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HAGLROS靶向miR-20a-5p调控高糖诱导的心肌细胞增殖和凋亡
被引量:
2
1
作者
刘晓东
刘晓琴
+1 位作者
党宏伟
赵玲
《广西医科大学学报》
CAS
2020年第12期2159-2165,共7页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLROS对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:H9c2细胞分为对照组(NC组,细胞正常培养)、HG组(33 mmol/L葡萄糖作用细胞24 h)、HG+si-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用转染si-NC的细胞...
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLROS对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:H9c2细胞分为对照组(NC组,细胞正常培养)、HG组(33 mmol/L葡萄糖作用细胞24 h)、HG+si-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用转染si-NC的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS组(33 mmol/L葡萄糖作用转染si-HAGLROS的细胞24 h)、HG+miR-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用转染miR-NC的细胞24 h)、HG+miR-20a-5p组(33 mmol/L葡萄糖作用转染miR-20a-5p mimics的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS+anti-miR-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-NC的细胞24 h)和HG+si-HAGLROS+anti-miR-20a-5p组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-20a-5p的细胞24 h),实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中HAGLROS和miR-20a-5p表达,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)、流式细胞术和蛋白印迹(Western blotting)分别检测细胞存活率、凋亡率及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase-3)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证HAGLROS与miR-20a-5p调控关系。结果:与NC组比较,HG组HAGLROS水平升高(P<0.05),miR-20a-5p水平降低(P<0.05),H9c2细胞存活率和CyclinD1蛋白水平降低(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05)。与HG+si-NC组比较,HG+si-HAGLROS组H9c2细胞存活率和CyclinD1、p-PI3K和p-AKT蛋白水平升高(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。与HG+miR-NC组,HG+miR-20a-5p组H9c2细胞存活率和CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+si-HAGLROS+anti-miR-NC组比较,HG+si-HAGLROS+anti-miR-20a-5p组H9c2细胞存活率和CyclinD1、p-PI3K和p-AKT蛋白表达降低(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。HAGLROS在H9c2细胞中靶向负调控miR-20a-5p表达。结论:低表达HAGLROS可促进HG诱导的心肌细胞增殖且抑制细胞凋亡,其作用机制与上调miR-20a-5p表达和激活PI3K/AKT信号通路有关。
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关键词
HAGLROS
miR-20a-5p
高糖
心肌细胞
增殖
凋亡
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职称材料
题名
HAGLROS靶向miR-20a-5p调控高糖诱导的心肌细胞增殖和凋亡
被引量:
2
1
作者
刘晓东
刘晓琴
党宏伟
赵玲
机构
陕西
宝鸡市中
心
医院
心
内科
陕西西安医学院附属医院心内科
出处
《广西医科大学学报》
CAS
2020年第12期2159-2165,共7页
基金
陕西省教育厅项目资助(No.16JK1648)。
文摘
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLROS对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:H9c2细胞分为对照组(NC组,细胞正常培养)、HG组(33 mmol/L葡萄糖作用细胞24 h)、HG+si-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用转染si-NC的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS组(33 mmol/L葡萄糖作用转染si-HAGLROS的细胞24 h)、HG+miR-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用转染miR-NC的细胞24 h)、HG+miR-20a-5p组(33 mmol/L葡萄糖作用转染miR-20a-5p mimics的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS+anti-miR-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-NC的细胞24 h)和HG+si-HAGLROS+anti-miR-20a-5p组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-20a-5p的细胞24 h),实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中HAGLROS和miR-20a-5p表达,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)、流式细胞术和蛋白印迹(Western blotting)分别检测细胞存活率、凋亡率及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase-3)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证HAGLROS与miR-20a-5p调控关系。结果:与NC组比较,HG组HAGLROS水平升高(P<0.05),miR-20a-5p水平降低(P<0.05),H9c2细胞存活率和CyclinD1蛋白水平降低(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05)。与HG+si-NC组比较,HG+si-HAGLROS组H9c2细胞存活率和CyclinD1、p-PI3K和p-AKT蛋白水平升高(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。与HG+miR-NC组,HG+miR-20a-5p组H9c2细胞存活率和CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+si-HAGLROS+anti-miR-NC组比较,HG+si-HAGLROS+anti-miR-20a-5p组H9c2细胞存活率和CyclinD1、p-PI3K和p-AKT蛋白表达降低(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。HAGLROS在H9c2细胞中靶向负调控miR-20a-5p表达。结论:低表达HAGLROS可促进HG诱导的心肌细胞增殖且抑制细胞凋亡,其作用机制与上调miR-20a-5p表达和激活PI3K/AKT信号通路有关。
关键词
HAGLROS
miR-20a-5p
高糖
心肌细胞
增殖
凋亡
Keywords
HAGLROS
miR-20a-5p
high glucose
cardiomyocytes
proliferation
apoptosis
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HAGLROS靶向miR-20a-5p调控高糖诱导的心肌细胞增殖和凋亡
刘晓东
刘晓琴
党宏伟
赵玲
《广西医科大学学报》
CAS
2020
2
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