敲低RIPK1抑制软骨细胞衰老水平延缓OA病理进展

目的 探讨受体相互作用丝氨酸/苏氨酸激酶1(RIPK1)对骨关节炎(OA)病理进展的影响。方法 将软骨细胞分为对照组(NC组)、白细胞介素-1β组(IL-1β组)和IL-1β+RIPK1短发夹RNA腺病毒载体组(IL-1β+sh-RIPK1组)。使用5μg/L IL-1β刺激小鼠原代软骨细胞,同时使用腺病毒敲低RIPK1表达,检测软骨细胞炎症指标和衰老表型变化。在体内实验中,构建小鼠OA模型,同时使用腺病毒敲低关节软骨中RIPK1的表达,通过免疫印迹、衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色和qRT-PCR观察小鼠膝关节病理进展和衰老表型。结果 在体外细胞实验中,IL-1β刺激能显著上调软骨细胞炎症表型。敲低RIPK1表达后,软骨细胞炎症表型受到明显抑制,且软骨细胞衰老表型也显著下调(P<0.05)。同时,体内动物实验也得到了相同的结果。结论 敲低RIPK1抑制软骨细胞衰老水平延缓OA病理进展。

酸浆苦味A通过抗炎和抗凋亡途径延缓骨关节炎的进展

目的探究酸浆苦味A(Physalin A,PA)对骨关节炎的保护作用及作用机制。方法取5日龄的C57BL/6乳鼠膝关节原代软骨细胞进行传代培养,使用5 ng/mL的白细胞介素-1β(IL⁃1β)刺激原代软骨细胞以模拟骨关节炎的软骨细胞炎性模型,并使用不同浓度的PA(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)进行干预,具体分组为对照组、IL⁃1β组、IL⁃1β+PA(2.5μmol/L)组、IL⁃1β+PA(5μmol/L)组、IL⁃1β+PA(10μmol/L)组。Western blot法检测不同组间蛋白聚糖(ACAN)、二型胶原(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS5)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶2(COX⁃2)、白细胞介素6(IL⁃6)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl⁃2)、Bcl⁃2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果与对照组比较,IL⁃1β组ACAN、COL2A1蛋白表达水平明显下调(P<0.05),而MMP13、ADAMTS5和iNOS、COX⁃2、IL⁃6蛋白表达水平显著升高(P<0.05);相比于IL⁃1β组,IL⁃1β+PA(2.5μmol/L)组、IL⁃1β+PA(5μmol/L)组、IL⁃1β+PA(10μmol/L)组中ACAN、COL2A1蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05),MMP13、ADAMTS5蛋白和iNOS、COX⁃2、IL⁃6蛋白表达水平逐渐下降(P<0.05)。此外,相比于对照组,IL⁃1β组Bcl⁃2/Bax比值下降(P<0.05);相比于IL⁃1β组,IL⁃1β+PA(2.5μmol/L)组、IL⁃1β+PA(5μmol/L)组、IL⁃1β+PA(10μmol/L)组中,Bcl⁃2/Bax比值升高(P<0.05)。结论PA能通过抗炎和抗凋亡途径发挥保护关节软骨的作用。