组织芯片技术及其在医学研究中的应用

组织芯片是指固定在玻片上的高密度的组织微点阵。讨论了组织芯片技术的发展历史、现状和在细胞表型、基因表达、疾病分子诊断、预后判定以及与基因芯片的结合等方面的应用 。

组织芯片检测乳腺癌中E-cadherin表达的研究

目的 :检测不同亚型乳腺癌中E cadherin(E cad)表达情况 ,为临床制定治疗方案和判断预后提供依据。 方法 :运用组织芯片技术、免疫组织化学 (S P)法检测 4 8例乳腺癌 (其中浸润性导管癌 4 3例 ,浸润性小叶癌 4例 ,神经内分泌癌 1例 )E cad的表达情况 ,并与传统的常规病理学方法比较。 结果 :免疫组化标记 :4 3例浸润性导管癌E cad阳性表达者 37例 ,占 86 .0 % (37/ 4 3) ;4例浸润性小叶癌无一例E cad表达。对照组中 13例乳腺良性病变E cad均呈阳性表达。随访 :4 3例浸润性导管癌中 3例死亡 (7.0 % ) ;4例浸润性小叶癌中 2例死亡 (5 0 .0 % )。结论 :E cad可作为鉴别浸润性导管癌和浸润性小叶癌有价值的免疫标志物。组织芯片技术具有高信息量、简捷、快速、高效、成本低、重复性好等优点 。

用组织芯片研究结直肠腺癌组织中nm23mRNA,CD44s和CD44v6的表达意义

目的 研究 nm2 3m RNA,CD44 s和 CD44 v6表达与结直肠腺癌发生、发展及转移的关系 .方法 应用组织芯片技术 ,通过原位杂交和免疫组织化学方法分别检测 40例结直肠腺癌标本和 2 2例正常结直肠组织标本中 nm2 3m RNA,CD44 s和 CD44 v6表达情况 .结果 nm2 3m RNA在结直肠腺癌组织和正常组织中表达无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,且与结直肠腺癌的分化程度无相关性 (P>0 .0 5 ) ,但与癌细胞的侵润及淋巴结转移呈明显负相关 (r=- 0 .49,P<0 .0 1) .CD44 s在结直肠腺癌组织和正常组织中阳性率分别为 42 %(17/ 40 )和 18. 1%(4 / 2 2 ) ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而CD44 v6只在结直肠腺癌组织中表达 ,阳性率为 5 5 . 8%(2 2 / 40 ) ,且与结直肠腺癌淋巴结转移和癌侵润呈明显正相关(r=0 .47,P<0 .0 1) .在高、中分化腺癌组织中 ,CD44 v6阳性率分别为 45 .8%(11/ 2 4)和 6 8.7%(11/ 16 ) ,有显著性差异(P<0 .0 5 ) ,但在直肠腺癌组织与结肠腺癌组织间表达无显著性差别 (P>0 .0 5 ) .结论 CD44 s、CD44 v6在结直肠腺癌组织中过量表达伴随 nm 2 3m RNA表达缺失 ,与结直肠腺癌转移和侵润密切相关 ,联合检测 3种基因能更准确判断结直肠腺癌转移和侵润状态 . CD44 v6表达过量与结直肠腺癌分化程度相关 .

组织芯片技术与肿瘤研究

本文对组织芯片的概念、分类、发展历史和在抗体筛选、蛋白表达、基因扩增、新基因的发现以及与基因芯片的结合等方面进行了综述 。

组织芯片检测乳腺癌相关癌基因产物表达

目的 检测乳腺癌相关癌基因产物的表达情况 ,为临床制定治疗方案和判断预后提供依据。方法 运用组织芯片技术、免疫组化S P法检测 48例乳腺癌ER、PR、p5 3、c erbB 2、Ki 6 7、TopoⅡ和E cadherin(E cad)的表达情况 ,并与常规病理学方法进行比较。结果 48例乳腺癌中ER阳性 32例、PR阳性 36例、p5 3阳性 42例、c erbB 2阳性 31例、Ki 6 7阳性 45例、TopoⅡ阳性 41例 ;44例浸润性导管癌中 ,E cad阳性 37例 ;而 4例浸润性小叶癌E cad均阴性。对照组的 13例乳腺组织均E cad呈阳性表达。随访 :44例浸润性导管癌中 3例死亡 (6 8%) ;4例浸润性小叶癌中 2例死亡 (5 0 0 %)。结论 组织芯片技术具有高信息量、简捷、快速、高效、成本低、重复性好等优点 ,在病理学领域中具有重要的实际意义和广阔的应用前景。

穿孔素与颗粒酶B在鼻NK/T细胞淋巴瘤诊断中的意义

目的 检测鼻NK/T细胞淋巴瘤中的穿孔素、颗粒酶B表达分布情况 ,为临床治疗和预后判断提供依据。方法 运用免疫组化S P法检测 11例鼻NK/T细胞淋巴瘤中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况 ;同时与组织芯片中其他类型淋巴瘤进行比较研究 ,10例淋巴组织反应性增生作为对照。结果 11例鼻NK/T细胞淋巴瘤中均见穿孔素和颗粒酶B过度表达。以 6 0例淋巴瘤制成组织芯片的 4 2例B细胞淋巴瘤中见 11例少许穿孔素和 14例少许颗粒酶B阳性表达细胞散在分布于瘤细胞间 ,10例外周T细胞淋巴瘤中 8例少许表达穿孔素和 9例少许表达颗粒酶B。 2例间变性大细胞淋巴瘤见少许穿孔素和颗粒酶B阳性表达细胞。 2例霍奇金淋巴瘤阴性。NK/T细胞淋巴瘤的穿孔素和颗粒酶B表达程度与T、B淋巴瘤比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 穿孔素和颗粒酶B是鉴定活化的细胞毒性细胞的免疫标记物 ,可作为NK/T细胞淋巴瘤的诊断性标记物 ;其在外周T细胞淋巴瘤和B细胞淋巴瘤中的表达 ,反映了机体存在抗肿瘤的免疫反应机制。

组织芯片检测淋巴瘤中活化的细胞毒性细胞

目的:运用组织芯片及常规病理切片检测活化的细胞毒性细胞在各型淋巴瘤中的表达分布情况,为临床治疗和判断预后提供依据。方法:运用免疫组化方法检测60份淋巴瘤标本制成的组织芯片中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况,同时选择10份鼻自然杀伤细胞(NK)/T细胞淋巴瘤常规标本与组织芯片进行比较研究,10份淋巴组织反应性增生标本作为对照。结果:在60份淋巴瘤组织芯片中,发生在淋巴结内者48份,淋巴结外者12份。B细胞淋巴瘤42份,T细胞淋巴瘤16份(外周T细胞淋巴瘤10份、NK/T细胞淋巴瘤2份、T淋巴母细胞瘤2份及间变性大细胞淋巴瘤2份),2份霍奇金淋巴瘤。42份B细胞淋巴瘤的瘤细胞均不表达穿孔素和颗粒酶B。10份外周T细胞淋巴瘤中8份表达穿孔素,9份表达颗粒酶B,阳性表达细胞均为非肿瘤细胞。芯片中的2份和常规10份鼻NK/T细胞淋巴瘤中均见穿孔素和颗粒酶B过度表达。T、B细胞淋巴瘤与NK/T细胞淋巴瘤比较有显著性差异(P<0.01)。结论:穿孔素和颗粒酶B是鉴定活化的细胞毒性细胞的免疫标志物,可作为NK/T细胞淋巴瘤的诊断性标志物;其在T细胞淋巴瘤中的表达反映了机体的抗肿瘤免疫反应机制。组织芯片技术具有高信息量、简捷、高效、实验误差小、重复性好等优点,可作为研究淋巴瘤的有用工具。

β-链接素与基质金属蛋白酶-7在大肠腺瘤及其癌变组织表达的意义

目的探讨β链接素(β-catenin,β-cat)和基质金属蛋白酶-7(matrixmetalloproteinase7,MMP-7)表达与大肠腺瘤癌变的关系。方法应用组织芯片和免疫组化技术检测β-cat和MMP-7在25例大肠正常黏膜及135例腺瘤及腺瘤癌变组织的表达。结果(1)腺瘤癌变组织β-cat胞质、胞核表达率分别为68.4%、40.4%,显著高于腺瘤(40.0%、16.0%)及正常粘膜(4.0%、0.0%,均为P<0.01)。(2)高级别与低级别上皮内肿瘤相比β-cat胞质、胞核表达率显著升高(均为P<0.05),而胞膜表达率无显著性差异(P>0.05)。(3)正常黏膜、腺瘤、腺瘤癌变组织MMP-7阳性表达率依次增高,腺瘤癌变组织MMP-7阳性表达率(45.6%)显著高于正常黏膜(16.0%,P<0.05)。(4)大肠腺瘤及其癌变组织中β-cat胞质、胞核表达与MMP-7阳性表达均呈正相关关系(均为P<0.001)。结论β-cat胞质/胞核表达及MMP-7阳性表达与大肠腺瘤癌变的发生有关;β-cat与MMP-7的协同表达可能在腺瘤恶性转化过程中发挥着重要的作用。

结直肠腺癌组织中nm23-H1和MDR-1mRNA表达及与其临床病理因素的关系

目的 探讨nm 2 3 -H 1和MDR -1基因表达与结直肠腺癌临床病理因素的关系。方法 在结直肠腺癌组织芯片上用原位杂交法检测 12 6例结直肠腺癌组织中nm 2 3 -H 1和MDR -1mRNA的表达 ,并与其临床病理因素进行分析。结果 结直肠腺癌组织中nm 2 3 -H 1和MDR -1mRNA阳性表达率分别为 68.2 5 %和 44 .44 % ,nm 2 3 -H 1mRNA表达与患者性别和年龄无相关性 (P >0 .0 5 ) ,与肿瘤细胞分化 (P <0 .0 1)和浸润深度 (P <0 .0 5 )相关 ,与淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 )。MDR -1mRNA表达与患者性别 (P >0 .0 5 )和浸润深度 (P >0 .0 5 )无相关性 ,与肿瘤细胞分化程度 (P <0 .0 5 )、患者年龄 (P <0 .0 5 )和淋巴结转移(P <0 .0 1)相关。结论 分析nm 2 3 -H 1和MDR -1mRNA表达 ,有助于了解结直肠腺癌侵袭、分化和转移的特性 ,也有助于了解和判定结直肠腺癌多药耐药的特点 ,从而为临床治疗提供有价值的参考指标。

组织芯片在肿瘤标志物高通量分析中的应用

目的 :组织芯片是新的高通量分析技术 ,具有样本量大、高效、快速等特点。本研究建立组织芯片技术及其相关的免疫组化实验方法 ,并探讨其实际应用价值。方法 :在组织芯片技术的基础之上进行免疫组化和免疫荧光染色 ,同时对各种实验条件进行选择和优化 ,以优化的实验方法检测各种肿瘤标志物的并与传统病理切片技术进行了比较。结果 :制做的组织芯片排列整齐 ,组织点大小一致 ,HE染色均匀。用煮沸、酶消化、微波和高压法进行抗原修复其残点缺点率和检测阳性率分别为2 3 81% ( 15 / 63 )、 68 2 5 % ( 4 3 / 63 ) ,2 0 63 %( 13 / 63 )、77 78% ( 4 9/ 63 ) ,11 11% ( 7/ 63 )、87 3 0 %( 5 5 / 63 ) ,11 11% ( 7/ 63 )、92 0 6% ( 5 8/ 63 )。高压修复法对细胞核抗原的检测阳性率高于微波修复法 ,P <0 0 5。免疫荧光法检测组织芯片上的细胞核或浆抗原也可以得到较好的检测结果。用组织芯片检测多种肿瘤标志物其表达阳性率与大病理切片的检测结果基本相同 ,P >0 0 5。不同或同一种分子标志物在各种不同肿瘤组织中的表达有差异。结论 :用组织芯片检测不同的抗原时应选择不同的抗原修复方法。用免疫荧光法检测组织芯片上的细胞核或质抗原时最好选择高压修复法。组织芯片上的组织点基本可以代表传统病理?

组织芯片制备与原位分析技术

目的 建立组织芯片制备技术并观察在各种原位分析中的应用。方法 1 在传统病理学技术的基础上制备各种组织蜡块作为组织供体 ,再用组织阵列仪按照预先设计制作各种组织阵列蜡块 ,经切片和烤片后即成为各种组织芯片。 2 用各种组织芯片按照常规方法进行HE染色、免疫组化 (IHC)、原位杂交 (ISH)和原位PCR(IS PCR)实验分析。结果 (1)用本方法可分别制备低、中和高密度组织芯片 ,而且组织芯片排列整齐 ,外形美观 ,组织点大小一致且不易脱落。 (2 )HE染色结果均一 ,核浆对比明显 ,便于进行诊断和比较诊断 ;IHC和免疫荧光染色清晰 ,便于观察和诊断 ;ISH和IS PCR实验效果较好 ,可用于各种基因扩增分析。结论 (1)本方法是一种比较成熟的组织芯片制备技术。 (2 )用本方法制备的组织芯片可以进行HE染色和各种原位分析。

β-链接素和基质金属蛋白酶-7在结直肠腺瘤腺癌组织表达的意义

目的 探讨 β 链接素 (β cat)和基质金属蛋白酶 7(MMP 7)表达与结直肠癌发生发展和浸润转移的关系。方法 制作结直肠腺瘤 腺癌组织芯片 ,免疫组织化学检测 β cat和MMP 7在结直肠腺瘤 腺癌组织的表达。结果 (1) β cat胞核异常表达率在腺瘤癌变组织 (35 9% )显著高于腺瘤(16 7% )及腺癌组织 (19 7% ,P <0 0 5 )。 (2 )腺瘤伴重度异型增生者 β cat胞质、胞核异常表达率显著高于轻度者 (P <0 0 5 )。 (3)溃疡型、淋巴结转移阳性及C D期腺癌组 β cat胞核异常表达率均显著高于隆起型、淋巴结阴性及A B期组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。 (4)MMP 7阳性表达率在腺癌组织(6 9 2 % )显著高于正常黏膜 (15 0 % )、腺瘤 (35 0 % )及癌变组织 (46 2 % ,P <0 0 5或P <0 0 1)。(5 )溃疡型、淋巴结转移阳性及C D期腺癌组MMP 7阳性表达率均显著高于隆起型、淋巴结阴性及A B期腺癌组 (P <0 0 5 )。 (6 ) β cat胞质、胞核异常表达与MMP 7阳性表达显著正相关 (P <0 0 1)。结论 β cat胞质及胞核异常表达与结直肠癌的发生密切相关 ,可能是结直肠癌发生的早期事件 ;同时 β cat还可能通过胞核易位增强其下游靶基因MMP 7的降解作用促进结直肠癌浸润转移。