碘乙酰胺在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中的应用

将碘乙酰胺引入SDS-PAGE样品处理,可以保证蛋白质样品完全变性并保持还原状态。碘乙酰胺作为蛋白酶抑制剂、巯基封闭试剂用于生物质谱分析、蛋白质分子结构分析和双向凝胶电泳样品制备等。在还原SDS-PAGE中,用6 mol/L的盐酸胍使蛋白质分子完全变性.用高浓度β-巯基乙醇还原分子中的二硫键.在加入碘乙酰胺至终浓度为0.1mol/L,于37℃反应2 h,加还原SDS-PAGE样品缓冲液100℃,3 min,然后进行SDS-PAGE分析。盐酸胍和碘乙酰胺可保证含二硫键的蛋白质分子完全变性并维持还原状态,在应用SDS-PAGE分析蛋白质样品的分子量和纯度中有一定意义,并且该方法简便易行。