桑黄提取物体内抗肿瘤作用的实验研究

目的通过检测桑黄3种提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤率,探讨桑黄提取物的抗肿瘤活性。方法将SPF级昆明种小鼠随机分组后,于小鼠右前肢腋窝皮下接种H22肝癌细胞,接种1d后,分别采用桑黄3种提取物的低、中、高剂量(100、500、1 000mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,以生理盐水和环磷酰胺为阴性和阳性对照,连续给药10d。实验期间每天测定各组小鼠的体质量;给药10d后处死小鼠测瘤质量,并计算各组抑瘤率。结果桑黄3种提取物可以增加H22荷瘤小鼠体质量。低、中、高剂量桑黄菌丝体多糖提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为32.87%、57.08%和68.35%;低、中、高剂量桑黄子实体多糖提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为44.14%、52.81%和73.69%;低、中、高剂量桑黄发酵液多糖提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为49.16%、50.63%和51.81%。结论桑黄3种提取物均具有较强的抗肿瘤活性,其中抗肿瘤效果最好的是桑黄子实体多糖提取物,该提取物也可以显著增加H22荷瘤小鼠体质量。

青岛崂山野生食药用菌资源的调查统计

通过查阅文献资料及实地调查,对青岛崂山野生食药用菌资源种类进行了统计分析。结果显示:目前崂山地区野生食药用菌种类有92种,其中可食用78种,可药用56种,食药兼用42种,开发利用潜力较大。

ERIC-PCR指纹图谱及电镜技术在纳豆生产菌鉴定中的应用

纳豆是一种传统的日本食品,由纳豆菌在一定温度湿度条件下发酵大豆而来,新鲜纳豆表面金黄色,风味独特营养丰富。纳豆的主要发酵菌为纳豆菌,属芽孢杆菌属,称为纳豆枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis var.natto),是好氧的革兰氏阳性菌。利用扫描电子显微镜和ERIC-PCR指纹图谱技术对4株纳豆菌(高桥纳豆、MIZKAM 1、寿纳豆、MIZKAM无臭)进行了亲缘关系鉴定。结果显示,MIZKAM无臭与寿纳豆的亲缘关系较近,而高桥纳豆与其他品种亲缘关系较远。

选课背景下大学生后排多态性分析及选座原因探究

在选课背景下的大学课堂,学生倾向后排就坐的现象非常明显,后排症问题由此而生。因此笔者利用教学和听课观摩深入了解并分析后排学生的多态性,通过问卷调查了解学生选座位置倾向的行为特征和原因,透过现象分析其本质,以此初步探究提高后排学生学习成效的方式。

桑黄粗多糖除蛋白及抗肿瘤活性

旨在研究Sevag法除桑黄粗多糖中蛋白的最佳工艺,并通过噻唑蓝(MTT)细胞比色法测定除蛋白前后桑黄多糖的抗肿瘤活性。在单因素试验Sevag用量、氯仿与正丁醇体积比、萃取次数、震荡时间的基础上,设计正交试验,经过方差分析,确定Sevag法除桑黄粗多糖蛋白的最佳方案;并且对除蛋白后多糖与粗多糖进行体外抗肿瘤实验。Sevag法除桑黄粗多糖蛋白的最佳工艺:Sevag用量50 mL、V(氯仿)/V(正丁醇)=3、最佳萃取次数6次、最佳振荡时间20 min,在此条件下,多糖的得率为64.8%。体外细胞试验表明除蛋白后多糖与粗多糖对肿瘤细胞EC109和SiHa的抑制率没有明显差异。

响应面法优化桑黄发酵液总多糖的提取工艺

为确定桑黄发酵液多糖提取的最佳工艺条件,以桑黄多糖的含量为考察指标,在单因素试验的基础上,采用响应面法对主要提取工艺参数进行优化,并得到回归模型。结果表明:桑黄发酵液多糖提取的最优工艺条件参数为提取pH12、提取温度96℃、提取时间1.6h。在此条件下,桑黄多糖含量达到11.67mg/mL。实验证明模型拟合程度良好,误差较小。

花脸香蘑8个菌株液体菌种比较研究

通过测定花脸香蘑(Lepista sordida)8个菌株液体菌种培养过程中菌丝生物量、发酵液pH以及胞外羟甲基纤维素酶、半纤维素酶和漆酶活性变化情况,考察不同菌株液体菌种间存在的差异。试验结果表明,8个菌株发酵液pH随培养的进行均呈下降趋势,培养的第8天在pH 5.60左右。菌株Ls5和Ls3的菌丝生物量始终高于其他6个菌株,第8天的最大值均在8.60 g·L^-1以上。供试花脸香蘑8个菌株胞外羟甲基纤维素酶活性均呈持续上升趋势,菌株Ls3第8天酶活力最高达93.02 U·mL^-1,菌株Ls7次之。菌株Ls5、Ls3和Ls7的半纤维素酶活力显著高于其它菌株,第7天~第8天的最高值均在3.11 U·mL^-1以上。8个菌株的漆酶酶活力在第6天均达到最高,菌株Ls4在第6天达到最大值7.79 U·mL^-1。综合分析认为,菌株Ls3的液体菌种具有较高的菌丝生物量和羟甲基纤维素酶、半纤维素酶活性,是优良的花脸香蘑液体菌种工程菌株。

斑玉蕈热激蛋白基因hsp70在刺芹侧耳中的转化

将斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)热激蛋白基因hsp70通过农杆菌介导的方法对刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)进行遗传转化,PCR验证得到刺芹侧耳抗性转化子。试验表明:潮霉素浓度为70μg/mL,乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol/L,侵染时间为90 min,共培养时间为2 d时转化率最高。

甲基营养菌代谢网络途径和代谢工程改造的研究进展

一碳化合物(甲醇或甲烷)高值化转化是当前生物工程领域的重要研究热点。甲基营养菌是一类以甲醇为碳源和能源生长的革兰氏阴性菌,随着基因组测序的开展和各类组学技术的发展,以扭脱甲基杆菌为代表的甲基营养菌的中心代谢网络途径和相关功能基因逐渐明晰。近年来,甲基营养菌中包括基因过表达、基因敲除整合等遗传操作工具的完善以及各种基因调控元件的开发,为甲基营养菌的底盘改造和异源途径优化表达提供了重要基础,国内外的研究推动了甲醇转化成多种高附加值产品。此外,人们渴望利用传统基因工程菌作为底盘构建合成型甲基菌,以期更高效实现甲醇催化转化。本文中,笔者综述了目前甲基营养菌,尤其是扭脱甲基杆菌的代谢网络特点、代谢工程改造策略与应用以及构建合成型甲基细菌这3个方面的研究进展,以期为甲基微生物催化转化的研究提供借鉴。

Eu-苦瓜多糖复合物的合成、抑制食道癌细胞增殖及与DNA相互作用

目的：利用多糖提高机体免疫功能的抗肿瘤机理和稀土直接杀死、杀伤肿瘤细胞的药用价值，合成稀土-多糖复合物，发挥二者的协同作用，开发具有抗肿瘤作用的食品或保健品。方法：以苦瓜多糖为模板，均匀沉淀法制备稀土（Eu）-苦瓜多糖复合物（Eu-MCPS）；利用红外光谱、扫描电镜和透射电镜对其进行结构表征；噻唑蓝（MTT）比色法测定复合物对食道癌细胞的体外增殖抑制作用；光谱法研究Eu-MCPS与鲱鱼精脱氧核糖核酸（DNA）的相互作用。结果：稀土（Eu）以Eu（OH）CO3颗粒的形式附着在相互缠绕螺旋的多糖链上，并不通过化学键连接，Eu-MCPS形成，粒径分布在340～540nm。Eu-MCPS的质量浓度为100μg/mL时，对食管癌细胞的生长抑制率可达到21.1%，表明稀土-苦瓜多糖复合物对食管癌细胞具有一定的体外增殖抑制作用，并且光谱法证明稀土-苦瓜多糖复合物与DNA发生非嵌插作用。

不同提取方法对槐耳提取物的粗多糖含量及K562细胞抑制作用的影响

采用普通水提法、高温高压水提法、冷碱法、热碱法对槐耳(Trametes robiniophila)子实体进行提取,考察了水溶性提取物中粗多糖含量、粗多糖实际得率和对K562细胞的抑制率。碱提法水溶性提取物的得率高于水提法,其中热碱法提取物的得率最高为29.65%,但其粗多糖含量最低,冷碱法粗多糖的实际得率最高为6.93%。四种提取物对K562细胞均有抑制作用,热碱法提取物浓度为2mg/mL作用于K562细胞72h后,抑制率高达92.28%。

甲基营养菌代谢过程新进展与代谢工程改造

甲基营养菌是一类能够利用有机碳一(C1)作为唯一碳源和能源进行生长的微生物,其中心代谢具有特殊性、复杂性和多样性的特点,是研究C1同化、异化和合成代谢的重要对象。近年来,随着甲基营养菌的系统组学研究技术日趋成熟,分子遗传改造工具和分子元器件的不断开发和完善,研究者们对甲基营养菌中心代谢过程和调控机制的认识逐步深化。基于此,系统阐述了甲基营养菌依赖于稀土元素的代谢调控机制,以及甲烷氧化菌中心代谢的新认知和甲醇利用菌途径工程的新策略,为进一步对甲基营养菌的代谢改造和高值产品开发提供一定的参考。

一株野生美味扇菇菌株的驯化栽培及成分测定

采用ITS鉴定法和形态学方法对野生美味扇菇1509菌株进行鉴定,优化其菌丝培养条件.结果表明,菌株1509最适碳源为果糖,最适氮源为蛋白胨,最适无机盐为MgSO_(4).正交试验结果表明,野生菌株1509的最适培养基配方为果糖20.0 g·L^(-1)、蛋白胨2.0 g·L^(-1)、MgSO_(4)0.75 g·L^(-1)、CaCl_(2)0.5 g·L^(-1)、KH_(2)PO_(4)1 g·L^(-1)、VB_(1)10 mg·L^(-1)、琼脂20 g·L^(-1).经人工驯化、栽培出菇获得美味扇菇子实体,测定子实体的粗多糖、粗蛋白质、钙、铁、VC、VE以及17种氨基酸含量;其中钙含量高达133.96 mg·100^(-1)g^(-1),含有7种人体必需氨基酸,必需氨基酸含量满足理想蛋白均衡值.

冬生多孔菌液体培养菌丝体提取物抗氧化活性

以忍冬桑黄(Sanghuangporus lonicericola)、栎生桑黄(S.quercicola)液体培养菌丝体的无水乙醇、乙酸乙酯提取物和阳性试剂为对照,测定了冬生多孔菌(Polyporus brumalis)液体培养菌丝体的无水乙醇、乙酸乙酯提取物对DPPH、ABTS自由基的清除能力。菌丝体提取物对DPPH、ABTS自由基清除能力的IC50值表明:对DPPH自由基的清除能力,冬生多孔菌、栎生桑黄菌丝体的无水乙醇、乙酸乙酯提取物差异不显著,但显著强于忍冬桑黄提取物和阳性对照试剂TBHQ、BHT;对ABTS自由基的清除能力,冬生多孔菌无水乙醇提取物比两种桑黄提取物弱,其乙酸乙酯提取物比忍冬桑黄提取物弱,与栎生桑黄提取物差异不显著,但显著强于水溶性维生素E。本研究首次报道了冬生多孔菌具有抗氧化活性,为其药用功能的开发提供参考。

2株野生侧耳的驯化栽培及营养成分分析

对野外采集得到的野生菌株5271、1710的子实体进行组织分离,经ITS鉴定5271菌株为侧耳属的肺形侧耳(Pleurotus pulmonarius)、1710菌株为侧耳属的紫孢侧耳(Pleurotus sapidus)。菌株5271、1710菌丝最适生长温度分别为26℃、30℃,最适生长p H均为7.0,通过栽培试验发现该2株菌株都具有优良的栽培性状,其菌丝在菌包中生长速度较快、形成原基时间短、出菇期间转潮快、出菇持续时间长。对2株菌株子实体中粗蛋白、粗多糖、微量元素、VC、VE及氨基酸含量进行测定,综合分析发现1710子实体营养价值更高。通过对野生侧耳属的驯化栽培及营养价值研究,可为今后侧耳属野生资源开发利用、新种质资源的获取及遗传育种研究等提供理论依据。

林下仿野生栽培大球盖菇的氨基酸含量分析与食品安全性评估

测定内蒙古杨树林下撒播防野生栽培的大球盖菇(Stropharia. rugosoannulata)成熟子实体中总氨基酸和多种氨基酸的单位含量,计算其中人体必需氨基酸的占比以及各必需氨基酸含量,对其营养价值进行评估,并与香菇进行对比。同时检测了其中4种常见有害重金属和3种农药的单位含量。结果表明,该方式栽培的大球盖菇成熟子实体中氨基酸种类丰富,共检测到17种,总含量高达31.01 g·100^(-1)g^(-1),其中包含7种人体必需氨基酸,总含量为11.04 g·100^(-1)g^(-1),占氨基酸总量的35.59%。总氨基酸含量与必须氨基酸含量远高于香菇,其必需氨基酸组成比例与香菇相似,说明其蛋白品质相近。所检测的重金属含量均在国家规定的食品安全范围内,农药残留极微。故从氨基酸含量、重金属含量及农药残留量方面评价,该大球盖菇可作为营养品质较高且安全的食品,试验结果为大球盖菇的总体营养价值评价和安全性评估提供了一定的参考信息。

导师制对生物专业本科生科研能力培养的探究

本科生导师制是高等教育大众化背景下人才培养模式的创新,对于培养学生创新精神、提高科研能力和素养具有重要意义。结合实际,对本科生导师制的培养模式、学生参与科研现状进行了分析阐述,并对进一步提高本科生科研能力提出解决方法,为导师制的有效开展提供一定的借鉴。

药用真菌桑黄液体培养过程中的抗氧化活性研究

桑黄Sanghuangporus sanghuang是一种珍稀的药用真菌,具有较大的应用潜力。本研究主要以菌丝体生物量、多酚含量、黄酮含量、抗坏血酸(Ascorbic acid,AA)含量、总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、抑制羟自由基能力(Restraining ability to hydroxyl free radicals,RAHFR)、超氧阴离子清除能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、2,2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid),ABTS]自由基清除能力、铁离子还原能力(Ferric reducing antioxidant power,FRAP)和亚铁离子螯合能力为测定指标,对桑黄液体培养过程中的抗氧化活性进行了评价。结果显示,菌丝体生物量在2–10d内增长迅速,第10天达到最大值,在此过程中AA含量和T-AOC也出现了峰值,且多酚含量、黄酮含量和FRAP均呈上升趋势,说明菌株的抗氧化活性与其自身的生长状况、次级代谢产物分泌及还原能力等密切相关。此外,该菌株对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力也较强,于第12天、第10天、第2天和第14天分别达到73.06U/m L、46.78%、86.47%和94.16%,显示了较强的抗氧化活性。较高的亚铁离子螯合能力也说明桑黄在氧化胁迫下可启动自身的抗氧化系统以阻断自由基链反应。研究结果为更好地研究、开发和利用药用真菌桑黄提供了基础资料。

山东省玉米纹枯菌融合群类型及遗传多样性

从山东省14个县市区采集的玉米纹枯病标本上分离获得103个玉米纹枯菌菌株。核荧光染色确定菌丝细胞核的数目,以及利用配对培养法确定不同菌株细胞是否融合。结果表明这些菌株分别属于多核丝核菌的AG-1-IA、AG-1-IB、AG-1-IC、AG-3、AG-4-HG-I、AG-5和WAG-Z融合群和双核丝核菌的AG-Ba融合群,其中AG-1-IA类型菌株数量占菌株总数的60.19%,为优势融合群。通过inter-simple sequence repeats(ISSR)标记技术进行菌株的遗传多样性分析,获得45个ISSR分子标记,其中91.1%的片段具有多态性,表明种群间存在丰富的遗传多样性。UPGMA聚类分析将103个菌株分成6个遗传聚类群,遗传聚类群的菌株组成说明遗传群组的划分与菌株的地理来源和菌株融合群类型均存在一定的相关性。

真菌激发子对桑黄胞内代谢产物积累的影响

利用前期通过大量预试验筛选获得的3种真菌多糖激发子,在桑黄Sanghuangporus sanghuang发酵液中进行添加,研究其对桑黄胞内黄酮、三萜及多糖等代谢产物积累的影响,并对激发效果好的激发子继续进行添加量和激发时间的优化。结果显示:参试的3种真菌多糖激发子在一定程度上均能促进桑黄胞内黄酮和胞内三萜类成分的积累,但对胞内多糖积累的影响不明显;来源菌株为薄多年卧孔菌Perenniporia tenuis的激发子表现最突出,激发效果显著且稳定性良好。激发条件优化的结果表明:在接种的同时按照50mg/L的终浓度进行激发子的添加,激发6d,桑黄胞内黄酮含量达最高值0.7%,比对照提高79.49%;在接种1d后,按照50mg/L的终浓度进行激发子的添加,激发5d,对桑黄胞内三萜类成分代谢的激发效果最显著,胞内三萜含量最高可达5.62%,是对照组的3.43倍。