律探析

目的 运用Apriori算法挖掘含桃仁方剂的配伍规律及桃仁炮制品、每日用量与主治病证及病证类型的关联性,为桃仁的临床实践及现代应用提供参考。方法 检索《中医方剂大辞典》中含桃仁的方剂,运用Excel 2017、IBMSPSSModeler 18.0、Cytoscape 3.9.1软件、Chiplot网站进行频次统计及关联规则分析。结果 共收集含桃仁方剂1563首,多来源于宋朝,涉及486味中药,以补血药、理气药、温里药为主;主治病证366种,可归为30种病证类型,高频病证为闭经、跌打损伤、癥瘕积聚等,高频病证类型为气血津液病证、产后病证、月经病证等;桃仁炮制品以桃仁为主,其次为麸炒桃仁、燀桃仁,其中桃仁关联病证和病证类型最多,麸炒桃仁与气血津液病证关联性最好;桃仁每日用量主要分布于<3 g、5~10 g、3~4.9 g,其中桃仁<3 g与主治病证跌打损伤、产后腹痛、产后便秘等相关联,与病证类型产后病证关联性最好;3~4.9 g、5~10 g与主治病证跌打损伤关联性最好,与病证类型产后病证、气血津液病证等相关联。通过关联规则分析得到桃仁治疗闭经的核心配伍为当归、大黄、肉桂、川芎,治疗跌打损伤的核心配伍为当归、红花、大黄、赤芍,治疗气血津液病证的核心配伍为当归、肉桂、木香、大黄,治疗产后病证的核心配伍与同气血津液病证相同,仅有主次之分。结论 通过关联规则分析桃仁炮制品、每日用量与主治病证及病证类型间的关系,揭示了桃仁在具体病证中的应用特点,结果可为桃仁的临床合理应用及后续新方的研发提供参考与新思路。

陕西省泾阳县药用植物资源调查研究

调查陕西省咸阳市泾阳县中药资源物种分布及数量状况,提供必要的分析数据来保障当地中药资源市场的可持续发展。参考《第四次全国中药资源普查(试点)施行方案》,经由对三类代表区域、样地、样方调查以及标本采集,图像和书面记录,并结合历史文献考证等方法研究泾阳县中药资源的多样性。泾阳县现有中药资源77科、187属、226种,依样方统计重点品种含有42种,其中有6种在国家Ⅲ级重点保护的野生药材名录范畴内。泾阳县中药资源的物种分布状况已基本查清,对下阶段普查工作的延伸具备良好的引领意义,普查结果也支持着县域中药文化知识的普及和中药资源市场的可持续发展战略。

丹参总黄酮提取工艺的优化及其抑菌活性研究

通过单因素实验对超声提取法和热回流提取法提取丹参总黄酮工艺进行了比较研究,确定超声提取法优于热回流提取法,再通过响应面法进一步优化丹参总黄酮的超声提取工艺,并研究了丹参总黄酮对革兰氏菌的抑制活性。结果表明,最佳超声提取工艺条件为:料液比1∶10(g∶mL)、提取时间22 min、提取温度68℃、乙醇体积分数86%,在此条件下,丹参总黄酮提取率为4.140 mg·g^(-1);丹参总黄酮对革兰氏菌的抑制作用大小为:大肠埃希菌>金黄色葡萄球菌>铜绿假单胞菌。

山茱萸果核提取物不同洗脱部位对急性药物性肝损伤的作用研究

目的研究山茱萸果核提取物大孔树脂不同洗脱部位对对乙酰氨基酚(APAP)所致小鼠急性肝损伤(ALI)的保护作用。方法通过大孔吸附树脂将山茱萸果核提取物分别用0%、30%、60%和90%乙醇进行洗脱,得到4个洗脱部位(ESCOA、ESCOB、ESCOC、ESCOD)。再以生化检测和组织病理学结果,评价山茱萸果核不同洗脱部位的低、高剂量组(以生药量计为4.68 g·kg^(-1)、12.48 g·kg^(-1))对APAP所致小鼠ALI的保护作用。结果组织病理学观察结果表明,模型组小鼠的肝组织可见炎性细胞浸润,伴有肝细胞变性、片状坏死,而山茱萸果核ESCOA高剂量组、ESCOB低剂量组及ESCOC各剂量组对这些病变均有不同程度的改善;生化检测结果表明,与模型组相比,各组小鼠血清中谷丙转氨酶水平均显著降低,ESCOA低剂量组和ESCOC各剂量组小鼠血清中谷草转氨酶水平显著降低,各组小鼠肝脏组织中SOD水平均显著升高,ESCOA低剂量组、ESCOB高剂量组、ESCOC各剂量组小鼠肝脏组织中GSH-Px显著升高,ESCOA低剂量组及ESCOC、ESCOD各剂量组小鼠血清中MDA水平显著降低。结论山茱萸果核提取物的不同洗脱部位均对APAP所致小鼠ALI有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化应激反应有关。

陕西长武县中药资源普查分析研究

目的通过对长武县现有中药资源的实地普查,摸清家底,为长武县中药资源的合理开发利用和保护种植中药材提供依据。方法以全国中药资源普查技术规范为指导,通过野外样地调查、标本采集与制作、普查数据整理以及民间走访,并对长武县现有中药资源从重点品种、入药部位、生活型、采集地不同方面进行统计分析。结果普查共完成了36个样地,180个套方,1080个样方的调查。调查的药用植物种类涉及102个科,共267种,其中普查重点品种73种。结论长武县中药资源海拔分布差异较小,各乡镇分布种数差异较大。野生草本药用植物占主要位置,全草类、根及根茎类、果实和种子类的药用植物种类繁多。普查结果为长武县中医药产业发展规划的制订以及中药材合理利用、栽培与开发提供了参考依据。

陕西省三原县中药资源普查初报

[目的]系统调查和统计陕西省三原县中药资源品种、分布,厘清本县中药资源总量。[方法]依照三原县中药资源普查方案要求,对V2系统随机生成的20个样地进行野外实地调查,通过采集实物制作腊叶标本等进行药用植物一般品种和重点品种调查,同时进行栽培药材品种和传统知识调查统计。[结果]共调查样地20个,100个套方,600个样方,中药资源包含恩格勒系统中61个科,149个属,183种,涉及陕西省中药资源重点品种调查名录有43个。三原县栽培品种有皂荚、杜仲、国槐、丹参、月季等。明善堂第五代传人李朝阳在治疗脾胃病、风湿病方面常用方面四神汤加二花炭、独活汤加黑木耳等,效果较好。[结论]已基本摸清三原县中药资源总体情况,为该县中药材资源产业发展提供基础数据。

陕西彬州市中药资源普查分析研究

目的通过对彬州市现有中药资源的实地普查,摸清家底,为彬州市中药资源的合理开发利用和保护提供依据。方法以全国中药资源普查技术规范为指导,通过野外样地调查、标本采集与制作、普查数据整理以及民间走访,并对彬州市现有中药资源从重点品种、入药部位、生活型、采集地不同方面进行统计分析。结果普查共完成了37个样地,185个套方,1110个样方的调查。调查的药用植物种类涉及82个科,共288种,其中普查重点品种71种。结论彬州市中药资源海拔分布差异较小,各乡镇分布种数差异不大。野生草本药用植物占主要位置,全草类、根及根茎类、果实和种子类的药用植物种类繁多。普查结果为彬州市中医药产业发展规划的制订以及中药材合理利用、栽培与开发提供了参考依据。

不同年限黄芩根结构及黄酮类物质变化特征研究

目的建立快速鉴定黄芩生长轮数目的方法,探明其黄酮类物质的含量变化特征,为中药黄芩质量控制奠定基础。方法采用石蜡切片法、徒手切片法对1~3年生黄芩根中的生长轮现象观察研究,高效液相色谱法对2~4年黄芩根中不同组织部位7种黄酮类成分黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A进行含量测定。结果不同年限黄芩根、同一年限黄芩主根从上至下生长轮数目与黄芩实际种植年限一致;枯芩的年限鉴别中,由于上部有木间木栓,可以取根中部或下部的材料。4种黄酮类成分黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A的含量随年限的延长而增加,7种黄酮类成分的总含量为4年生>2年生>3年生。结论徒手切片法结合间苯三酚-浓盐酸染色简单、快速,可用于实际生产中黄芩实际生长年限的鉴别,其木间木栓的形成对根中黄酮类物质的积累具有一定的影响,4年生黄芩的木间木栓中含有丰富的黄酮类物质,在使用过程中建议保留使用。

基于UPLC-TOF-MS结合网络药理学探究大黄甘草汤通便止呕作用机制

目的探究大黄甘草汤(DG)通便止呕的作用机制。方法运用UPLC-TOF-MS对DG化学成分进行定性分析,结合网络药理学探讨DG发挥通便止呕功效的潜在作用机制和物质基础,并运用分子对接技术进行验证。结果UPLC-TOF-MS法采用正负离子扫描模式,根据数据库比对和文献数据从DG水煎液中共鉴定27个化合物。网络药理学分析表明DG通便止呕功效的关键成分可能为木犀草素、圣草酚、甘草次酸、大黄素等;关键靶点可能为AKT1、IL6、IL1B、TP53、TNF、EGFR;关键通路可能为胃癌、结直肠癌、IL-17、TNF、HIF-1等信号通路。有效成分与核心靶点分子对接结果良好。结论该研究较全面地阐明了DG水煎液的化学成分,明确了DG通过减轻炎症状态、促进肠道运动等作用发挥通便止呕的功效,可为DG的进一步质量评价和临床研究提供参考。

掌叶大黄(RheumpalmatumL.)WRKY基因家族鉴定与分析

【目的】本研究为开展WRKY基因功能验证提供基础,进而为大黄药材品质形成的转录调控机制研究提供科学依据。【方法】基于掌叶大黄(R.palmatum L.)的全长转录组数据,通过生物信息学方法鉴定掌叶大黄WRKY基因家族成员,分析其蛋白理化性质、结构域、系统发育关系、蛋白互作,结合转录组数据进行不同组织和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理的表达谱分析。【结果】掌叶大黄WRKY基因家族包含53个成员,编码蛋白氨基酸数量为192-748,均为亲水性蛋白,预测定位均在细胞核。掌叶大黄WRKY基因家族与拟南芥WRKY基因家族成员进化树可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个亚族,其中Ⅱ亚族WRKY占比最高(58.49%)。转录组数据分析显示掌叶大黄WRKY基因家族成员在掌叶大黄根、根茎和叶中差异表达,其中7个基因在根和根茎中表达量较高,12个基因响应MeJA处理呈差异表达,其中10个被MeJA显著诱导,4个候选基因RpWRKY5/6/9/33的qPCR分析与其转录组结果基本一致。蛋白互作网络显示RpWRKY2/16/20/22/23与查尔酮合酶(chalconesynthase,CHS)发生相互作用。【结论】获得53个掌叶大黄WRKY基因、生物信息、组织及响应MeJA的表达特征,其中5个可能与大黄蒽醌类物质的合成有关。

基于全长转录组测序的掌叶大黄bZIP基因家族鉴定分析

bZIP转录因子在调控植物生长发育、次生代谢产物合成以及胁迫响应中发挥着重要作用。本研究基于全长转录组测序分析,系统筛选掌叶大黄(Rheum palmatum)bZIP基因家族,分析其编码蛋白的理化性质、保守基序及系统进化等特性,利用RNA-seq进行基因组织表达分析和茉莉酸甲酯(MeJA)处理基因表达分析。结果表明,掌叶大黄bZIP基因家族有63个成员(RpbZIP1~RpbZIP63);根据其与拟南芥(Arabidopsis thaliana)bZIP系统发育关系被分为A~I和K、S等11个亚族;RpbZIPs基因主要编码不稳定的亲水蛋白,均定位于细胞核;RpbZIPs蛋白二级结构主要为α螺旋和无规卷曲。基于RNA-seq数据,筛选出掌叶大黄根及根茎中高表达且响应MeJA的RbZIP16、RpbZIP17、RpbZIP61等6个基因,qPCR验证了其中4个与转录组测序表达结果一致。本研究系统分析掌叶大黄bZIP基因家族,为后续进一步研究基因功能及大黄次生代谢转录调控机制提供了科学依据。

掌叶大黄4个MYB转录因子的分子克隆及胁迫表达

旨在克隆获得 RpMYB2、 RpMYB3、 RpMYB5、 RpMYB6基因ORF,并对其理化特性、系统进化关系、不同组织表达、激素与非生物胁迫下的表达等展开分析。研究结果表明, RpMYB2、 RpMYB3、 RpMYB5、 RpMYB6依次编码333、275、293、291个氨基酸,分子质量分别为34.781、30.525、31.243、33.313 ku, 4个RpMYBs蛋白均为亲水性蛋白并具有较高的热稳定性,除 RpMYB2外其余3个基因结构主要为α-螺旋和无规则卷曲,且均定位于细胞核。由蛋白结构域和保守基序分析发现, RpMYB2、 RpMYB5含有1个HTH-MYB结构域, RpMYB3、 RpMYB6含有2个HTH-MYB结构域,且不同MYB转录因子包含的保守元件数量及种类存在差异,系统进化分析显示 RpMYB2、 RpMYB5属于R1-MYB亚家族, RpMYB3、 RpMYB6属于R2R3-MYB亚家族,与其结构域分类一致。实时荧光定量结果显示,根中 RpMYB2、 RpMYB6转录本丰度最高, RpMYB3、 RpMYB5基因分别在叶片、叶柄中高表达。经200μmol·L^(-1)脱落酸(abscisic acid, ABA)处理, RpMYB5于24 h达峰值;200μmol·L^(-1)茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)诱导 RpMYB6表达,表达量随时间推移呈逐渐上升趋势且于24 h最高(为0 h的10.30倍),抑制 RpMYB3表达;200μmol·L^(-1)水杨酸(salicylic acid, SA)诱导 RpMYB6表达最为明显,3 h表达量上调至0 h的21.84倍。RpMYBs在非生物胁迫处理下表达也各有差异, RpMYB2受高温胁迫诱导表达, RpMYB3在损伤、高温胁迫下表达下调, RpMYB5在损伤胁迫下表达受抑制, RpMYB6响应高温、盐胁迫。

秦巴山区三种人参属药用植物叶绿体基因组特征分析

为明确珠子参、羽叶三七和秀丽假人参3种药用植物叶绿体基因组特征与系统发育关系,该文以秦巴山区3种人参属药用植物为研究对象,运用生物信息学技术,分析其叶绿体基因组特征及密码子使用偏好性,并探讨三者之间的亲缘关系。结果表明:(1)3种人参属药用植物的叶绿体基因组为典型的四分体结构,序列全长为156071~156104 bp,总GC含量为38.10%,基因组大小相似度较高。(2)均注释到133个基因,包括88个蛋白编码基因、37个tRNA基因和8个rRNA基因。(3)3种人参属药用植物叶绿体密码子使用偏好性相似,密码子第3位碱基以A/U结尾为主,密码子使用模式在受到突变影响的同时,主要受到自然选择的影响。(4)系统发育结果显示,3种人参属药用植物的亲缘关系较近,并且秀丽假人参同羽叶三七亲缘关系更近。综上认为,秀丽假人参与珠子参基源植物之间存在近缘关系,这项发现对于珠子参中药材的资源开发利用和分子鉴定,以及进一步研究人参属物种的分类、系统发育和进化机制提供了重要依据。

怀牛膝可培养内生真菌的多样性研究

[目的]探讨道地药材怀牛膝(Achyranthes bidentata Blume)内生真菌的多样性组成及定殖情况。[方法]通过组织块分离法,选取二年生怀牛膝茎部和根部作为分离对象,进行内生真菌分离,并采用形态学和分子生物学2种方法对分离得到的真菌进行鉴定。[结果]从怀牛膝材料中共分离纯化获得136株内生真菌,其中根部分离得到86株,茎部分离得到50株,根据形态和分子生物学特征,它们属于8目11科11属;其中,怀牛膝根部内生真菌定殖率较高(65.0%),茎部内生真菌定殖率较低(37.5%)。茎部分离的内生真菌只有8种,根部分离得到11种。[结论]怀牛膝根部内生真菌表现出了较高的种属多样性。在怀牛膝根部分离的内生真菌中,优势菌属是镰孢属和Moesziomyces。

桔梗质量标志物筛选

目的筛选桔梗质量标志物。方法建立HPLC-ELSD指纹图谱,获取化学成分信息。采用网络药理学建立成分-靶点、蛋白互作网络,筛选核心靶点与潜在质量标志物,并进行细胞实验验证。结果19批药材指纹图谱中有12个共有峰,相似度0.933~0.997。共得15种活性成分、5个核心靶点、5个质量标志物。各质量标志物干预后,A549细胞上清IL-17、TNF水平降低(P<0.01),EGFR、JUN、RXRA、STAT3、TNF、PTGS2 mRNA表达升高(P<0.01)。结论桔梗皂苷D 3、桔梗皂苷D 2、桔梗皂苷A、远志皂苷D 2、桔梗酸A可作为桔梗质量标志物,该药材能通过免疫调节、抑制炎症因子分泌、调控细胞分化与增殖等途径达到宣肺、利咽功效。

基于LC/GC-MS和网络药理学探讨大黄-桃仁药对逐瘀泻热的作用机制

目的 分析大黄-桃仁药对水煎液的化学成分,探讨其逐瘀泻热的药效物质及作用机制。方法 采用UPLC-TOF-MS、GC-MS对大黄-桃仁药对水煎液进行成分分析,结合网络药理学方法构建大黄-桃仁药对逐瘀泻热的“疾病-成分-靶点”网络,筛选目标信号通路。采用间隔24 h两次大鼠尾静脉注射内毒素脂多糖复制“瘀热”大鼠模型,通过大鼠体温变化,血液流变、凝血四项(TT、PT、APTT、FIB)、炎症因子水平、氧化应激水平等的测定对大黄-桃仁药对逐瘀泻热进行药效评价。通过分子对接技术、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)对预测的核心靶点进行验证。结果 从大黄-桃仁药对水煎液中鉴定得到化合物64个,网络药理学分析结果表明大黄-桃仁药对中芦荟大黄素、圣草酚、表没食子儿茶素没食子酸酯、原花青素等核心成分,通过作用于AKT1、PTGS2、SRC、IL1B、TNF等核心靶点,调控VEGF、MAPK、IL-17、TNF等通路达到逐瘀泻热的目的。动物实验结果表明,大黄-桃仁药对给药后,模型大鼠的氧化应激(NO、SOD、MDA)、凝血四项、血液流变、体温等指标均向正常回调,大黄-桃仁药对能够降低炎症因子IL-1β、IL-17、TNF-α含量以及核心靶点AKT1、SRC、MYC、EGFR、PTGS2、TP53 mRNA表达。结论 圣草酚、芦荟大黄素、原花青素、没食子酸儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯等化合物为大黄-桃仁药对逐瘀泻热的药效物质。大黄-桃仁药对通过多靶点,多通路调控机体炎症、氧化应激、血管生成、血管内皮等方面发挥逐瘀泻热作用。

基于指纹图谱、网络药理学预测黄芪“补气升阳”功效的质量标志物

目的 基于HPLC-ELSD指纹图谱、网络药理学和分子对接技术预测黄芪“补气升阳”相关功效的质量标志物(Q-marker)。方法 针对黄芪“补气升阳”的功效进行药效学实验。应用HPLC-ELSD技术建立不同黄芪样品的指纹图谱,获取黄芪完整的化学成分信息。借助网络药理学研究技术手段,对多种数据库筛选得到的黄芪化学成分作用靶点与相关通路进行预测分析,构建蛋白互作网络、“成分-靶点-通路-疾病”图。使用分子对接技术将质量标志物与核心靶点进行对接验证,预测黄芪发挥“补气升阳”功效的成分。结果 药效学实验证明黄芪水煎液可下调机体丙二醛(MDA)、乳酸(LD)积累、肌酸激酶(CK)活力、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;上调三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、脾脏指数、胸腺指数以达到补气、延缓疲劳、抗炎抗肿瘤等“补气升阳”类作用;黄芪指纹图谱指认了10个共有峰,结合网络药理学方法对候选化学成分进行分析,筛选获得14个核心靶点,20条代谢通路。分子对接结果显示,预测的质量标志物与靶标分子结合良好。结论 从质量标志物可测性和有效性的原则出发,结合药效学实验、指纹图谱、网络药理学、分子对接技术,将黄芪传统功效与现代疾病紧密联系对应,初步预测黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、异黄芪皂苷Ⅰ这5种成分为黄芪发挥“补气升阳”功效的质量标志物。

基于网络药理学研究南五味子对肝损伤的保护作用机制分析

通过网络药理学和分子对接的方式探究南五味子治疗肝损伤的作用机制。通过多个数据库检索并筛选出南五味子的活性成分和其治疗肝损伤的相关靶点。采用Cytoscape3.2.1软件构建活性成分-潜在靶点的网络图;运用String数据库做蛋白相互作用分析。使用R project对南五味子治疗肝损伤的关键靶点进行GO和KEGG的富集分析和网络构建,最后通过分子对接验证。最终筛选出南五味子有效化学成分31个,与肝损伤相关的靶点358个,KEGG富集分析主要在168条相关信号通路,分析表明南五味子可能通过PIK3CA、MAPK1、MAPK3、STAT3等核心靶点发挥作用,这些靶点主要富集Neuroactive ligand-receptor interaction、Proteoglycans in cancer、Prostate cancer、EGFR tyrosine kinase inhibitor resistance、Hepatitis B、ErbB signaling pathway等多条通路上,分子对接结果也显示良好的结合效果。本研究揭示了南五味子中的多成分作用于多靶点、多信号通路治疗肝损伤的作用机制,为生物实验提供理论基础。