自体内皮前体细胞移植对急性心肌梗死大鼠微血管新生及心功能的影响

目的探讨外周血来源的内皮前体细胞自体移植,对大鼠急性心肌梗死后微血管新生与心功能的影响。方法抽取SD大鼠外周动脉血,应用Ficoll密度梯度离心法获取单个核细胞。应用含有VEGF和bFGF的特定培养基体外培养,得到内皮前体细胞;结扎SD大鼠冠状动脉左前降支,建立急性心肌梗死模型;然后将得到的自体内皮前体细胞植入缺血心肌局部区域。对照组动物注入细胞培养液。结果与对照组比较,细胞移植组大鼠心功能明显改善,心肌收缩力显著优于对照组;梗死心肌微血管新生更为明显。结论急性心肌梗死心肌局部移植外周血来源的自体内皮前体细胞,能够促进血管新生;对局部梗死心肌组织结构有一定的保护作用,并可在不同时点不同程度恢复心肌收缩力,显著改善心功能。

大鼠外周血内皮前体细胞体外程序化培养的研究

目的探讨从大鼠外周血中获取内皮前细胞的方法,为缺血性心脏病细胞移植治疗提供新的移植材料。方法首先应用密度梯度离心法分取大鼠外周血中的单个核细胞,然后以IMEM、胎牛血清、马血清、VEGF、bFGF等混合而成的培养基,进行体外培养。最后将此方法收获的细胞经一系列免疫荧光染色,并检测其结合UEA-1、摄取acLDL的能力。结果细胞CD31、CD34、Flk-1和vWF免疫荧光染色阳性,并能结合UEA-1、摄取acLDL。同时结合细胞的形态学变化特点,证实得到的细胞为内皮前细胞。结论通过一定的体外分离、培养途径,可以从大鼠外周血获得较为纯化的内皮前细胞。

肺表面活性物质携载超氧化物歧化酶向大鼠肺组织转运的实验研究

目的探讨通过建立肺表面活性物质-超氧化物歧化酶(PS-SOD)脂质体携载 SOD 向大鼠肺组织转运的可行性。方法改良旋转蒸发法制备 PS-SOD 脂质体。选用 Wistar 大鼠32只,随机分为4组:生理盐水对照组、PS 组、SOD 组和 PS-SOD 脂质体组,每组8只。各组分别经主气管直接注入生理盐水、PS、SOD、PS-SOD 脂质体。各组再分为2个亚组,每组4只,分别于术后2 h 和24 h 处死。测定肺灌洗液、肺组织匀浆 SOD 活力;进行肺组织 SOD 荧光标记,荧光显微镜和透射电镜观察肺组织细胞中 SOD 的转运效果。结果 PS-SOD 脂质体为单层脂膜圆形小体,各成分的性能稳定。2 h时,PS-SOD 脂质体组和 SOD 组肺灌洗液 SOD 活力(32.87±5.47、33.14土5.61)高于生理盐水组(2.15±0.17,均 P<0.01),但两组之间差异无统计学意义(P>0.05);PS-SOD 脂质体组荧光平均光密度(0.109±0.018)明显低于生理盐水组和 PS 组(0.144±0.052、0.143±0.026,均 P<0.01);PS-SOD 脂质体组与 SOD 组相比,荧光平均光密度的差异无统计学意义(P>0.05)。24 h 时,PS-SOD 脂质体组肺灌洗液 SOD 活力(11.54±1.42)高于生理盐水组(2.10±0.21)和 SOD 组(6.28±1.45,均P<0.01)。PS-SOD 脂质体组荧光平均光密度(0.112±0.018)明显低于其余3组(生理盐水组:0.146±0.034,PS 组:0.147±0.024,SOD 组:0.135±0.018,均 P<0.01)。无论2 h 还是24 h,PS-SOD 脂质体组肺组织匀浆 SOD 活力(16.83±2.69和15.70±2.75)均高于生理盐水组(5.79±0.93和5.84±1.31,均 P<0.01),而 SOD 组与生理盐水组差异无统计学意义(P>0.05),且 PS-SOD脂质体组肺组织匀浆 SOD 活力明显高于 SOD 组(7.07±1.04、6.11±1.06,均 P<0.01)。透射电镜PS-SOD 脂质体组肺泡Ⅱ型上皮细胞内含有大量的脂质体吞噬泡,其形态及大小与 PS-SOD 脂质体相似。结论 PS-SOD 脂质体能有效地增强 SOD 向肺组织细胞转运,并有缓释延长 SOD 抗氧化活性的作用。通过气管内直接给药使 SOD 在肺组织细胞中更充分发挥其抗氧化活性。