用组织芯片研究结直肠腺癌组织中nm23mRNA,CD44s和CD44v6的表达意义

目的 研究 nm2 3m RNA,CD44 s和 CD44 v6表达与结直肠腺癌发生、发展及转移的关系 .方法 应用组织芯片技术 ,通过原位杂交和免疫组织化学方法分别检测 40例结直肠腺癌标本和 2 2例正常结直肠组织标本中 nm2 3m RNA,CD44 s和 CD44 v6表达情况 .结果 nm2 3m RNA在结直肠腺癌组织和正常组织中表达无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,且与结直肠腺癌的分化程度无相关性 (P>0 .0 5 ) ,但与癌细胞的侵润及淋巴结转移呈明显负相关 (r=- 0 .49,P<0 .0 1) .CD44 s在结直肠腺癌组织和正常组织中阳性率分别为 42 %(17/ 40 )和 18. 1%(4 / 2 2 ) ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而CD44 v6只在结直肠腺癌组织中表达 ,阳性率为 5 5 . 8%(2 2 / 40 ) ,且与结直肠腺癌淋巴结转移和癌侵润呈明显正相关(r=0 .47,P<0 .0 1) .在高、中分化腺癌组织中 ,CD44 v6阳性率分别为 45 .8%(11/ 2 4)和 6 8.7%(11/ 16 ) ,有显著性差异(P<0 .0 5 ) ,但在直肠腺癌组织与结肠腺癌组织间表达无显著性差别 (P>0 .0 5 ) .结论 CD44 s、CD44 v6在结直肠腺癌组织中过量表达伴随 nm 2 3m RNA表达缺失 ,与结直肠腺癌转移和侵润密切相关 ,联合检测 3种基因能更准确判断结直肠腺癌转移和侵润状态 . CD44 v6表达过量与结直肠腺癌分化程度相关 .

组织芯片技术与肿瘤研究

本文对组织芯片的概念、分类、发展历史和在抗体筛选、蛋白表达、基因扩增、新基因的发现以及与基因芯片的结合等方面进行了综述 。

β-链接素与基质金属蛋白酶-7在大肠腺瘤及其癌变组织表达的意义

目的探讨β链接素(β-catenin,β-cat)和基质金属蛋白酶-7(matrixmetalloproteinase7,MMP-7)表达与大肠腺瘤癌变的关系。方法应用组织芯片和免疫组化技术检测β-cat和MMP-7在25例大肠正常黏膜及135例腺瘤及腺瘤癌变组织的表达。结果(1)腺瘤癌变组织β-cat胞质、胞核表达率分别为68.4%、40.4%,显著高于腺瘤(40.0%、16.0%)及正常粘膜(4.0%、0.0%,均为P<0.01)。(2)高级别与低级别上皮内肿瘤相比β-cat胞质、胞核表达率显著升高(均为P<0.05),而胞膜表达率无显著性差异(P>0.05)。(3)正常黏膜、腺瘤、腺瘤癌变组织MMP-7阳性表达率依次增高,腺瘤癌变组织MMP-7阳性表达率(45.6%)显著高于正常黏膜(16.0%,P<0.05)。(4)大肠腺瘤及其癌变组织中β-cat胞质、胞核表达与MMP-7阳性表达均呈正相关关系(均为P<0.001)。结论β-cat胞质/胞核表达及MMP-7阳性表达与大肠腺瘤癌变的发生有关;β-cat与MMP-7的协同表达可能在腺瘤恶性转化过程中发挥着重要的作用。

结直肠腺癌组织中nm23-H1和MDR-1mRNA表达及与其临床病理因素的关系

目的 探讨nm 2 3 -H 1和MDR -1基因表达与结直肠腺癌临床病理因素的关系。方法 在结直肠腺癌组织芯片上用原位杂交法检测 12 6例结直肠腺癌组织中nm 2 3 -H 1和MDR -1mRNA的表达 ,并与其临床病理因素进行分析。结果 结直肠腺癌组织中nm 2 3 -H 1和MDR -1mRNA阳性表达率分别为 68.2 5 %和 44 .44 % ,nm 2 3 -H 1mRNA表达与患者性别和年龄无相关性 (P >0 .0 5 ) ,与肿瘤细胞分化 (P <0 .0 1)和浸润深度 (P <0 .0 5 )相关 ,与淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 )。MDR -1mRNA表达与患者性别 (P >0 .0 5 )和浸润深度 (P >0 .0 5 )无相关性 ,与肿瘤细胞分化程度 (P <0 .0 5 )、患者年龄 (P <0 .0 5 )和淋巴结转移(P <0 .0 1)相关。结论 分析nm 2 3 -H 1和MDR -1mRNA表达 ,有助于了解结直肠腺癌侵袭、分化和转移的特性 ,也有助于了解和判定结直肠腺癌多药耐药的特点 ,从而为临床治疗提供有价值的参考指标。

组织芯片在肿瘤标志物高通量分析中的应用

目的 :组织芯片是新的高通量分析技术 ,具有样本量大、高效、快速等特点。本研究建立组织芯片技术及其相关的免疫组化实验方法 ,并探讨其实际应用价值。方法 :在组织芯片技术的基础之上进行免疫组化和免疫荧光染色 ,同时对各种实验条件进行选择和优化 ,以优化的实验方法检测各种肿瘤标志物的并与传统病理切片技术进行了比较。结果 :制做的组织芯片排列整齐 ,组织点大小一致 ,HE染色均匀。用煮沸、酶消化、微波和高压法进行抗原修复其残点缺点率和检测阳性率分别为2 3 81% ( 15 / 63 )、 68 2 5 % ( 4 3 / 63 ) ,2 0 63 %( 13 / 63 )、77 78% ( 4 9/ 63 ) ,11 11% ( 7/ 63 )、87 3 0 %( 5 5 / 63 ) ,11 11% ( 7/ 63 )、92 0 6% ( 5 8/ 63 )。高压修复法对细胞核抗原的检测阳性率高于微波修复法 ,P <0 0 5。免疫荧光法检测组织芯片上的细胞核或浆抗原也可以得到较好的检测结果。用组织芯片检测多种肿瘤标志物其表达阳性率与大病理切片的检测结果基本相同 ,P >0 0 5。不同或同一种分子标志物在各种不同肿瘤组织中的表达有差异。结论 :用组织芯片检测不同的抗原时应选择不同的抗原修复方法。用免疫荧光法检测组织芯片上的细胞核或质抗原时最好选择高压修复法。组织芯片上的组织点基本可以代表传统病理?

组织芯片制备与原位分析技术

目的 建立组织芯片制备技术并观察在各种原位分析中的应用。方法 1 在传统病理学技术的基础上制备各种组织蜡块作为组织供体 ,再用组织阵列仪按照预先设计制作各种组织阵列蜡块 ,经切片和烤片后即成为各种组织芯片。 2 用各种组织芯片按照常规方法进行HE染色、免疫组化 (IHC)、原位杂交 (ISH)和原位PCR(IS PCR)实验分析。结果 (1)用本方法可分别制备低、中和高密度组织芯片 ,而且组织芯片排列整齐 ,外形美观 ,组织点大小一致且不易脱落。 (2 )HE染色结果均一 ,核浆对比明显 ,便于进行诊断和比较诊断 ;IHC和免疫荧光染色清晰 ,便于观察和诊断 ;ISH和IS PCR实验效果较好 ,可用于各种基因扩增分析。结论 (1)本方法是一种比较成熟的组织芯片制备技术。 (2 )用本方法制备的组织芯片可以进行HE染色和各种原位分析。