新型固氮微生物菌肥在小白菜上的应用效果研究

为了探究Rhodopseudomonas palustris菌肥对小白菜产量、营养品质和根际土壤理化性质的影响,确定最佳施肥配比,试验设置5个施用菌液和低含氮量化肥液混合制成的菌肥(菌液比例为0、25%、50%、75%、100%)处理和1个菌液浸种处理,在小白菜的生长初期进行6次小白菜盆栽施肥后,测定其对小白菜植物学性状、营养品质和根际土壤理化性状的影响。结果表明:施用菌液和低含氮量化肥液混合制成的菌肥可以促进小白菜生长,明显提高小白菜叶重,有利于小白菜增产,施用菌液比例为50%的菌肥效果最好;同时,施用菌肥可以明显提高小白菜的营养品质,改善小白菜根际土壤的理化性质,施用菌液比例为50%的菌肥综合效果较好。说明R.palustris菌液和化肥合理配施不仅可以缓解土壤板结问题,还可以提高小白菜的产量和品质,从而达到增产和增收的目的。

Box-Behnken响应面法优化荷叶离褶伞液体发酵培养基

为了优化菌丝培养基以期提高菌丝生物量和氨基酸产量,以荷叶离褶伞菌丝体为试验材料,以生物量和氨基酸含量为指标,利用Box-Behnken响应面法优化液体发酵培养基。试验结果表明:液体发酵最优培养基配方为马铃薯200 g/L、葡萄糖25 g/L、麸皮7.75 g/L、KH 2PO 41.5 g/L、MgSO 41.62 g/L;每100 mL液体培养基可得菌丝体生物量为1.096±0.025 g,菌球大小均匀、菌球浓密,且优化后的菌丝体总氨基酸含量提高了23.9%,子实体总氨基酸含量高达17.06%。优化培养基可用于荷叶离褶伞液体发酵工厂化生产。

甲基营养菌Methylorubrum extorquens AM1抗菌活性物质分离与鉴定

甲基营养菌能够以一碳化合物作为唯一碳源和能源进行生长,培养成本较低,已用来生产多种高附加值产品和药用活性物质。因此,挖掘甲基营养菌的抗菌代谢产物,将为抗菌物质的研发和生产提供研究基础。本研究通过肉汤微量稀释法进行抗菌活性初筛,利用7.5 L发酵罐对活性菌株Methylorubrum extorquens AM1进行放大发酵,采用硅胶柱层析和高效液相色谱等对粗提物进行分离纯化,应用核磁共振、质谱、旋光等手段确定化合物的化学结构,共得到7种化合物,分别为腺苷(1)、5′-S-methyl-5′-thioadenosine(2)、肌苷(3)、尿苷(4)、1,1′-oxybis(2,4-di-tert-butylbenzene)(5)、胸腺嘧啶(6)和烟酰胺(7),其中,化合物1至5为首次在Methylorubrum属的甲基营养菌中分离得到。抗菌活性评价显示化合物1至4对枯草芽孢杆菌、志贺菌和/或金黄杆菌具有一定抑制作用,MIC 50在2.1~375.0μg/mL之间。

产碱杆菌Alcaligenes sp.P156中龙胆酸1,2-双加氧酶GdoP的研究

龙胆酸是芳香族化合物微生物降解的核心代谢产物,龙胆酸降解研究对于芳香族化合物的降解研究具有重要意义。龙胆酸1,2-双加氧酶是催化龙胆酸降解的关键酶。本研究利用双加氧酶催化保守结构域在产碱杆菌P156的基因组上通过多序列比对找到一个龙胆酸双加氧酶基因gdoP;利用分子生物学技术对该基因进行异源表达;并利用重组蛋白对酶学性质和动力学参数进行测定。酶学性质研究表明,GdoP催化反应的最适pH为7.5,最适温度为40℃。GdoP是一个Fe2+依赖型双加氧酶,含有Fe2+离子结合结构域。Fe2+离子能够明显促进GdoP酶活,Cu2+、Cd2+离子对GdoP的酶活有明显抑制。以龙胆酸为底物,GdoP的Km值和Vmax值分别为641μmol/L和23.9U/mg。GdoP具有较强的底物特异性,能够催化龙胆酸开环生成3-马来酰丙酮酸,不能催化5-氨基水杨酸、水杨酸和1-羟基-2-萘酸的转化。本研究系统的研究了龙胆酸1,2-双加氧酶GdoP的酶学性质,有助于更好的研究芳香族化合物的微生物降解过程。

双孢蘑菇新菌株蛋白质的营养评价与分析

本研究测定了双孢蘑菇亲本FA15与突变株FA15-5、FA15-6子实体的氨基酸含量,并利用非生物学指标,以鸡蛋蛋白为标准蛋白,以WHO/FAO必需氨基酸参考模式为评价标准,对双孢蘑菇子实体的蛋白质营养价值进行了全面评价。结果表明:亲本与两个突变株的氨基酸种类齐全,必需氨基酸占氨基酸总量的百分比分别为36.99%、39.31%、36.53%。亲本和突变株的限制性氨基酸均为异亮氨酸。氨基酸评分(AAS)显示,FA15-5、FA15-6比FA15分别低31.71%高25.00%。突变株FA15-6的必需氨基酸指数(EAAI)值较FA15高39.97%,生物价(BV)较FA15高54.73%,营养指数(NI)值较FA15高40.00%。因此,在营养价值方面,FA15-6是优于亲本的良好突变菌株。

耐盐桑黄菌株筛选及其驯化

桑黄是我国古往今来医药书籍记载的一种重要药用菌,其菌丝体和子实体中含有多种活性代谢物,广泛用于药品、保健品、食品和护肤品中。从海水盐度和NaCl浓度两个方面筛选耐盐菌株,研究结果表明:桑黄HLJ耐海水盐度和耐NaCl浓度能力高于桑黄SYS和桑黄W。3.2%海水盐度抑制HLJ菌丝的生长且抑制率为12%,NaCl抑制HLJ菌丝生长,1%浓度抑制率为36%;海水盐度驯化培养后,HLJ抗盐能力没有显著提高。本文研究结果为盐碱地埋土栽培桑黄以及海水发酵培养桑黄菌丝体研究提供菌株资源和实践指导。